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順鉑對腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株體外影響的初步研究

發(fā)布時間:2020-11-08 16:27
   目的初步探討不同濃度的順鉑(Cisplatin,DDP),對腎母細(xì)胞瘤瘤株的抑制作用,為相關(guān)的動物實驗提供前期工作和一定的理論依據(jù)。方法1.CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活力:在96孔板上培養(yǎng)兩癌株(SK-NEP-1/G401),按加入順鉑的量將癌株分為6組,于24,48,72h后加入CCK-8,測量其在450nm處的光密度(OD值),并進行統(tǒng)計學(xué)分析2.劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力:在24孔板上培養(yǎng)兩癌株,按加入順鉑的量將癌株分為6組,用槍頭比著直尺垂直劃線,于0,24,48h觀察細(xì)胞的遷移情況,拍照細(xì)胞遷移情況,計算劃痕愈合率%=(0 h劃痕區(qū)域像素-24、48 h劃痕區(qū)域像素)/0 h劃痕區(qū)域像素x100%,并進行統(tǒng)計學(xué)分析3.蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)測BAX蛋白含量:按加入順鉑的量將癌株分為6組,提取總蛋白,再用Western blot技術(shù)檢測各組內(nèi)的Bax蛋白和β-Actin蛋白的含量,計算Bax蛋白相對量,并進行統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果1.在接種細(xì)胞后的第24,48,72h,未加入順鉑組(0%組)的SKNEP-1/G401細(xì)胞在A450處OD值明顯高于加入順鉑組(0.1%,0.2%,0.4%,0.8%及1.6%組)(p0.001),順鉑對SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。2.在接種細(xì)胞后的第0,24,48h,順鉑對SK-NEP-1/G401細(xì)胞在24h及48h的劃痕愈合率具有明顯差異(p0.001),順鉑對SK-NEP-1遷移能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。3.順鉑影響后Bax表達增加,0.2%組和0,4%組與對照組相比差異明顯(p0.001),順鉑引起SK-NEP-1中Bax蛋白明顯增加的濃度為0%~0.2%;0.4%組與對照組相比差異明顯(p0.001),0.2%組與0.4%組之間差異明顯(p0.001),順鉑引起G401中Bax蛋白明顯增加的濃度為0.2%~0.4%.結(jié)論1.順鉑能夠抑制腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株增殖能力,順鉑對SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。2.順鉑能夠抑制腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株遷移,順鉑對SKNEP-1遷移能力的最大抑制濃度為0.2%~0.4%。3.順鉑能夠促進Bax蛋白的表達,可能是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和癌行為能力降低的原因;順鉑引起SK-NEP-1中Bax蛋白明顯增加的濃度為0%~0.2%,順鉑引起G401中Bax蛋白明顯增加的濃度為0.2%~0.4%。4.順鉑對腎母細(xì)胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株的抑制作用存在平臺期
【學(xué)位單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R737.11
【部分圖文】:

曲線,細(xì)胞株,順鉑,曲線


經(jīng)不同濃度順鉑影響后各組腎母細(xì)胞瘤的增殖能力。根據(jù)兩株細(xì)胞株的 CCK-8 實驗結(jié)果,繪制細(xì)胞增殖曲線(A:SK-NEP-1;B:G401),在接種細(xì)胞后的第 1,2,3 天,未加入順鉑組(0%組)的 SK-NEP-1/G401 細(xì)胞在 A450 處 OD 值明顯高于加入順鉑組(0.1%,0.2%,0.4%,0.8%及 1.6%組),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001),提示順鉑能抑制腎母細(xì)胞瘤的增殖能力。A 中第 2 和 3 天,0.4%,0.8%及 1.6%組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.115 和 p=0.499),且 0.4%組與 0.2%組差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.004和 p=0.003),提示順鉑對 SK-NEP-1 的增殖能力的最大抑制濃度為 0.2%~0.4%。B中各天中,0.4%,0.8%及1.6%組差異無統(tǒng)計意義(p=0.607,p=0.635,和 p=0.778),且 0.4%組與 0.2%組差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001,p=0.006和 p=0.001),提示順鉑對 G401 的增殖能力的最大抑制濃度為 0.2%~0.4%。

劃痕實驗,細(xì)胞株,順鉑,腎母細(xì)胞瘤


順鉑對腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞株體外影響的初步研究 2016 級研究生碩士論文驗驗證順鉑影響后 SK-NEP-1/G401 細(xì)胞遷移能力的改變。劃痕實驗結(jié)果(A,C:SK-NEP-1;B,D:G401),順鉑對 SK-NEP-1/G401 細(xì)胞在 24h 及 48h 的劃痕愈合率具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001),提示順鉑能夠減弱腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞遷移能力。A,C 中 24h 和 48h,0.4%,0.8%及 1.6%組差異無統(tǒng)計意義(p=0.945 和 p=0.901),且 0.4%組與 0.2%組差異存在統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001和 p<0.001),提示順鉑對 SK-NEP-1 遷移能力的最大抑制濃度為 0.2%~0.4%。

蛋白,順鉑,Bax蛋白表達,瘤細(xì)胞株


瘤細(xì)胞株體外影響的初步研究 2016 級研提示順鉑引起 SK-NEP-1 中 Bax 蛋白明顯增加的濃401 中 0.2 % 組 和 0.4 % 組 分 別 上 升 了 (1.053)%,0.2%組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p=0比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001),及 0.2%組與 0.4 組(p<0.001),提示順鉑引起 G401 中 Bax 蛋白明顯增%.
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本文編號:2875032

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