發(fā)布時間：2020-12-19 13:33

　　黑木耳味道鮮美,營養(yǎng)豐富,是我國主要的食用菌之一。黑龍江作為我國黑木耳的主產(chǎn)區(qū)之一,具有得天獨厚的地理環(huán)境,孕育有豐富的野生黑木耳種質(zhì)資源。本實驗對黑龍江野生黑木耳種質(zhì)資源進行一個初步的探究,為新菌種的篩選馴化培育工作提供一定的理論依據(jù)；對于全面了解黑龍江地區(qū)的黑木耳種質(zhì)資源以及搜集保存野生黑木耳菌株具有重要意義；此外,從分子水平上對于新菌種的知識產(chǎn)權(quán)保護,加強菌種監(jiān)管等方面有一定的理論意義。本實驗主要有以下結(jié)果：（1）從黑龍江地區(qū)采集并分離純化培養(yǎng)后共獲得31株野生黑木耳菌株。（2）對分離獲得的菌株進行菌絲體培養(yǎng)后進行菌絲基因組DNA提取,利用基礎(chǔ)PCR（Polymerase Chain Reaction聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)體系篩選出22對SSR（Simple Sequence Reapt微衛(wèi)星序列）引物,然后對SSR-PCR反應(yīng)體系進行了相關(guān)的優(yōu)化實驗。共獲得條帶位點103個,其中102個多態(tài)性位點,多態(tài)性位點比例高達(dá)99%,每對引物檢測出多態(tài)性位點1-10個,引物的PIC （Polymorphism Information Content引物多樣性指數(shù)）值為0.47-0.91之間,... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

黑木耳生活史Fig.1-1LifecycleofAuriculariaauricula1.1.3黑木耳應(yīng)用價值

不足之處是栽培周期較長，需2?3年。主要分為段木栽培前準(zhǔn)備，人工接種與發(fā)菌期管理，出耳采收及越冬管理等過程，詳細(xì)工藝流程如圖1-2。栽培期確定砍樹一剔枝截段令架曬 #人工接種￠1菌種選擇 Mr加工!fc藏 越冬管理 h堆發(fā)菌I ^^采收 管理 起架 ? 清場搭棚 ? 排場圖1-2黑木耳段木栽培流程Fig. 1-2 Auricularia auricula wood cultivation process(2)代料栽培隨著社會的發(fā)展，科技的進步，20世紀(jì)70年代我國開始進行代料栽培黑木耳的研宄丨黑木耳代料栽培具有原料來源廣泛、周期短、產(chǎn)量高、效益好等特點，且可節(jié)省木材，不受地域限制，現(xiàn)已在黑龍江、吉林等省份廣泛推廣。代料栽培黑木耳可分塑料袋栽和瓶栽兩種。兩者在配料、接種、出耳管理等方面基本相似。1)栽培季節(jié)：代料栽培黑木耳一年可安排兩季，即春季和秋季。2)栽培場所：栽培場所選在室內(nèi)或室外均可，室內(nèi)栽培對溫度，濕度，通氣等條件容易控制，但要注意通風(fēng)滿足黑木耳對氧氣的需求并增加光照。另外，耳棚附近應(yīng)供水方便，環(huán)境衛(wèi)生。3)培養(yǎng)料配制：代料栽培黑木耳的原料很多，主要的有棉籽殼，雜木屑，稻草，玉米芯等

3.1菌種分離本實驗對采集到的野生菌種材料全部進行了分離，獲得31株原始菌株。采用內(nèi)部組織挑取分離的方法而未使用耳片組織切塊的方法，從耳片內(nèi)部挑取菌絲組織，避免了因為耳片外部帶菌造成菌株分離失敗，分離的菌絲組織經(jīng)過培養(yǎng)都獲得了相應(yīng)的純菌，純化培養(yǎng)成一級菌種。一級菌種經(jīng)過三角瓶液體接種培養(yǎng)均獲得了大量的菌絲體，通過紗布過濾、濾紙吸水、烘箱供干后獲得含水量較少的菌絲，適于進行基因組DNA提取，于一2(rC保存?zhèn)溆谩?.2基因組DNA提取采用改良的SDS方法從供試菌株中提取DNA，取樣加適量Loading Buffer釆用丨％瓊脂糖凝膠電泳，160V (5V/cm)電壓電泳30min左右，于凝膠成像儀下觀察并保存圖象，部分菌株樣品提取效果見圖3-1，圖中1?28為表1-1中菌株編號；M為DL2000 Marker。瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示條帶清晰，整齊，無拖尾、彌散等現(xiàn)象，說明提取的DNA比較純，基本無降解，效果較好，符合實驗要求，可以進行后續(xù)PCR實驗。


本文編號：2925992