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下調(diào)miR-155的表達(dá)對人A549/DDP細(xì)胞株順鉑耐藥性的影響及機制

發(fā)布時間:2024-06-28 19:43
  背景與目的:肺癌已成為全球范圍內(nèi)發(fā)病率與病死率均居首位的惡性腫瘤;熓沁M(jìn)展期非小細(xì)胞肺癌重要的治療手段,但是臨床上常常由于癌細(xì)胞對藥物耐藥導(dǎo)致化療失敗。近來研究表明非蛋白編碼小分子RNA(miRNA)能通過基因突變、調(diào)節(jié)腫瘤相關(guān)靶基因及增殖凋亡相關(guān)基因影響肺癌的發(fā)生發(fā)展及藥物的敏感性。miR-155作為miRNA家族中的一種,大量研究也證實其參與了多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展與耐藥,但miR-155在肺癌中所擔(dān)當(dāng)?shù)慕巧坝绊懛伟┑南嚓P(guān)機制仍存在爭議。本研究通過觀察miR-155在A549及其耐藥細(xì)胞株A549/DDP中的表達(dá)差異,探究其對肺癌細(xì)胞及順鉑敏感性的影響及機制,為耐藥型肺腺癌的個體化治療提供新的思路。方法:1.細(xì)胞培養(yǎng):人肺腺癌A549、A549/DDP細(xì)胞株在RPMI-1640完全培養(yǎng)基(含10%胎牛血清及1%青鏈霉素混合液)中生長,并放于具有適宜條件的細(xì)胞培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,飽和濕度)。(A549/DDP細(xì)胞培養(yǎng)基中加入終濃度為1μg/ml的順鉑以維持其耐藥性。)2.耐藥株的鑒定及miR-155及TP53INP1m RNA表達(dá)差異的檢測:MTT法檢測A549/DDP...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2順鉑對A549/DDP及A549細(xì)胞的IC50值

圖2順鉑對A549/DDP及A549細(xì)胞的IC50值

差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=17.36,P=0.001)(見圖2)。0102030405060020406080100120A549/DDP細(xì)細(xì)A549細(xì)細(xì)順順順順(μmol/L)細(xì)細(xì)胞胞(%)圖1A549/DDP及A549....


圖6三組中TP53INP1的蛋白的Western-blot圖像

圖6三組中TP53INP1的蛋白的Western-blot圖像

A549/DDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR155抑制劑前后TP53INP1蛋白表達(dá)以GAPDH為內(nèi)參,進(jìn)行Western-blot檢測三組中TP53INP1蛋白的表見圖6)。未轉(zhuǎn)染組、空轉(zhuǎn)染組及抑制劑組中TP53INP1蛋白的相對表(見表1)。miR155抑制....


圖9順鉑對三組細(xì)胞IC50值

圖9順鉑對三組細(xì)胞IC50值

圖8不同濃度順鉑作用下各組細(xì)胞的生長抑制曲線0102030405060020406080100120未未未胞空未未胞抑抑抑胞順順順順(μmol/L)細(xì)細(xì)胞胞(%)


圖10三組中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的Western-blot圖像

圖10三組中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的Western-blot圖像

rn-blot檢測A549/DDP細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR155抑x蛋白表達(dá)水平DH為內(nèi)參,進(jìn)行Western-blot檢測三組中Bcl-2、Ba2、圖10)。miR155抑制劑轉(zhuǎn)染A549/DDP后,與未轉(zhuǎn)l-2蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)(圖11),Bax表達(dá)....



本文編號:3996587

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