目的:探討PLCε在腎癌中發(fā)揮的作用,研究IL-2在腎癌細(xì)胞中發(fā)揮的作用,探究PLCε是否在IL-2治療腎癌的過程中發(fā)揮一定的作用。方法:1.收集臨床腎癌組織標(biāo)本,進(jìn)行免疫組化染色,檢測PLCε,Fas,FasL的蛋白表達(dá),并將基因表達(dá)與臨床參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析探究二者之間的相關(guān)性。使用TCGA數(shù)據(jù)庫對各類癌癥中的Fas,FasL的表達(dá)情況進(jìn)行分析。2:Q-PCR、WB檢測腎癌細(xì)胞株786-o、CAKI與正常腎上皮細(xì)胞HK-2中PLCε的表達(dá)差異。使用sh-PLCε敲減腎癌細(xì)胞株786-o,CAKI中的PLCε,q-PCR、WB檢測敲減PLCε后,Fas、FasL的表達(dá)情況,以及Fas/FasL下游分子的表達(dá)情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測敲減PLCε后細(xì)胞的凋亡情況。3:MTT法檢測IL-2處理細(xì)胞的最適濃度;在使用IL-2處理細(xì)胞后,q-PCR、WB檢測腎癌細(xì)胞株786-o、CAKI中Fas、FasL及其下游分子的表達(dá)情況,MTT法檢測敲減PLCε后,IL-2處理細(xì)胞的IC₅₀值變化情況。Ficoll法提取人外周血淋巴細(xì)胞,將淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)后,流式細(xì)胞術(shù)檢測凋...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1：TCGA數(shù)據(jù)庫中Fas,FasL表達(dá)情況

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文131.2.3統(tǒng)計學(xué)分析實驗結(jié)果采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。所有計量資料均使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)的方式表達(dá)，多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較均使用t檢驗來完成對比分析，所有分析結(jié)果均認(rèn)為P<0.05時，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。所有實驗均....

圖1.2：PLCε,Fas,FasL在腎癌組織中的表達(dá)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文142.2腎癌組織中PLCε,FAS,FASL相關(guān)性分析我們對40例腎癌標(biāo)本于40例癌旁標(biāo)本進(jìn)行了免疫組化染色，結(jié)果顯示在腎癌組織中PLCε,Fas,FasL呈高表達(dá)狀態(tài)，在癌旁組織中呈低表達(dá)狀態(tài)(圖1.2，A-D,P<0,001)。Spearman....

圖2.1腎癌細(xì)胞株786-o，CAKI與HK-2中PLCε的表達(dá)

3):送流式細(xì)胞儀檢測。2.結(jié)果2.1腎癌細(xì)胞株786-o，CAKI中PLCε呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)我們檢測了腎癌細(xì)胞株786-0、CAKI以及人正常腎上皮細(xì)胞HK2中的PLCε的表達(dá)。結(jié)果顯示，與HK2相比，腎癌細(xì)胞株中的PLCε呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)（P<0.05,....

圖2.2腎癌細(xì)胞株786-o，CAKI中PLCε的表達(dá)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文25圖2.2腎癌細(xì)胞株786-o，CAKI中PLCε的表達(dá)。A:Westernblot檢測786-o，CAKI細(xì)胞中PLCε蛋白表達(dá)水平。B,E:q-PCR檢測786-o,CAKI細(xì)胞中PLCεmRMA表達(dá)水平。C,D:HK-2與786-o,CAKI....

本文編號：3977968