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甘藍(lán)型油菜BnaLCR23基因CRISPR-Cas9表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2018-03-04 05:05

  本文選題:甘藍(lán)型油菜 切入點(diǎn):BnaLCR 出處:《分子植物育種》2017年08期  論文類型:期刊論文


【摘要】:BnaLCR23基因是甘藍(lán)型油菜"湘油15號(hào)"種子不同發(fā)育時(shí)期抑制差減雜交文庫中的一個(gè)功能未知基因,分析表明其功能可能與種子發(fā)育和油脂代謝相關(guān),為了明確該基因的功能,本研究基于CRISPR-Cas9基因編輯系統(tǒng)構(gòu)建了該基因的敲除質(zhì)粒。利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的油菜下胚軸遺傳轉(zhuǎn)化方法將敲除質(zhì)粒轉(zhuǎn)入甘藍(lán)型油菜中,經(jīng)潮霉素抗性篩選以及抗性苗基因組DNA的PCR檢測,獲得轉(zhuǎn)基因油菜。轉(zhuǎn)基因油菜材料的獲得為深入研究BnaLCR23基因在甘藍(lán)型油菜種子發(fā)育和儲(chǔ)存物的積累過程中的功能提供了幫助。
[Abstract]:BnaLCR23 gene is an unknown gene in the suppression subtractive hybridization library of "Xiangyou 15" seeds in different developmental stages of Brassica napus. The analysis shows that its function may be related to seed development and lipid metabolism. In this study, the knockout plasmid was constructed based on CRISPR-Cas9 gene editing system. The knockout plasmid was transferred into Brassica napus by Agrobacterium tumefaciens mediated Hypocotyl genetic transformation. Transgenic rapeseed was obtained by hygromycin resistance screening and PCR detection of genomic DNA of resistant seedlings. The obtained transgenic rapeseed materials provided help for further study on the function of BnaLCR23 gene in the seed development and storage accumulation of Brassica napus L.
【作者單位】: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】:國家自然基金面上項(xiàng)目(31571707) 國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目子課題(2016YFD0100202-8)共同資助
【分類號(hào)】:Q943.2;S565.4

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1 李一凡;多元質(zhì)粒工程技術(shù)及CRISPR-Cas9介導(dǎo)的基因組編輯技術(shù)的建立與應(yīng)用[D];天津大學(xué);2015年

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本文編號(hào):1564224

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