發(fā)布時間：2016-12-06 16:17

  本文關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素B1呼吸道暴露與肝癌發(fā)病關(guān)系的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《廣西醫(yī)科大學(xué)》 2015年

黃曲霉毒素B1呼吸道暴露與肝癌發(fā)病關(guān)系的研究

賴浩  

【摘要】：原發(fā)性肝癌(Primary Liver Carcinoma, PLC)是全球常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一,其中90%以上為肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma, HCC)。據(jù)統(tǒng)計,80%以上的HCC出現(xiàn)在發(fā)展中國家,如亞洲的東南部及非洲的中部和西部。我國每年有360,000例HCC新增病例及350,000例HCC死亡病例。廣西是我國HCC的高發(fā)區(qū),流行病學(xué)研究提示黃曲霉毒素飲食暴露和乙肝病毒(HBV)慢性感染是廣西地區(qū)HCC高發(fā)的兩大重要的環(huán)境致病因素,而且,這兩大重要環(huán)境致病因素誘發(fā)肝癌的相關(guān)分子機(jī)理也有了較深入的研究。之前的研究均認(rèn)為,黃曲霉毒素的攝入主要是通過消化道暴露途徑；近十余年來,各種針對黃曲霉素飲食攝入的防范措施已經(jīng)得到了廣泛的重視,理論上有望一定程度降低我區(qū)HCC的發(fā)病率,但據(jù)相關(guān)的研究和我們的臨床觀察發(fā)現(xiàn),廣西肝癌的發(fā)病率并沒有明顯下降,反而呈現(xiàn)逐年上升的趨勢,某些特定區(qū)域或人群HCC的發(fā)病率仍然較高,如農(nóng)民,糖廠、造紙廠及家禽養(yǎng)殖場某些工作環(huán)境的工人等等。但這些人群的飲食習(xí)慣及HBV感染率與其他人群并無明顯差異。我們前期的相關(guān)調(diào)查還發(fā)現(xiàn),上述一些特定人群血清AFB1或人血清AFB1白蛋白加合物(AFB1-ALB)檢測呈陽性的發(fā)生率較高；國外相關(guān)的文獻(xiàn)亦有類似報道。這一現(xiàn)象很值得我們高度重視和進(jìn)一步的研究。我們的一些前期現(xiàn)場調(diào)查發(fā)現(xiàn),這些特定人群有一個共同的特點(diǎn),就是在工作中會經(jīng)常接觸某些粉塵,如蔗渣粉塵、谷物粉塵等。我們知道,廣西是一個亞熱帶地區(qū),溫暖潮濕的天氣周期較長,極利于霉菌的生長,這類粉塵被霉毒素污染的情況普遍存在；因此,我們懷疑,經(jīng)呼吸道吸入含霉毒素的粉塵,可能是AFB1進(jìn)入人體的另一途徑,并且可能與這些特定人群HCC的發(fā)病有關(guān)。為證實(shí)這一判斷,本研究選取了區(qū)內(nèi)一家大型糖廠作為現(xiàn)場,通過流行病學(xué)調(diào)查,采取回顧性分析的方法,分析長時間暴露于蔗渣粉塵的人群及其他崗位人群30年肝癌及其他惡性腫瘤的發(fā)病情況,對比檢測某些特定環(huán)境粉塵中AFB1的含量,采集高粉塵工作環(huán)境人群及其他崗位人群的靜脈血,檢測并對比二組人群血清中AFB1-ALB的濃度,初步探討高粉塵工作環(huán)境呼吸道暴露與肝癌及其他惡性腫瘤發(fā)病的可能聯(lián)系；同時通過建立AFB1呼吸道暴露的動物模型,探索AFB1經(jīng)呼吸道吸入與實(shí)驗(yàn)動物AFB1-ALB血清濃度變化的關(guān)系,驗(yàn)證AFB1呼吸道暴露對實(shí)驗(yàn)動物血清AFB1-ALB濃度的影響。并且通過動物實(shí)驗(yàn),動態(tài)檢測AFB1呼吸道暴露的實(shí)驗(yàn)動物肝臟組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)及其P53、P21等基因表達(dá)的分子學(xué)改變,探討AFB1呼吸道暴露對實(shí)驗(yàn)動物肝臟的影響。本研究的結(jié)果有助于更全面地了解AFB1不同暴露途徑與肝癌發(fā)病的關(guān)系,為更有效地預(yù)防黃曲霉毒素暴露所導(dǎo)致的肝癌提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究分以下三個部分：第一部分現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)崗位人群血清AFB1-ALB檢測分析目的：分析蔗渣粉塵暴露與肝癌等惡性腫瘤發(fā)病的聯(lián)系,檢測高粉塵作業(yè)場所AFB1的污染情況,探索AFB1呼吸道暴露對相關(guān)作業(yè)人群血清AFB1-ALB濃度的影響。方法：采用回顧性隊(duì)列研究的方法,選取廣西區(qū)內(nèi)一家大型糖廠作為現(xiàn)場,選擇該調(diào)查現(xiàn)場1984-2013年的員工為研究對象,統(tǒng)計同一現(xiàn)場接觸蔗渣粉塵的人群及其他崗位人群30年間肝癌等惡性腫瘤的發(fā)病情況。采集高粉塵作業(yè)場所及其他作業(yè)場所的空氣樣本,以及高粉塵作業(yè)場所的物表蔗渣粉塵樣本,使用ELISA法檢測所有樣本中AFB1的含量。根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn),本研究檢測符合納入標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)人員血清AFB1-ALB含量共384人,其中,在高粉塵作業(yè)場所(壓榨車間、蔗渣倉庫、紙廠)的人群為181人(A組),其他崗位的人群203人(B組)。并采用隨機(jī)抽樣的方法,從血清AFB1-ALB檢測陽性的職工家庭中采集大米(主食)50例樣本,檢測這些家庭日常主食的AFB1含量。結(jié)果：本研究總計觀察119852.9人年,共隨訪該調(diào)查現(xiàn)場1984-2013年的職工5791人。從1984年1月至2013年12月,該調(diào)查現(xiàn)場職工(包括退休)共有835人患病,其中患惡性腫瘤的人數(shù)為330人,占39.52%。在接觸蔗渣粉塵的人群中,惡性腫瘤發(fā)病排在疾病譜第一位,其余依次為呼吸系統(tǒng)疾病、心血管疾病等；在其他崗位人群中,位列疾病譜前三位的分別為心血管疾病、惡性腫瘤及呼吸系統(tǒng)疾病。研究分析發(fā)現(xiàn),在接觸蔗渣粉塵的人群中,肝癌、肺癌發(fā)病的相對危險度顯著上升,分別為其他崗位人群的4.30倍及2.63倍,而其他惡性腫瘤發(fā)病的相對危險度上升不明顯。糖廠不同作業(yè)場所的空氣樣本AFB1檢測均呈陰性,但蔗渣粉塵中的AFB1檢測呈陽性。ELISA試驗(yàn)檢測結(jié)果提示,在181例A組工人中,有102名工人AFB1-ALB檢測陽性,濃度為38.51±44.80 pg/ml;B組的203名工人僅有12名陽性,濃度為15.58±6.42 pg/ml。兩組人群血清AFB1-ALB陽性率及濃度的差異有統(tǒng)計學(xué)意義。在血清AFB1-ALB陽性的職工家中采集到的50份大米均未發(fā)現(xiàn)AFB1污染。第二部分通過新西蘭兔AFB1呼吸道暴露的動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)動物血清AFB1-ALB濃度變化與呼吸道暴露的關(guān)系目的：探討AFB1呼吸道暴露對新西蘭兔血清AFB1-ALB濃度及肝功能ALT、AST、ALP及TP的影響。方法：選取新西蘭兔60只,采取隨機(jī)分組的方法,分為高暴露組(A組,N=20)、中暴露組(B組,N=20)及低暴露組(C組,N=20)。連續(xù)7日通過呼吸道插管滴注AFB1溶液的方法,建立AFB1呼吸道暴露的動物模型。A組、B組及C組新西蘭兔每日吸入的AFB1溶液量分別為75ug/Kg、 50ug/Kg及25ug/Kg。檢測新西蘭兔第1、第3、第7及第21日血清AFB1-ALB的濃度及肝功能ALT、AST、ALP及TP。結(jié)果：至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,共有4只新西蘭兔死亡,包括A組3只,B組1只。A組的17只新西蘭兔中,第1日有8只(47.06%)血清AFB1-ALB檢測陽性,濃度為3.35±1.86(1.3-6.8)pg/ml,第3天血清AFB1-ALB陽性的新西蘭兔升至10只(58.82%),第7天為11只(64.71%),而到了第21天則降至3只(17.64%)。B組的19只新西蘭兔中,第1日有3只(15.79%)血清AFB1-ALB檢測陽性,濃度為1.97±0.95(0.9-2.7)pg/ml,第3天血清AFB1-ALB陽性的新西蘭兔升至5只(26.32%),第7天為5只(26.32%),而到了第21天則降至2只(10.53%)。C組未發(fā)現(xiàn)有血清AFB1-ALB檢測陽性的新西蘭兔。經(jīng)呼吸道吸入AFB1后,血清AFB1-ALB陽性的新西蘭兔肝功能ALT、AST、ALP及TP的值呈動態(tài)性升高,但未發(fā)現(xiàn)血清AFB1-ALB陰性新西蘭兔肝功能的值出現(xiàn)顯著改變。我們分析了AFB1-ALB檢測陽性新西蘭兔的肝功能,其中,第3天A組新西蘭兔的ALT、ALP的值,第7天A、B二組新西蘭兔ALT、AST、ALP、TP的值,第21天A組新西蘭兔TP的值與對照(吸入AFB1前的兔血清標(biāo)本)差異有統(tǒng)計學(xué)意義。第7日的新西蘭兔肝功能ALT及AST的值與血清AFB1-ALB的值存在顯著正相關(guān)(P0.05)；但ALP及TP的值與血清AFB1-ALB的值不存在相關(guān)(P0.05)。第三部分 通過建立樹鼩AFB1呼吸道暴露的模型,進(jìn)一步了解實(shí)驗(yàn)動物AFB1呼吸道暴露后肝臟組織形態(tài)學(xué)及P53、P21等基因表達(dá)的分子學(xué)改變目的：觀察AFB1呼吸道暴露對樹鼩肝臟P53、P21基因表達(dá)的影響及樹鼩肝組織形態(tài)學(xué)的改變,探討AFB1呼吸道暴露誘發(fā)肝癌的可能性。方法：選取健康樹鼩80只,采用隨機(jī)分組的方法,分為A組(空白組,N=40)和B組(呼吸道暴露組,N=40)。A組樹鼩只進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)喂養(yǎng),不作任何其他干預(yù)；B組樹鼩除標(biāo)準(zhǔn)喂養(yǎng)外,通過呼吸道插管的方法,給予樹鼩霧化吸入AFB1溶液,每日吸入量為200 ug/Kg/D,每周吸入AFB1溶液6次。按設(shè)計方案定期采集樹鼩血清樣本,取樹鼩肝組織活檢,檢測組織形態(tài)學(xué)改變及P53、P21基因的動態(tài)表達(dá)情況。結(jié)果：本部分實(shí)驗(yàn)從2013年9月11號開始,至2015年1月28號結(jié)束,共進(jìn)行了504天(72周)。在實(shí)驗(yàn)期間,B組有7只樹鼩死亡。至實(shí)驗(yàn)結(jié)束,A組未發(fā)現(xiàn)血清AFB1-ALB陽性的樹鼩血清樣本,活檢提示未發(fā)現(xiàn)有肝組織出現(xiàn)異常改變,P53、P21基因動態(tài)檢測未發(fā)現(xiàn)有異常表達(dá)。而B組第一周抽血即發(fā)現(xiàn)有8只出現(xiàn)血清AFB1-ALB陽性,至第三周,B組全部樹鼩出現(xiàn)血清AFB1-ALB陽性。B組樹鼩中,從第33周開始,即發(fā)現(xiàn)肝組織有輕度炎癥反應(yīng),以炎細(xì)胞浸潤匯管區(qū)為主,伴肝細(xì)胞點(diǎn)狀壞死,偶爾見灶狀及碎屑樣壞死。第43周活檢時,可發(fā)現(xiàn)肝臟Kuffer細(xì)胞增生,炎細(xì)胞浸潤,還可以見到空泡變性或者透明變性的肝細(xì)胞。自72周時,還可見肝組織內(nèi)結(jié)構(gòu)絮亂,伴嗜酸樣變及重度水樣變性。B組樹鼩P53、P21基因動態(tài)檢測發(fā)現(xiàn)有異常表達(dá)。通過以上的系列研究,我們可以得出以下的幾點(diǎn)結(jié)論：1,經(jīng)呼吸道吸入是AFB1進(jìn)入機(jī)體的途徑；2,血清AFB1白蛋白加合物濃度的升高與其AFB1呼吸道暴露的量及暴露的持續(xù)時間有關(guān)；3,經(jīng)呼吸道持續(xù)吸入AFB1可造成血清AFB1-ALB陽性的實(shí)驗(yàn)動物肝損害;4,AFB1呼吸道暴露是否與HCC的發(fā)生有直接聯(lián)系,值得進(jìn)一步的研究。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

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1 黃惠明,徐群英,胡敏;黃曲霉毒素檢測方法研究的概述[J];中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2001年04期

2 劉家珍,劉芮,姚軍;黃曲霉毒素B_1分析方法[J];職業(yè)與健康;2002年03期

3 ;衛(wèi)生部關(guān)于禁止使用黃曲霉毒素超標(biāo)的大豆生產(chǎn)加工食品的批復(fù)[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2003年05期

4 李培武,馬良,楊金娥,張文,楊春洪,楊湄;糧油產(chǎn)品黃曲霉毒素B_1檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J];中國油料作物學(xué)報;2005年02期

5 高秀芬,計融;黃曲霉毒素的分析方法[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2005年04期

6 江湖,熊勇華,許楊;黃曲霉毒素分析方法研究進(jìn)展[J];衛(wèi)生研究;2005年02期

7 胡娜;許楊;;黃曲霉毒素污染控制技術(shù)研究進(jìn)展[J];中國公共衛(wèi)生;2006年03期

8 林裕;;高效液相色譜法測定食品中黃曲霉毒素[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2006年04期

9 高秀芬;計融;李燕俊;王玉平;;高效液相色譜法測定玉米中的黃曲霉毒素[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2007年02期

10 羅超;李逢慧;程天印;;黃曲霉毒素檢測方法研究概況[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年S1期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孟慶利;;黃曲霉毒素的檢測及控制[A];《2010中國豬業(yè)進(jìn)展》論文集[C];2010年

2 張崟;曾慶孝;朱志偉;韓光赫;;黃曲霉毒素的快速檢測方法[A];“科技創(chuàng)新與食品產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展”學(xué)術(shù)研討會暨2008年廣東省食品學(xué)會年會論文集[C];2008年

3 馬靜;朱惠蓮;唐志紅;凌文華;;尿糞黃曲霉毒素排泄及生物干預(yù)[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會抗誘變劑和抗癌劑專業(yè)委員會第三次全國學(xué)術(shù)會議、中國毒理學(xué)會生化與分子毒理專業(yè)委員會第五屆學(xué)術(shù)交流會、貴州省環(huán)境誘變劑學(xué)會成立大會暨首屆學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2004年

4 朱聰英;應(yīng)永飛;韋敏玨;陳慧華;陸春波;周文海;林仙軍;羅成江;;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定飼料中黃曲霉毒素的研究[A];中國毒理學(xué)會獸醫(yī)毒理學(xué)與飼料毒理學(xué)學(xué)術(shù)討論會暨獸醫(yī)毒理專業(yè)委員會第4次全國代表大會會議論文集[C];2012年

5 于建興;沈潔;陸筑鳳;李加友;;黃曲霉毒素研究進(jìn)展[A];中國毒理學(xué)會獸醫(yī)毒理學(xué)與飼料毒理學(xué)學(xué)術(shù)討論會暨獸醫(yī)毒理專業(yè)委員會第4次全國代表大會會議論文集[C];2012年

6 朱聰英;應(yīng)永飛;韋敏玨;陳慧華;陸春波;周文海;林仙軍;羅成江;;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定飼料中黃曲霉毒素的研究[A];2013年飼料毒理學(xué)術(shù)報告會暨飼料毒理學(xué)專業(yè)委員會第五屆全國代表大會材料集[C];2013年

7 計成;趙麗紅;馬秋剛;關(guān)舒;雷元培;;黃曲霉毒素生物降解的研究及前景展望[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集（上冊）[C];2009年

8 陳建民;張雪輝;楊美華;金鉞;;中藥中黃曲霉毒素檢測概況[A];第八屆全國中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會與第五屆全國藥用植物和植物藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

9 尹淑濤;薛文通;張惠;;黃曲霉毒素檢測方法研究進(jìn)展[A];2007中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會學(xué)術(shù)年會暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學(xué)研研討會論文集[C];2007年

10 徐日榮;唐兆秀;藍(lán)新隆;;黃曲霉毒素研究進(jìn)展[A];2008年福建省科協(xié)第八屆學(xué)術(shù)年會農(nóng)業(yè)分會場論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 瞿凌云 通訊員 張夏訊;[N];長江日報;2005年

2 上海交通大學(xué) 徐建雄 教授;[N];中國畜牧報;2003年

3 記者 劉志偉 通訊員 張夏訊;[N];科技日報;2005年

4 記者 祝文明;[N];中國食品質(zhì)量報;2005年

5 國家質(zhì)檢總局標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)中心 蘇志明;[N];中國國門時報;2006年

6 王寧　馬秋剛 張建云 胡新旭 計成;[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2009年

7 林祥 梁斌 白艷青 崔順花;[N];中國畜牧水產(chǎn)報;2001年

8 農(nóng)業(yè)部油料與制品質(zhì)檢中心項(xiàng)目主持人 李培武 研究員;[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

9 記者 高原;[N];新華每日電訊;2010年

10 ;[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 賴浩;黃曲霉毒素B1呼吸道暴露與肝癌發(fā)病關(guān)系的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 雷佳文;農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素新型免疫分析技術(shù)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 鮑蕾;黃曲霉毒素的生物積累及其檢測技術(shù)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)體系研究[D];中國海洋大學(xué);2009年

4 張雪輝;中藥中黃曲霉毒素檢測方法研究及模式識別在中藥領(lǐng)域中的應(yīng)用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

5 王妍入;黃曲霉毒素替代物綠色免疫分析研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

6 丁小霞;中國產(chǎn)后花生黃曲霉毒素污染與風(fēng)險評估方法研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

7 張道宏;黃曲霉毒素雜交瘤細(xì)胞株的選育及免疫層析檢測技術(shù)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

8 楊煉;抗黃曲霉毒素B_1的單鏈抗體的篩選、表達(dá)和改造[D];江南大學(xué);2010年

9 樊彥紅;黃曲霉毒素B_1和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對錦鯉及原代培養(yǎng)肝細(xì)胞的毒性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

10 王鋒;黃曲霉毒素B_1的輻射降解機(jī)理及產(chǎn)物結(jié)構(gòu)特性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 許艷麗;產(chǎn)黃曲霉毒素菌株的檢測方法及產(chǎn)毒條件的研究[D];中國海洋大學(xué);2008年

2 張亮;T-2毒素與黃曲霉毒素特異性抗體的制備及應(yīng)用[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 都曉慧;花生黃曲霉毒素風(fēng)險評估抽樣方法的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

4 張盼;生物法降解黃曲霉毒素B1的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

5 劉旭;糧食和食用油中黃曲霉毒素B_1高效低耗液相色譜檢測方法的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

6 韓愈杰;黃曲霉拮抗菌株的分離篩選及對黃曲霉毒素的降解效果[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 王文威;抑制黃曲霉毒素的深海細(xì)菌發(fā)酵及活性物質(zhì)特性研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2015年

8 才琳;抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體和單鏈抗體的制備及活性研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

9 蔣廣明;黃曲霉毒素B_1單抗的制備及初步應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2007年

10 李冰;黑曲霉對黃曲霉毒素B_1的降解及應(yīng)用[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素B1呼吸道暴露與肝癌發(fā)病關(guān)系的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：206635