發(fā)布時(shí)間：2020-12-21 21:19

　　禽白血�。ˋvian leukosis）是制約養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的主要禽類傳染病,以垂直傳播為主,免疫污染禽白血病病毒（Avian leukosis virus, ALV）的活疫苗也是引發(fā)該病的重要原因之一。目前主要通過定期對(duì)雞群進(jìn)行ALV血清學(xué)監(jiān)測(cè),采取淘汰凈化的方法控制該病。我國(guó)開展ALV血清學(xué)監(jiān)測(cè)通常使用美國(guó)IDEXX等公司的檢測(cè)試劑盒,檢測(cè)成本高、推廣范圍窄。因此,研究開發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的ALV檢測(cè)試劑盒,降低ALV檢測(cè)成本,擴(kuò)大雞群檢測(cè)范圍,對(duì)我國(guó)防控本病有重要的實(shí)際應(yīng)用意義。另外,ALV-J在臨床上自報(bào)道以來一直處于不斷的變異中,當(dāng)前尚無確切證據(jù)證明ALV-J在我國(guó)雞群中致病作用有多樣性的機(jī)制,而病毒準(zhǔn)種的多樣性很有可能是ALV-J致病作用多樣性的機(jī)制之一。因此,開展ALV準(zhǔn)種研究對(duì)于從分子水平上解析ALV-J在我國(guó)不同雞群中致病作用的多樣性具有重要的理論意義。本研究通過原核表達(dá)ALV p27蛋白,制備抗p27蛋白多克隆抗體,建立了ALV抗原ELISA檢測(cè)方法和ALV抗體ELISA檢測(cè)方法。試驗(yàn)結(jié)果表明,建立的兩種檢測(cè)方法與禽常見傳染病病毒或其陽(yáng)性血清、大腸桿菌陽(yáng)性血清無交叉反應(yīng)... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
插圖與附表清單
縮略詞表
第一章 引言
    1 禽白血病概況
        1.1 病原學(xué)
        1.2 流行病學(xué)
        1.3 臨床特征和病理變化
        1.4 禽白血病的檢測(cè)和診斷
        1.5 預(yù)防和控制
    2. 病毒的準(zhǔn)種及其演變
        2.1 準(zhǔn)種的特性
        2.2 準(zhǔn)種的作用
        2.3 準(zhǔn)種的研究方法
    3 本研究的目的與意義
第二章 禽白血病病毒P27蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)和多克隆抗體的制備
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 RT-PCR擴(kuò)增結(jié)果
        2.2 重組克隆載體的構(gòu)建與鑒定
        2.3 重組表達(dá)質(zhì)粒的雙酶切鑒定
        2.4 P27蛋白在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)
        2.5 表達(dá)蛋白的純化
        2.6 表達(dá)蛋白的WESTERN-BLOTTING鑒定
        2.7 兔抗P27蛋白抗體的效價(jià)測(cè)定
        2.8 兔抗P27蛋白抗體的純化
        2.9 兔抗P27抗體的酶標(biāo)化結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第三章 禽白血病病毒抗原ELISA檢測(cè)方法的建立
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 雙抗體夾心ELISA相關(guān)試驗(yàn)條件的確定
        2.2 陰陽(yáng)性臨界值的確定
        2.3 特異性試驗(yàn)
        2.4 敏感性試驗(yàn)
        2.5 重復(fù)性試驗(yàn)
        2.6 符合率試驗(yàn)
        2.7 保存期試驗(yàn)
        2.8 臨床試驗(yàn)
    3 討論
    4 小結(jié)
第四章 禽白血病病毒抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 間接ELISA相關(guān)試驗(yàn)條件的確定
        2.2 陰陽(yáng)性臨界值的確定
        2.3 特異性試驗(yàn)結(jié)果
        2.4 敏感性試驗(yàn)結(jié)果
        2.5 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
        2.6 符合率試驗(yàn)結(jié)果
        2.7 保存期實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第五章 禽弱毒疫苗中ALV的分離鑒定及其全基因組序列分析
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 三種活疫苗中ALV的分離鑒定
        2.2 三株ALV全基因組的克隆測(cè)序
        2.3 分離毒株GP85基因的序列分析與亞群鑒定
        2.4 分離毒株與不同亞群參考毒株主要基因區(qū)域的同源性比較
    3 討論
    4 小結(jié)
第六章 血管瘤病雞中AIV-J的分離鑒定及其準(zhǔn)種分析
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 病毒分離鑒定
        2.2 血清抗體檢測(cè)
        2.3 ALV-J的準(zhǔn)種多樣性
        2.4 氨基酸序列同源性比較
        2.5 細(xì)胞傳代前后準(zhǔn)種比較
    3 討論
    4 小結(jié)
第七章 結(jié)論
第八章 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]禽白血病病毒p27抗原的單克隆抗體制備及雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法建立[D]. 王緒.揚(yáng)州大學(xué) 2011
[2]禽白血病病毒p27蛋白表達(dá)純化及其單克隆抗體的制備[D]. 楊守鋒.西南大學(xué) 2009
[3]以重組NP為抗原GPMV抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立[D]. 劉立峰.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
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本文編號(hào)：2930525