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蘋果MdMRLK2基因在抗逆中的功能初探

發(fā)布時(shí)間:2024-07-07 03:59
  植物類受體激酶(Receptor-Like Kinases,RLKS)是一類含有受體結(jié)構(gòu)域的單次跨膜蛋白,含有絲氨酸/蘇氨酸激酶結(jié)構(gòu)域,能夠識別胞外的各種信號,在植物生長發(fā)育和激素調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。擬南芥中的FER基因的功能近幾年被廣泛報(bào)道,但蘋果中關(guān)于此類基因的報(bào)道數(shù)量較少。本研究在實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上,通過系統(tǒng)比較蘋果基因組中所有的FER基因,選擇與擬南芥FER相似度最高的MdMRLK2作為研究對象,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化成功獲得了MdMRLK2過量表達(dá)及干擾表達(dá)的蘋果轉(zhuǎn)基因株系,并以該轉(zhuǎn)基因植株為材料鑒定了MdMRLK2對干旱、鹽脅迫以及腐爛病抗性的調(diào)控功能。獲得的主要結(jié)果如下:1.蘋果MdMRLK2的表達(dá)分析。通過對MdMRLK2的基因表達(dá)情況進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),MdMRLK2在植物不同組織中均有所表達(dá),并在根中的表達(dá)量最高。在干旱脅迫、鹽脅迫和腐爛病菌侵染條件下,MdMRLK2的表達(dá)量均呈現(xiàn)隨處理時(shí)間的增加,表達(dá)量下降的趨勢,說明MdMRLK2在植物應(yīng)答生物脅迫和非生物脅迫中均有參與。2.蘋果MdMRLK2在干旱脅迫下的功能分析。對MdMRLK2過表達(dá)...

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
主要符號對照表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 干旱脅迫概述
        1.1.1 干旱脅迫對植物的影響
        1.1.2 植物響應(yīng)干旱脅迫的過程
    1.2 鹽脅迫概述
        1.2.1 鹽脅迫對植物的影響
        1.2.2 植物響應(yīng)鹽脅迫的過程
    1.3 類受體激酶研究進(jìn)展
        1.3.1 類受體激酶在植物生長發(fā)育中的作用
        1.3.2 類受體激酶在非生物脅迫中的作用
        1.3.3 類受體激酶在生物脅迫中的作用
        1.3.4 類受體激酶參與植物響應(yīng)脅迫的過程
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 蘋果MdMRLK2 基因克隆與表達(dá)分析
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 載體與菌株
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要引物
        2.1.5 主要儀器及設(shè)備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 逆境處理
        2.2.2 植物RNA提取
        2.2.3 cDNA第一鏈的合成
        2.2.4 生物信息學(xué)分析
        2.2.5 基因克隆
        2.2.6 基因表達(dá)分析
        2.2.7 進(jìn)化樹構(gòu)建
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 MdMRLK2 基因序列分析
        2.3.2 MdMRLK2 基因表達(dá)模式分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 MdMRLK2 轉(zhuǎn)基因蘋果的抗逆功能分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 引物
        3.1.3 主要試劑與培養(yǎng)基配方
        3.1.4 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.1.5 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的蘋果遺傳轉(zhuǎn)化
        3.1.6 轉(zhuǎn)基因蘋果干旱處理
        3.1.7 葉片氣孔開張度觀察
        3.1.8 轉(zhuǎn)基因蘋果鹽脅迫處理
        3.1.9 腐爛病菌侵染
        3.1.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 轉(zhuǎn)基因蘋果植株的鑒定
        3.2.2 轉(zhuǎn)基因蘋果抗旱性分析
        3.2.3 ABA處理下過表達(dá)MdMRLK2 植株的氣孔運(yùn)動情況
        3.2.4 轉(zhuǎn)基因蘋果抗鹽性鑒定
        3.2.5 轉(zhuǎn)基因蘋果抗腐爛病菌鑒定
    3.3 討論
        3.3.1 過表達(dá)MdMRLK2 轉(zhuǎn)基因蘋果在干旱脅迫下的抗性
        3.3.2 過表達(dá)MdMRLK2 轉(zhuǎn)基因蘋果在鹽脅迫下的抗性
        3.3.3 過表達(dá)MdMRLK2 轉(zhuǎn)基因蘋果在抗腐爛病菌的表型分析
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論和創(chuàng)新點(diǎn)
    4.1 結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號:4003121

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