法醫(yī)DNA常量檢材Chelex-100提取法研究
發(fā)布時(shí)間:2024-07-09 00:59
隨著被稱為“法醫(yī)DNA第二代遺傳標(biāo)記”的STR多態(tài)性被發(fā)現(xiàn),STR-PCR技術(shù)已逐漸成為法醫(yī)DNA檢驗(yàn)的主流方法,國(guó)內(nèi)外科研力量主要集中在痕量和微量DNA檢材的現(xiàn)場(chǎng)提取、純化等方面,對(duì)常量檢材檢驗(yàn)的重視不夠,常量檢材檢驗(yàn)的效率、檢驗(yàn)成功率等長(zhǎng)期處于因人而異的狀況。 DNA提取中常用的幾大方法即Chelex-100法、有機(jī)法(飽和酚法)、二氧化硅法(硅珠法、磁珠法)、氫氧化鈉法、鹽析法雖然各有優(yōu)勢(shì),但由于法醫(yī)DNA檢驗(yàn)對(duì)提取方法的最基本要求是原始檢材需求量小、提取的DNA保存時(shí)間長(zhǎng),同時(shí),一般盡量選擇提取時(shí)間短、提取的DNA質(zhì)量高、試劑成本低、操作簡(jiǎn)單的方法。因此,Chelex-100法已經(jīng)取代了有機(jī)法成為法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室常量檢材最主流的提取方法。 在法醫(yī)DNA檢驗(yàn)中,由于擴(kuò)增和電泳都是采用商用擴(kuò)增試劑盒以及自動(dòng)化電泳儀器,人為因素在這兩個(gè)環(huán)節(jié)中影響不大,DNA提取就成為了DNA檢驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),提取液中DNA的數(shù)量和質(zhì)量直接影響最終檢驗(yàn)結(jié)果。本研究的目的就是探討法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的常量檢材各種常見載體的提取量以及Chelex-100提取過(guò)程中各參數(shù)的參考范圍。 本文通過(guò)一系列對(duì)照實(shí)驗(yàn),結(jié)合DNA...
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號(hào):4004147
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖1:Identifiler試劑盒標(biāo)準(zhǔn)物9947A的STR分型圖譜
圖1:Identifiler試劑盒標(biāo)準(zhǔn)物9947A的STR分型圖譜。對(duì)于電泳圖譜質(zhì)量的評(píng)價(jià),通常是綜合峰值范圍與擴(kuò)增均衡度、雜帶情況來(lái)判定的。為了量化結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)采用以下幾項(xiàng)指標(biāo)來(lái)衡量一個(gè)樣品STR分型圖譜的質(zhì)量:1、峰值范圍:由于峰值過(guò)高過(guò)低都會(huì)影響分型的判讀,法....
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