目的在核事故和輻射事故下采取準(zhǔn)確、快速的生物分析技術(shù)估算暴露人群的受照劑量,在臨床治療中起著十分重要的作用。輻射生物劑量估算的“金標(biāo)準(zhǔn)”-分析“雙著絲粒+環(huán)”,存在實驗周期長、對分析人員技術(shù)要求高等特點,無法滿足上述高通量、快速的要求。近年來,能實現(xiàn)快速、高通量篩選的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)己在輻射研究中廣泛應(yīng)用,為發(fā)現(xiàn)輻射敏感生物標(biāo)志物提供了有效方法。其中,應(yīng)用最多的定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法是體外標(biāo)記定量技術(shù)-串聯(lián)質(zhì)譜標(biāo)簽(Tandem Mass Tags,TMT)等,這些方法可以篩選分析不同劑量照射后大鼠血漿中的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。目前國內(nèi)外應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對輻射后生物差異表達(dá)蛋白質(zhì)的研究中,所選擇的輻射劑量點少、觀察時間短、缺乏驗證實驗。本研究的目的是在現(xiàn)有研究基礎(chǔ)上,應(yīng)用TMT定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法研究0 Gy、1 Gy、3 Gy和5 Gy照射劑量后1 d、3d、5 d和7 d大鼠血漿蛋白質(zhì)組學(xué)的變化,進(jìn)行生物信息學(xué)分析,同時驗證血漿·中的具有良好輻射劑量-效應(yīng)關(guān)系的差異表達(dá)蛋白質(zhì),為進(jìn)一■步開發(fā)應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法1.實驗動物、分組及照射:SPF級SD雄性大鼠,體重(2000)g。將觀察生長健康...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２?ＴＢＩ?Ｙ射線照射后大鼠血漿中所有上調(diào)和下調(diào)差異表達(dá)蛋白質(zhì)的ＧＯ分析

??胞外空間蛋白，１３．８％位于血液微粒中（圖２．ａ）。分子功能分析顯示差異表達(dá)蛋??白質(zhì)的首要功能是抗原結(jié)合活性（１８．５％），其次是免疫球蛋白受體結(jié)合活性??（１７．３％）、絲氨酸型內(nèi)肽酶抑制劑活性（１４．３％）和ＡＴＰ結(jié)合活性（１０．１％）（圖??２．ｂ）。在生物學(xué)過程分類....

圖３篩選中２４９上調(diào)表達(dá)蛋白質(zhì)中１８９種蛋白質(zhì)之間相互作用網(wǎng)絡(luò)??３．蛋白質(zhì)的ＥＬＩＳＡ定量分析??

大劑量時蛋白質(zhì)表達(dá)較低，難以檢測到，所以本研究重點關(guān)注表達(dá)增高的差異蛋??白質(zhì)，所以將表達(dá)増高的２４９種蛋白質(zhì)錄入系統(tǒng)，查找到１８９種蛋白質(zhì)，并對其??相互關(guān)系進(jìn)行分析。根據(jù)ＳＴＲＩＮＧ分析結(jié)果（圖３?），上述中有量效趨勢的Ａ２ｍ、??Ｃｌｕ和Ｃｐ蛋白質(zhì)被確定位于蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)....

圖４?６（）Ｃｏ?Ｙ射線全身照射ＳＤ大鼠后不同時間點血漿中Ａ２ｍ蛋白表達(dá)變化??注：與ＯＧｙ組比較，“＊”，尸＜０．０５；?戶＜０．０１；后面結(jié)果中的意義同前

３?Ｇｙ組在照后３?ｄ濃度最高３０．３５±５．２６呢／ｍｌ。實驗組中，同一劑量點Ａ２ｍ蛋白??的表達(dá)量均在照射后Ｉｄ或者３ｄ達(dá)到最高值后，隨著照射后時間的延長，表達(dá)??量降低，逐漸回歸到對照水平（圖４）。??照射后１?ｄ，各劑量組血漿中Ａ２ｍ蛋白表達(dá)量高于對照組，但只有５?Ｇｙ組....

圖5‘ocoy射線全身照射sD大鼠后不同時間點血漿中cHGA蛋白表達(dá)變化

?７?－?－?－???注：ａｙ為蛋白質(zhì)在血漿中的表達(dá)水平（ｐｇ／ｍｌ），?ｘ為吸收劑量（Ｇｙ），尸＜０．０５。??３．１．２?ＣＨＧＡ蛋白表達(dá)變化??照射后３?ｄ和５?ｄ，大鼠血漿中ＣＨＧＡ蛋白的表達(dá)量隨著照射劑量的增加而??升高。與對照組比較，１?Ｇｙ和３?Ｇｙ組的ＣＨＧＡ蛋白....

本文編號：3986209