【摘要】：利用PCR方法獲得PRRSV M基因,使用原核表達(dá)系統(tǒng)p ET-28a(+)-BL21(DE3)誘導(dǎo)表達(dá)M蛋白。用表達(dá)的M蛋白建立檢測(cè)PRRSV抗體的間接ELISA。通過(guò)特異性試驗(yàn)、阻斷試驗(yàn)和重復(fù)性試驗(yàn)考查基于重組M蛋白建立的ELISA(M-ELISA)的實(shí)用性,同時(shí)使用M-ELISA和IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV試劑盒檢測(cè)收集的400份臨床血清樣品。結(jié)果,用PCR擴(kuò)增到了PRRSV M基因,獲得了重組M蛋白,建立了用于檢測(cè)PRRSV抗體的間接ELISA(M-ELISA);該M-ELISA具有良好的特異性和重復(fù)性。400份臨床血清的檢測(cè)結(jié)果與IDEXX試劑盒的檢測(cè)結(jié)果的符合率為95.3%。上述結(jié)果表明,本研究基于表達(dá)的重組M蛋白,成功建立了檢測(cè)RRSV抗體的間接ELISA。
[Abstract]:PRRSV M gene was obtained by PCR method, and M protein was induced by prokaryotic expression system p ET-28a ()-BL21 (DE3). Establishment of indirect ELISA. for Detection of PRRSV Antibody with expressed M protein The practicability of ELISA (M-ELISA) based on recombinant M protein was examined by specific test, blocking test and repeatability test. M-ELISA and IDEXX Herd Chek ELISA for PRRSV kits were used to detect 400 clinical serum samples. Results: PRRSV M gene was amplified by PCR, recombinant M protein was obtained and indirect ELISA (M-ELISA) was established to detect PRRSV antibody. The M-ELISA has good specificity and reproducibility. The coincidence rate of 400 clinical serum and IDEXX kit is 95.3%. The results indicated that the indirect ELISA. for detecting RRSV antibody was successfully established based on the expressed recombinant M protein.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院動(dòng)物檢疫實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2013BAD12B04)
【分類號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：2297575