目的:豬鏈球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一種重要的人豬共患病原菌,可導(dǎo)致非可逆性腦膜炎、休克,甚至猝死。中性粒細(xì)胞,也被稱為多形核白細(xì)胞(Polymorphonuclear,PMN),作為防御細(xì)菌性感染的第一道防線,在細(xì)菌性腦膜炎中發(fā)揮重要作用。核糖體蛋白SA(Ribosomal protein SA,RPSA)作為細(xì)胞表面受體,在病原體粘附到宿主細(xì)胞的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)SS2誘發(fā)腦膜炎時(shí),小鼠腦組織內(nèi)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)增多及中性粒細(xì)胞表面RPSA表達(dá)增加。因此,本研究旨在探究RPSA陽(yáng)性中性粒細(xì)胞在SS2誘發(fā)腦膜炎過(guò)程中的功能及對(duì)血腦屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的影響。方法:本研究首先選用C57BL/6小鼠進(jìn)行SS2感染試驗(yàn),通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析小鼠腦組織中性粒細(xì)胞、RPSA陽(yáng)性中性粒細(xì)胞的的表達(dá)量,平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)腦組織載菌量;體外分離小鼠骨髓中性粒細(xì)胞,通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)、激光共聚焦顯微鏡、qPCR進(jìn)行體外RPSA陽(yáng)性中性粒細(xì)胞的驗(yàn)證;通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光顯微鏡、qPCR分析PMN RPSA

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖4.1（A）、（B）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠腦組織PMN及PMNRPSA+表達(dá)量

第4章實(shí)驗(yàn)結(jié)果18圖4.1（A）、（B）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠腦組織PMN及PMNRPSA+表達(dá)量。（C）腦組織載菌量的檢測(cè)。Fig.4.1(A)and(B)FlowcytometrywereusedtodetecttheexpressionofPMNandPMNRPSA+inmou....

圖4.2（A）流式細(xì)胞術(shù)鑒定小鼠骨髓中性粒細(xì)胞的純度

第4章實(shí)驗(yàn)結(jié)果19圖4.2（A）流式細(xì)胞術(shù)鑒定小鼠骨髓中性粒細(xì)胞的純度。（B）20×低倍熒光顯微鏡觀察小鼠骨髓中性粒細(xì)胞的細(xì)胞核形態(tài)。（C）吉姆薩染色觀察小鼠骨髓中性粒細(xì)胞的細(xì)胞核形態(tài)。Fig.4.2(A)Thepurityofmousebonemarrowneutrophils....

圖4.3（A）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)SS2誘導(dǎo)后小鼠骨髓中性粒細(xì)胞RPSA的表達(dá)量

第4章實(shí)驗(yàn)結(jié)果20圖4.3（A）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)SS2誘導(dǎo)后小鼠骨髓中性粒細(xì)胞RPSA的表達(dá)量。（B）60×高倍鏡激光共聚焦顯微鏡觀察小鼠骨髓中性粒細(xì)胞胞膜和胞核RPSA的定位。（C）qPCR檢測(cè)小鼠骨髓中性粒細(xì)胞RPSA的表達(dá)量。Fig.4.3(A)RPSAexpressiono....

圖4.4（A）、（B）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PMNRPSA+及PMNRPSA-的吞噬功能

第4章實(shí)驗(yàn)結(jié)果21體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SS2可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞表達(dá)RPSA，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)已發(fā)現(xiàn)腦組織PMN、PMNRPSA+與載菌量呈負(fù)相關(guān)。因此，探究PMNRPSA+與PMNRPSA-功能如何？通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析PMNRPSA+與PMNRPSA-吞噬功能，結(jié)果表明：各組PMNR....

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