本文關(guān)鍵詞：耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥小鼠免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

網(wǎng)友wz_198620近日為您收集整理了關(guān)于耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥小鼠免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究的文檔，希望對(duì)您的工作和學(xué)習(xí)有所幫助。以下是文檔介紹：分類號(hào):R725.5密級(jí):單位代碼:10422學(xué)號(hào):201013495⑧∥菇辦寫(xiě)博士學(xué)位論文(專業(yè)學(xué)位)論文題目:hrombocytopenia作者姓名學(xué)院名稱專業(yè)名稱指導(dǎo)教師合作導(dǎo)師付金秋醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)(兒科學(xué))鞠秀麗教授2015年4月10日萬(wàn)方數(shù)據(jù)原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名:^寸金杠日期:≯,r,j,勱關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的EI]屆U件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:悄鉚峙師簽名:萬(wàn)日期:矽步.j.為萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄中文摘要????????..???????????.1英文摘要????????????????????5符號(hào)說(shuō)明??????..?????????????10第一部分:耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞的體外培養(yǎng).??????????12前言???????????????????..12日U舌???????????????????..1Z材料與方法?????????????????..15結(jié)果???????????????????..23皇口7K???????????????????··厶。討論????????..???????????26結(jié)論????.???????????????.30附圖表???????????????????31參考文獻(xiàn)????????.??????????37第二部分:小鼠免疫性血小板減少癥模型的構(gòu)建????????.41前言???????????????????..41日U舌???????????????????..4l材料與方法?????????????????..44結(jié)果???????????????????..48討論???????????????????..49結(jié)論???????????????????..53附圖???????????????????..54參考文獻(xiàn)??????????????????.58第三部分:耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥小鼠免疫耐受及其機(jī)制的初步研究???????????????????..62前言???????????????????..62日U舌???????????????????..62材料與方法?????????????????..64結(jié)果???????????????????..0。7}日木·?·??????????.???????..,討論???????????????????..68萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博L學(xué)位論文結(jié)論???????????????????..73附圖表???????????????????74參考文獻(xiàn)??????????????????.77致謝?????????????????????81萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博士學(xué)位論文CoNTENTSChinseEnglishPartI:ellsInVitro?.?.??.??.??.?..12MaterialsAndFiguresAndPartII:hrombocytopeniaModelInMaterialsAndMethods?????????????????????????????一44PartlII:hrombocytopeniaAndItsRelatedMaterialsAnd萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博士學(xué)位論文FiguresAndReferences.?.???.?.???..?.?.?.?.?.?.?.??.?.???..?.?..??.??.?...77萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博士學(xué)位論文耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥小鼠免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究專業(yè)兒科學(xué)博士研究生付金秋導(dǎo)師鞠秀麗教授中文摘要研究背景:樹(shù)突狀細(xì)胞(ells,DCs)是免疫穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)細(xì)胞,可以激活初始T細(xì)胞�？梢哉T導(dǎo)自身免疫耐受的DCs叫作耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞(ells,tDCs)。tDCs低表達(dá)MHC11分子和共刺激分子,并在自身免疫病中發(fā)揮強(qiáng)有力的免疫調(diào)控能力。免疫性血小板減少癥(hrombocytopenia,ITP)是一種臨床常見(jiàn)的出血性疾病,以免疫介導(dǎo)的血小板破壞和/或血小板生成抑制為主要特點(diǎn)。其主要的發(fā)病機(jī)制是識(shí)別自身血小板抗原的自身反應(yīng)性T細(xì)胞被激活,導(dǎo)致對(duì)自身血小板抗原的免疫耐受被打破。最近研究顯示,tDCs作為一種免疫細(xì)胞用于自身免疫紊亂的治療已取得成功,如自身免疫性腦脊髓炎、膠原或佐劑誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病等已有臨床試驗(yàn)報(bào)道。我們參照國(guó)外有關(guān)文獻(xiàn),用不同的細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)產(chǎn)生tDCs,用主動(dòng)免疫法建立ITP動(dòng)物模型,研究tDCs對(duì)ITP的防治作用,并探討其可能機(jī)制。研究目的:1.探討不同細(xì)胞因子在誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞(ells,tDCs)中的作用,觀察不同因子組合培養(yǎng)條件下tDCs的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞表型和功能變化,尋找培養(yǎng)細(xì)胞所需要的最佳細(xì)胞因子;2.建立免疫性血小板減少癥(hrombocytopenia,ITP)小鼠模型,觀察血小板數(shù)目、血小板平均體積等I臨床指標(biāo)的變化;3.探討TGF—B1和IL-IO聯(lián)合誘導(dǎo)的tDCs在ITP小鼠模型治療中的作用及其機(jī)制。萬(wàn)方數(shù)據(jù)山東大學(xué)博士學(xué)位論文研究方法:1.tDCs的誘導(dǎo)培養(yǎng):采用C57BL/6d,鼠的骨髓細(xì)胞,分離單個(gè)核細(xì)胞。在含GM-CSF、IL-4、TGF-B1、IL-IO或TGF一01和IL一10兩種因子聯(lián)合的RPMI1640培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓tDCs,按不同的組合分為五組進(jìn)行體外誘導(dǎo)培養(yǎng):imDC組(GM—CSF+IL一4)、mDC組(GM—CSF+IL一4+LPS)、10一DCs組(GM—CSF+IL一4+IL-IO)、T-DCs組(GM-CSF+IL一4+TGF—B1)、10T—DCs組(GM—CSF+IL一4+工L一10+TGF-B1)。并利用GFP慢病毒感染tDCs細(xì)胞。光鏡及熒光顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞CD80、CD86、I—A/I—E、CDllc、PD—L1、ILT3表達(dá),WST法檢測(cè)各組DC細(xì)胞刺激淋巴細(xì)胞增殖活性,qRT—R7的mRNA表達(dá)水平,ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL—IO年HTGF—B的分泌水平和混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN—Y、IL一10和TGF—B的分泌水平。2.ITPd、鼠模型的建立:應(yīng)用抗血小板自身抗體MWRe930抗體(模型組)或PBS(對(duì)照組)腹腔免疫BALB/c純種小鼠,分別于免疫后的第1h,3h,24h,48h,72h,96h,120h取血檢測(cè)血常規(guī),監(jiān)測(cè)血小板計(jì)數(shù)及平均血小板體積(MPV)水平的變化,并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)

12>

  本文關(guān)鍵詞：耐受性樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥小鼠免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。