發(fā)布時間：2024-09-17 12:35

　　托品烷生物堿(Tropane alkaloids,TAs)是在臨床上常用的一類抗膽堿藥物,在鎮(zhèn)痛、麻醉、抗暈動病、戒毒、帕金森氏病、農藥中毒等治療方面有良好的作用。目前托品烷生物堿主要從天然植物顛茄(Atropa belladonna)、曼陀羅(Datura stramonium)、山莨菪(Anisodus tanguticus)等植物中提取,市場需求巨大,工業(yè)合成的成本較高。顛茄是被中國藥典收錄,主要提供托品烷生物堿的商業(yè)藥源植物,天然的顛茄中托品烷類生物堿的含量很低,利用基因代謝工程來提高顛茄中的托品烷生物堿的含量具有很好的研究意義。本研究通過顛茄基因組DNA克隆得到藥用植物顛茄下游關鍵酶基因啟動子H6H-p;從C58C1發(fā)根農桿菌pRiA4質粒上克隆得到rolC基因。將rolC基因克隆構建至pBI121的GUS編碼區(qū)獲得CaMV35S驅動的表達載體;同樣地,以pBI121為表達載體,H6H-p為組織定位啟動子與rolC基因進行載體構建,獲得H6H-p驅動的rolC基因定位表達載體;進行轉化獲取得到EHA105-pBI121-CaMV35S-rolC和EHA105-pBI121-H6...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1莨菪堿分子結構

莨菪堿,亦稱為天仙子堿,它首先是從傳統(tǒng)中草藥天仙子、洋金花中分離而得到的顛茄生物堿之一,其分子結構是由莨菪醇和莨菪酸縮合而生成的酯(如圖1-1)。呈現(xiàn)出白色結晶性粉末,無臭,有苦辣味。易產生消旋,水溶液呈堿性,在乙醇和稀酸中極易溶解,在氯仿、水、乙醚和苯中可溶。莨菪堿主要存在于茄....

圖1-2山莨菪堿分子結構

山莨菪堿(Anisodamine),是我國學者從茄科植物唐古特山莨菪(Anisodustanguticus(Maxim.)Pascher)的根中提取出來的一種莨菪烷類生物堿(覃綱等,2010);外形為白色結晶或結晶性粉末,無臭,極易溶于水,在乙醇中易溶。分子式為C17H23NO....

圖1-3托品烷類生物堿合成途徑(強瑋等,2016)

1.1.4托品烷生物堿合成途徑研究進展托品烷生物堿在茄科植物中的合成途經已經明確(如圖1-3),主要起始于鳥氨酸和精氨酸的脫羧,然后由合成途徑上游的第一個關鍵酶N-甲基腐胺轉移酶(PMT)(SuzukiKetal,1999),催化生成托品烷生物堿的合成前體物質N-甲基腐胺....

圖3-1H6H-p啟動子序列全長

通過VectorNITexplorer軟件分析,獲取H6H-p啟動子序列全長,如圖3-1,H6H-p全長為1100bp,起始密碼子是ATG。3.1.2rolC基因生物信息學分析

本文編號：4005463