發(fā)布時間：2024-06-07 22:42

　　目的探討沉默CrkL對缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和生存力的影響及其機制。方法分別用空白試劑、陰性慢病毒和CrkL RNAi慢病毒(沉默CrkL mRNA)感染H9C2心肌細(xì)胞,并進(jìn)行缺氧/復(fù)氧(H/R)干預(yù)。實驗分為空白組、陰性病毒組、CrkL沉默組、空白+H/R組、陰性病毒+H/R組、CrkL沉默+H/R組。用RT-PCR法檢測心肌細(xì)胞CrkL mRNA的表達(dá),蛋白印跡分析法檢測心肌細(xì)胞CrkL蛋白、p-ERK1/2蛋白表達(dá),MTT法檢測細(xì)胞的增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果 CrkL沉默組較空白組和陰性病毒組,CrkL沉默+H/R組較空白+H/R組和陰性病毒+H/R組CrkL mRNA、CrkL蛋白、p-ERK1/2蛋白、細(xì)胞增殖率均降低(P<0.05或P<0.01),細(xì)胞凋亡率均增加(P<0.01)。結(jié)論沉默CrkL能加重缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和生存力降低。該過程可能是由p-ERK1/2蛋白表達(dá)降低介導(dǎo)的。

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圖３Ｈ９Ｃ２心肌細(xì)胞的增殖率Ａ：空白組；Ｂ：陰性病毒組；Ｃ：ＣｒｋＬ沉默組；Ｄ：空白＋Ｈ／Ｒ組；：陰性病毒組；沉默組；：缺

第１１期．張志升，等．沉默ＣｒｋＬ對缺氧／復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和生存力的影響及其機制·１２７５·圖３Ｈ９Ｃ２心肌細(xì)胞的增殖率Ａ：空白組；Ｂ：陰性病毒組；Ｃ：ＣｒｋＬ沉默組；Ｄ：空白＋Ｈ／Ｒ組；Ｅ：陰性病毒＋Ｈ／Ｒ組；Ｆ：ＣｒｋＬ沉默＋Ｈ／Ｒ組；Ｈ／Ｒ：缺氧／復(fù)氧．＊＊Ｐ＜０．０....

圖2.1感染H9C2心肌細(xì)胞Fig2.1InfectionofH9C2cardiomyocytes

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文(X±S)來表示，多組間的比較則采用單因素方差分析（One-wayANOVA）的方法，兩組間比較采用Tukey檢驗，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。2.實驗結(jié)果2.1慢病毒轉(zhuǎn)染H9C2心肌細(xì)胞效率測定分別將空白試劑、陰性慢病毒、....

圖2.2H9C2心肌細(xì)胞CrkLmRNA表達(dá)Fig2.2ExpressionofCrkLmRNAinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilencegroup;D:Blank+H/Rgroup;

圖2.2H9C2心肌細(xì)胞CrkLmRNA表達(dá)Fig2.2ExpressionofCrkLmRNAinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilen....

圖2.3H9C2心肌細(xì)胞CrkL、p-ERK1/2蛋白表達(dá)Fig2.3ExpressionofCrkLandp-ERK1/2proteinsinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivirusgroup;C:CrkLsilencegroup;D:Blank+

圖2.3H9C2心肌細(xì)胞CrkL、p-ERK1/2蛋白表達(dá)Fig2.3ExpressionofCrkLandp-ERK1/2proteinsinH9C2cardiomyocytesA:Blankgroup;B:Negativelentivi....

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