發(fā)布時間：2018-01-30 01:24

  本文關(guān)鍵詞： miR- 小非編碼RNA 早期生長反應(yīng)蛋白 肝癌 表型　出處：《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究mi R-718和早期生長反應(yīng)蛋白3(EGR3)在肝癌細胞系Hep G2及SMMC-7721中對細胞惡性行為的作用。創(chuàng)新點:首次在肝癌細胞系Hep G2和SMMC-7721中發(fā)現(xiàn)miR-718作為抑癌基因及EGR3作為促癌基因起到調(diào)控腫瘤惡性行為的作用。方法:采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法構(gòu)建mi R-718和EGR3的過表達及敲降質(zhì)粒,并采用實時定量PCR(q RT-PCR)方法驗證質(zhì)粒有效性;采用MTT法和克隆形成實驗檢測肝癌細胞系HepG 2和SMMC-7721的生長增殖能力;采用Transwell遷移侵襲實驗檢測肝癌細胞系Hep G2和SMMC-7721的遷移和侵襲能力;采用增強型綠色熒光蛋白(EGFP)熒光報告載體實驗驗證miR-718的靶基因;采用qR T-PCR和蛋白質(zhì)印跡(Western blot)檢測相關(guān)基因表達水平的變化。結(jié)論:mi R-718在肝癌細胞系HepG 2和SMMC-7721中起到抑癌基因的作用;EGR3在肝癌細胞系Hep G2和SMMC-7721中起到促癌基因的作用;miR-718是通過靶定EGR3 m RNA 3'UTR下調(diào)EGR3的表達起到抑癌基因的作用。
[Abstract]:Objective: to study the expression of mi R-718 and early growth response protein 3 (EGR3). Effect of hepatoma cell line Hep G2 and SMMC-7721 on malignant behavior of hepatoma cell line. Innovation: for the first time in hepatocellular carcinoma cell line Hep. MiR-718 as tumor suppressor gene and EGR3 as promoter gene were found in G2 and SMMC-7721. Methods: polymerase chain reaction (PCR) was used to regulate the malignant behavior of tumor. The overexpression and knockdown plasmid of mi R-718 and EGR3 were constructed by PCR. The validity of plasmid was verified by real-time quantitative PCR(q RT-PCR method. The growth and proliferation of hepatoma cell line HepG 2 and SMMC-7721 were detected by MTT assay and clone forming assay. The migration and invasion ability of hepatoma cell line Hep G2 and SMMC-7721 were detected by Transwell migration and invasion assay. The enhanced green fluorescent protein (EGFP) fluorescent report vector was used to verify the target gene of miR-718. QR T-PCR and Western blot were used. Conclusion: the cell line HepG 2 and SMMC-7721 play an important role in inhibiting oncogene expression. EGR3 plays the role of oncogene promoter in Hep G2 and SMMC-7721 cell lines. MiR-718 plays a role in tumor suppressor gene by targeting EGR3 m RNA 3 UTR to down-regulate the expression of EGR3.
【作者單位】： Clinical
【基金】：Project supported by the Science and Technology Project of Higher Education of Shandong Province(No.J12LK07),China
【分類號】：R735.7
【正文快照】： 1 IntroductionHepatocellular carcinoma(HCC)is one of themost prevalent and aggressive human malignancies worldwide,and it has a very poor prognosis(Walleret al.,2015).Men are more susceptible to HCC thanwomen and it is a leading cause of cancer-relatedd

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王勇姿,俞超芹,凌昌全,衛(wèi)立辛;肝癌細胞系的研究概況[J];上海醫(yī)學;2000年02期

2 王蓬,陳孝平,PBSLai,CK Leow,Joseph W Y Lau;二十碳五烯酸對三種肝癌細胞系作用的實驗研究[J];中華普通外科雜志;2001年01期

3 彭林,王衛(wèi)東,孫建,簡志祥,杜嘉林,區(qū)金銳;穩(wěn)定表達促血管生成素基因肝癌細胞系的建立及產(chǎn)物的檢測[J];廣東醫(yī)學;2003年07期

4 趙蕩;陳宏武;許磊;劉飛勇;;不同時期肝癌免疫殺傷腫瘤細胞效應(yīng)探討[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);2006年S1期

5 郭曉林;姜雅秋;金清龍;;多藥耐藥相關(guān)蛋白-3表達與肝癌耐藥的相關(guān)性[J];中國老年學雜志;2010年11期

6 ;離體培養(yǎng)的人體肝癌細胞系的建立[J];醫(yī)學研究通訊;1978年10期

7 陸榮華;陳尊器;陳瑞銘;;人體肝癌細胞系體外惡性浸潤行為的研究[J];細胞生物學雜志;1982年02期

8 張志培,施新猷,李六金,劉雪松,江遜,彭磊,趙佐慶;小鼠免疫力對接種人類肝癌細胞系9724生長的影響[J];第四軍醫(yī)大學學報;2001年07期

9 張志仁,徐順清,周宜開,任恕,劉志偉,呂斌,徐永俊;一株受二VA英類化學物質(zhì)誘導(dǎo)表達的螢光素酶肝癌細胞系[J];中國生物化學與分子生物學報;2001年06期

10 朱爭艷;杜智;方淑昌;孫銘;;礦物中藥硇砂提取液抑制肝癌的實驗研究[J];臨床肝膽病雜志;2006年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 符兆英;劉凱歌;徐光華;;肝癌細胞系中乙型肝炎病毒x蛋白與缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達的研究[A];中國細胞生物學學會2005年學術(shù)大會、青年學術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

2 張朵;朱海英;謝東莆;胡以平;;肝癌細胞中存在SP細胞[A];中國細胞生物學學會2005年學術(shù)大會、青年學術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

3 汪謙;曹良啟;陳錫林;甄茂川;黃曉卉;傅新暉;;過氧化物酶增殖物激活受體活化抑制肝癌細胞遷移的研究[A];廣東省肝臟病學會2007年年會論文集[C];2007年

4 鄧欣;蔣小玲;李輝;吳其愷;聶廣;劉欽;;表達耐拉米夫定乙型肝炎病毒肝癌細胞系的建立[A];第一次全國中西醫(yī)結(jié)合傳染病學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

5 吳塵軒;杜智;朱爭艷;高英堂;王毅軍;只丹琮;孫泉;;肝癌免疫治療微環(huán)境和樹突狀細胞體外誘導(dǎo)的實驗研究[A];天津市生物醫(yī)學工程學會2007年學術(shù)年會論文摘要集[C];2007年

6 田德安;;RhoA短發(fā)夾狀雙鏈RNA對肝癌細胞生物學行為的調(diào)控研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 高倩;;肝癌HepG2細胞系分泌的免疫抑制物質(zhì)的研究[A];第六屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2008年

8 代智;劉銀坤;馮巨濤;宋海燕;申華麗;張麗君;崔杰峰;;高低轉(zhuǎn)移潛能肝癌細胞系差異糖蛋白質(zhì)組學研究[A];中國蛋白質(zhì)組學第二屆學術(shù)大會論文摘要論文集[C];2004年

9 張盛周;俞明月;謝晶;戴谷;李朝軍;;Met與Fas基因在肝癌組織和肝癌細胞系中的表達[A];中國細胞生物學學會第八屆會員代表大會暨學術(shù)大會論文摘要集[C];2003年

10 李來元;王濤;杜智;朱爭艷;;樹突狀細胞介導(dǎo)的抗肝癌免疫治療研究現(xiàn)狀(綜述)[A];天津市生物醫(yī)學工程學會第29屆學術(shù)年會暨首屆生物醫(yī)學工程前沿科學研討會論文集[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 記者 胡德榮;肝癌患者自噬性缺陷表型與預(yù)后不良緊密相關(guān)[N];健康報;2008年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 王驥;凝集素富集糖肽聯(lián)合酶促~(18)O_3標記的定量N-糖蛋白組學方法在肝癌術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)研究中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學;2012年

2 劉坤;Bcl-2/Twist1蛋白互作在缺氧促進肝癌血管生成擬態(tài)形成中的作用[D];天津醫(yī)科大學;2015年

3 陳勇;蓽茇酰胺抑制肝癌細胞遷移/侵襲的作用及其機制[D];華中科技大學;2015年

4 林鎮(zhèn)海;NR1D1通過DUOX2/MCP-1途徑募集巨噬細胞促進肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的機制及臨床研究[D];復(fù)旦大學;2014年

5 丁坤;骨橋蛋白促進肝癌細胞順鉑耐藥的實驗研究[D];山東大學;2016年

6 馬春亮;KLF17在肝癌中的作用及對肝癌預(yù)后的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

7 幸思忠;URG4/URGCP激活NF-κB通路調(diào)控肝細胞癌血管增生的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2016年

8 范婭涵;Hedgehog信號通路調(diào)控Twist1表達促進肝癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移分子機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2016年

9 張素潔;長非編碼RNA LncTSG1抑制肝癌轉(zhuǎn)移的功能及機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2016年

10 梁東;Fbxw7促進Slug降解抑制TGF-β誘導(dǎo)的肝癌轉(zhuǎn)移[D];福建醫(yī)科大學;2015年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 田蕓蕓;人臍帶MSCs上清對肝癌細胞系HepG2影響的比較轉(zhuǎn)錄組學研究[D];內(nèi)蒙古大學;2015年

2 孫景暢;microRNA-9是肝癌患者的重要預(yù)后指標[D];安徽醫(yī)科大學;2016年

3 朱振東;靶向調(diào)控Pin1的microRNAs篩選[D];福建醫(yī)科大學;2015年

4 徐偉;Bmi1干性肝癌細胞系的鑒定及其對肝癌膽管細胞樣表型轉(zhuǎn)變的影響[D];蘇州大學;2016年

5 石鳳靈;肝癌細胞MGMT表達水平與奧沙利鉑敏感性的相關(guān)性[D];蘇州大學;2016年

6 張允成;AZD5363對肝癌細胞的作用及其機制研究[D];山東大學;2016年

7 蘇納;轉(zhuǎn)移潛能遞進的肝癌細胞系模型多組學數(shù)據(jù)整合分析研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2016年

8 趙丹琦;第一部分 ATF6對肝癌細胞系活性影響的研究 第二部分 HBV對thapsigargin引發(fā)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)影響的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

9 馮瑾;肝癌HepG2細胞系分泌的免疫抑制物質(zhì)的研究[D];首都師范大學;2007年

10 余鋒;循環(huán)肝癌細胞檢測方法的改進及其預(yù)測肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

，

本文編號：1474905