發(fā)布時間：2020-12-03 11:28

　　H7N9亞型流感病毒是一種新型重組的甲型流感病毒。2013年首次發(fā)現(xiàn)其可以感染人,并引起人嚴(yán)重的呼吸綜合征,致死率極高,給全球公共衛(wèi)生安全帶來了嚴(yán)重威脅。目前對甲型H7N9亞型流感病毒的研究主要集中在野鳥源、家禽源等毒株,對鵪鶉源研究的報道并不多。因此,對2018年河北省鵪鶉源甲型H7N9亞型流感病毒分離株進(jìn)行致病性和傳播能力的研究,為河北省甲型H7N9亞型流感的防控提供理論和技術(shù)支撐。研究內(nèi)容如下:1.完成了一株河北省 2018 年鵪鶉源甲型 H7N9 亞型流感病毒A/quail/Hebei/CH06-07/2018（H7N9）,（下文簡稱CH06-07毒株）的分離鑒定及生物學(xué)特性研究。同源性、氨基酸突變位點(diǎn)及遺傳進(jìn)化分析結(jié)果表明,除PB2基因和NP基因核苷酸同源性最高毒株為鴨源外,其余基因（PB1、PA、HA、NA、M、NS）核苷酸同源性最高毒株均為雞源;CH06-07毒株的HA基因編碼蛋白有G186V突變,PB2基因編碼蛋白有I292V和K526R突變,PB1基因編碼蛋白有I368V突變,PA基因編碼蛋白有K356R和S409N突變,M1基因編碼蛋白有N30D突變,M2基因編碼蛋... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１中國五次Ｈ７Ｎ９亞型禽流感疫情??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?Ｆｉｖｅ?Ｅｐｉｄｅｍｉｃ?Ｗａｖｅｓ?ｏｆ?Ｈ７Ｎ９?ｓｕｂｔｙｐｅ?ａｖｉａｎ?ｉｎｆｌｕｅｎｚａ?ｉｎ?Ｃｈｉｎａ??

口處發(fā)生氣??溶膠，采用粒子儀器管理軟件（ＡＩＭ）儲存原始數(shù)據(jù)并生成氣溶膠的空氣動力學(xué)粒徑??譜圖。??基于肺部液體定量霧化器的精確定量氣溶膠感染：在密封性完好的麻醉籠中放入??數(shù)個浸泡過異氟烷的脫脂棉球，然后將小鼠放入麻醉籠架上，待２０？３０?ｓ后取出麻醉??的小鼠。利用肺部液體定量霧化器對小鼠進(jìn)行肺部氣溶膠攻毒：待小鼠麻醉后，使用??肺部液體定量霧化器吸�。担�?ｐＬ的病毒液從小鼠口腔進(jìn)入，當(dāng)肺部液體定量霧化器的??針頭位于氣管分叉處時噴入病毒氣溶膠，完成可精確定量的氣溶膠感染（圖３）。??ｒＩ??Ｉ?ｉｎｓｃ＊??Ａ肺部液體定量霧化器?Ｂ小鼠氣溶膠感染??圖３小鼠氣溶膠感染模型??Ｆｉｇ．?３?Ｍｏｕｓｅ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ａｅｒｏｓｏｌ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ??２．８兩種攻毒方式對小鼠致病性的研宄??隨機(jī)選�。罚抵唤】禒顟B(tài)良好，體重１８？２０?ｇ的６周齡ＢＡＬＢ／ｃ雌性小鼠。其中１５??２２??

?一株鵪鶉源甲型Ｈ７Ｎ９亞型流感病毒的致病性及傳播能力研究???只小鼠用于攻毒后臨床癥狀、體重變化及存活率試驗(yàn)，設(shè)置肺部氣溶膠攻毒組、滴鼻??攻毒組、空白對照組各５只，另外６０只用于病毒的組織分布試驗(yàn)與小鼠肺臟組織Ｈ．Ｅ．??染色與免疫組化染色，設(shè)置肺部氣溶膠攻毒組、滴鼻攻毒組、空白對照組各２０只。病??毒攻毒組分別采用肺部氣溶膠攻毒和滴鼻攻毒的方法，每只小鼠接種５０?（病毒含??量為ＫｐＥＩＤＷｍＬ），不同組別小鼠單獨(dú)飼養(yǎng)。??２．９流感病毒氣溶膠采集的方法??在實(shí)驗(yàn)動物攻毒后１?ｄ、３?ｄ、５?ｄ，使用３０式全玻璃氣溶膠采樣器??（Ａｌｌ－Ｇｌａｓｓ－Ｉｍｐｉｎｇｅｒ?３０，ＡＧＩ－３０）采集氣溶膠傳播評價裝置中的微生物氣溶膠，氣??溶膠采集設(shè)備設(shè)定的采樣參數(shù)為１２．５?Ｌ／ｍｉｎ，采集６０?ｍｉｎ?（圖４）。并對采集到的液??體狀態(tài)的微生物氣溶膠進(jìn)行流感病毒Ｍ基因的Ｑ－ＰＣＲ，流感病毒Ｍ基因的Ｑ－ＰＣＲ??檢測方法由實(shí)驗(yàn)室之前建立（Ｑ－ＰＣＲ引物見表１２）。分析攻毒期間氣溶膠傳播評價??裝置中的流感病毒的含量及變化。??＼?＝?ＬＭ??Ｊ?一?…：??圖４氣溶膠采集模式圖??Ｆｉｇ．?４?Ａｅｒｏｓｏｌ?ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ??表１２甲型Ｈ７Ｎ９流感病毒Ｑ－ＰＣＲ引物??Ｔａｂ．?１２?Ａ?（Ｈ７Ｎ９）?ｖｉｒｕｓ?Ｑ－ＰＣＲ?ｐｒｉｍｅｒ??引物?序列（５＇ｔｏ３＇）??ｐｒｉｍｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ（５’ｔｏ３’）??Ｍ－Ｆ?ＣＧＣＡＧＡＡＧＧＧＧＣＴＣＴＴＧＧＡＣＴＡ??Ｍ－Ｒ?Ａ?丁丁?Ｃ?丁?ＣＡ?丁?ＧＣＣＴＧＡＴＴＡＧＴＧＧＧＴＴＧ???２３??


本文編號：2896323