人原發(fā)性肝癌相關抗原的蛋白質(zhì)組學初步研究
本文關鍵詞: 肝細胞癌 蛋白組學 相關抗原 Dna J同源B亞家族成員 蛋白酶體亞基α 出處:《第三軍醫(yī)大學學報》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的檢測肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相關抗原,并予以驗證。方法分別提取15例HCC組織及其癌旁組織總蛋白。Western blot分別檢測各總蛋白與其HCC患者自體血清的雜交情況。雙向電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技術將15例混合總蛋白中的各蛋白進行分離與染色。圖像分析法比對染色膠上HCC組織及其癌旁組織蛋白的表達差異,基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間二級質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two mass analyzers for tandem mass spectrometry,MALDI-TOF MS/MS)技術及生物信息學網(wǎng)絡數(shù)據(jù)庫分別對表達差異蛋白予以分析鑒定與檢索匹配,免疫組織化學與Western blot分別檢測該差異蛋白在人HCC組織及其癌旁組織中的變化情況。結果 2-DE染色膠圖像分析比對結果顯示,HCC及其癌旁組織蛋白表達差異斑點共90個,MALDI-TOF MS/MS與數(shù)據(jù)庫對其中19個蛋白斑點分析鑒定與檢索匹配發(fā)現(xiàn)15個蛋白表達上調(diào),4個蛋白表達下調(diào)。免疫組織化學與Western blot檢測結果顯示,與對照比較,上調(diào)蛋白中的Dna J同源B亞家族成員11(dna J homolog subfamily B member 11,DNAJB11)在HCC組織中的表達明顯增強,下調(diào)蛋白中的蛋白酶體亞基α3(proteasome subunit alpha type 3,PSMA3)在HCC組織中的表達則相反。結論人原發(fā)性肝癌相關抗原DNAJB11在HCC組織中的表達上調(diào),PSMA3在HCC組織中的表達下調(diào)。
[Abstract]:Objective to detect the related antigens of hepatocellular carcinoma (HCC). Methods Total protein of 15 HCC tissues and their adjacent tissues were extracted. Blot was used to detect the hybridization of total proteins with autologous serum of patients with HCC. Two-dimensional electrophoresis. The proteins in 15 cases of mixed total proteins were separated and stained by 2-DE.The expression of proteins in HCC and its adjacent tissues were compared by image analysis. Matrix assisted laser desorption / ionization time of flight mass spectrometry. Matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two. Mass analyzers for tandem mass spectrometry. MALDI-TOF / MS / MS technique and bioinformatics network database were used to identify and search the differentially expressed proteins. Immunohistochemistry and Western blot were used to detect the changes of the differential protein in human HCC and its adjacent tissues. There were 90 differentially expressed spots in HCC and its adjacent tissues. The expression of 15 proteins was up-regulated by MALDI-TOF MS/MS and database. The expression of four proteins was down-regulated. The results of immunohistochemistry and Western blot showed that the protein expression was lower than that of control. Dna J homologous B subfamily member 11 DNA J homolog subfamily B member 11 was upregulated. The expression of DNA JB11 in HCC was significantly increased, and the proteasome subunit alpha type 3 was down-regulated. Conclusion the expression of human hepatocellular carcinoma associated antigen DNAJB11 in HCC is up-regulated and PSMA3 is down-regulated in HCC.
【作者單位】: 重慶市腫瘤研究所血液腫瘤消化呼吸內(nèi)科;重慶市腫瘤研究所血液腫瘤生物治療科;
【基金】:重慶市應用開發(fā)計劃項目(CSTC2014yykfA110031) 中國醫(yī)師協(xié)會研究項目(ZGYSXH20120701)~~
【分類號】:R735.7
【正文快照】: identified by MALDI-TOF MS/MS,15 proteins were up-regulated,and 4 down-regulated.Immunohistochemicalassay and Western blotting confirmed that compared with the proteins from the adjacent tissues,Dna J homologsubfamily B member 11(DNAJB11)was significantl
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