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法醫(yī)DNA常量檢材Chelex-100提取法研究

發(fā)布時間:2024-07-09 00:59
  隨著被稱為“法醫(yī)DNA第二代遺傳標(biāo)記”的STR多態(tài)性被發(fā)現(xiàn),STR-PCR技術(shù)已逐漸成為法醫(yī)DNA檢驗(yàn)的主流方法,國內(nèi)外科研力量主要集中在痕量和微量DNA檢材的現(xiàn)場提取、純化等方面,對常量檢材檢驗(yàn)的重視不夠,常量檢材檢驗(yàn)的效率、檢驗(yàn)成功率等長期處于因人而異的狀況。 DNA提取中常用的幾大方法即Chelex-100法、有機(jī)法(飽和酚法)、二氧化硅法(硅珠法、磁珠法)、氫氧化鈉法、鹽析法雖然各有優(yōu)勢,但由于法醫(yī)DNA檢驗(yàn)對提取方法的最基本要求是原始檢材需求量小、提取的DNA保存時間長,同時,一般盡量選擇提取時間短、提取的DNA質(zhì)量高、試劑成本低、操作簡單的方法。因此,Chelex-100法已經(jīng)取代了有機(jī)法成為法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室常量檢材最主流的提取方法。 在法醫(yī)DNA檢驗(yàn)中,由于擴(kuò)增和電泳都是采用商用擴(kuò)增試劑盒以及自動化電泳儀器,人為因素在這兩個環(huán)節(jié)中影響不大,DNA提取就成為了DNA檢驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),提取液中DNA的數(shù)量和質(zhì)量直接影響最終檢驗(yàn)結(jié)果。本研究的目的就是探討法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的常量檢材各種常見載體的提取量以及Chelex-100提取過程中各參數(shù)的參考范圍。 本文通過一系列對照實(shí)驗(yàn),結(jié)合DNA...

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1:Identifiler試劑盒標(biāo)準(zhǔn)物9947A的STR分型圖譜

圖1:Identifiler試劑盒標(biāo)準(zhǔn)物9947A的STR分型圖譜

圖1:Identifiler試劑盒標(biāo)準(zhǔn)物9947A的STR分型圖譜。對于電泳圖譜質(zhì)量的評價,通常是綜合峰值范圍與擴(kuò)增均衡度、雜帶情況來判定的。為了量化結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)采用以下幾項(xiàng)指標(biāo)來衡量一個樣品STR分型圖譜的質(zhì)量:1、峰值范圍:由于峰值過高過低都會影響分型的判讀,法....



本文編號:4004147

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