發(fā)布時間：2020-11-01 02:32

　　 目的:蛋白尿的發(fā)生及進展與足細胞損傷密切關聯(lián),血清糖皮質(zhì)激素誘導激酶3(Serum-and glucocorticoid-inducible kinase 3,SGK3)可調(diào)節(jié)足細胞的細胞活力、濾過隙膜蛋白Podocin、CD2相關蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)和足糖萼蛋白Podocalyxin(PC)的表達,但SGK3能否通過調(diào)節(jié)Nephrin來參與足細胞損傷還不甚明確。本研究主要探討了SGK3對于足細胞上Nephrin的分子調(diào)節(jié)機制。方法:分別使用(1)0、25和50ug/ml嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)處理體外培養(yǎng)的永生化小鼠足細胞;(2)SGK3 sh RNA、SGK3滅活型質(zhì)粒(SGK3-K191M)以及SGK3激活型質(zhì)粒(SGK3-S486D)瞬時轉(zhuǎn)染足細胞后再給與PAN處理24h;(3)野生型Nedd4-2質(zhì)粒以及Nedd4-2 sh RNA轉(zhuǎn)染小鼠足細胞;(4)野生型GSK3β質(zhì)粒轉(zhuǎn)染或Li Cl處理小鼠足細胞,提取總蛋白行免疫印跡技術(shù)檢測Nephrin的蛋白表達水平,行泛素化實驗檢測Nephrin的泛素化水平。結(jié)果:(1)在PAN所致足細胞損傷中Nephrin的蛋白表達下調(diào),PAN處理導致Nephrin泛素-蛋白酶體降解增加。(2)SGK3 sh RNA和SGK3-K191M轉(zhuǎn)染的足細胞中,Nephrin的蛋白表達明顯下調(diào),SGK3-K191M轉(zhuǎn)染致Nephrin泛素-蛋白酶體降解增加,而SGK3-S486D轉(zhuǎn)染可以部分逆轉(zhuǎn)PAN誘導的Nephrin的蛋白表達下調(diào)。(3)過表達Nedd4-2使足細胞中Nephrin蛋白表達減少,而轉(zhuǎn)染Nedd4-2 sh RNA后Nephrin蛋白表達增加。(4)過表達GSK3β導致足細胞中Nephrin蛋白表達減少,而Li Cl處理抑制GSK3β活性后Nephrin蛋白表達增加。結(jié)論:SGK3活性降低導致Nephrin通過泛素-蛋白酶體途徑降解增加,而持續(xù)激活SGK3可以部分逆轉(zhuǎn)PAN誘導的Nephrin表達下調(diào)。SGK3活性降低后可能通過激活神經(jīng)前體細胞表達發(fā)育下調(diào)蛋白4亞型2(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4 subtype 2,Nedd4-2)及糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK3β)活性導致Nephrin的蛋白表達下調(diào)。
【學位單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R692
【文章目錄】：
英文縮略詞對照表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 沈曉剛,沈漢超;糖尿病腎病足細胞損傷的研究進展[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2005年05期

2 杜鵬;劉蕊;李月紅;;足細胞損傷與糖尿病腎病[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2008年04期

3 王惠;何方方;張春;;足細胞損傷機制研究進展[J];中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2008年11期

4 陳洪宇;吳文斌;王永鈞;;腎臟病足細胞損傷及其防治研究進展[J];醫(yī)學研究雜志;2007年11期

5 陳霞;曹愛麗;彭文;;中藥干預糖尿病腎病足細胞損傷的研究現(xiàn)狀[J];中國臨床藥理學雜志;2016年19期

6 黃國東;許健;喬莉;;腎足細胞損傷中西醫(yī)治療的國內(nèi)研究進展[J];時珍國醫(yī)國藥;2009年12期

7 李知;侯慶;陳朝紅;劉志紅;;組蛋白去乙酰化酶與足細胞損傷[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2019年02期

8 劉淑芳;丁潔;范青鋒;張涵;;嘌呤霉素致足細胞損傷細胞模型的建立[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2008年06期

9 潘明嬌;王小丹;;自噬在高血壓足細胞損傷中的作用[J];中國循環(huán)雜志;2015年01期

10 肖厚勤,張建鄂,丁國華;足細胞損傷與腎小球硬化[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2004年04期

相關博士學位論文 前10條

1 張倩媚;CaN/YAP環(huán)路在足細胞損傷中的作用及機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2019年

2 王偉;中藥多酚類成分對代謝綜合征腎臟足細胞損傷和肝臟脂質(zhì)堆積的改善作用及其分子機制研究[D];南京大學;2013年

3 張翠薇;固本化瘀通絡合劑含藥血清對高糖環(huán)境下足細胞損傷、凋亡及自噬的影響及分子機制研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2018年

4 楊敏;間隙連接蛋白43通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和氧化應激調(diào)控足細胞損傷的作用和機制研究[D];蘇州大學;2018年

5 張璐;C末端Src激酶在血管緊張素Ⅱ誘導足細胞損傷中的作用及機制[D];武漢大學;2016年

6 徐維瑋;糖原合成酶激酶3β調(diào)節(jié)足細胞骨架在足細胞損傷機制及治療中的作用[D];南京大學;2014年

7 湯曦;局灶節(jié)段性腎小球硬化足細胞損傷標志物及凝血功能異常的研究[D];南京大學;2011年

8 鐘紹;火把花根通過microRNA-29a/PTEN信號通路調(diào)控糖尿病腎病足細胞損傷的分子機制研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2017年

9 黃軼嶸;腎臟缺血再灌注中足細胞損傷機制的研究[D];山西醫(yī)科大學;2008年

10 朱春華;線粒體功能障礙在足細胞損傷中的作用及干預研究[D];南京醫(yī)科大學;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 張巖;MicroRNA-26a與糖尿病腎病足細胞損傷的關系及機制探討[D];青島大學;2019年

2 李子芳;SGK3介導Nephrin的泛素—蛋白酶體降解參與足細胞損傷[D];華中科技大學;2019年

3 鄭心彤;~1MiR-155通過調(diào)控MAPK信號通路參與TGF-β1誘導足細胞損傷的分子機制研究[D];右江民族醫(yī)學院;2019年

4 余琦;維生素D對狼瘡腎炎患者血清IgG誘導足細胞損傷的保護作用的研究[D];鄭州大學;2019年

5 朱雪玲;前列腺素E2受體1亞型激活P38MAPK通路介導阿霉素誘導的足細胞損傷[D];南通大學;2018年

6 王子陽;lncRNA MIAT在高糖誘導的足細胞損傷中的作用研究[D];山東大學;2019年

7 宋成成;COQ6突變導致FSGS患者足細胞損傷[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2018年

8 宋瑞花;miR-21/Dnm1l信號通路在PAN誘導的足細胞損傷和線粒體功能障礙中的作用[D];南京醫(yī)科大學;2016年

9 王明威;DGKE在腎小球疾病足細胞損傷中的作用及機制[D];山東大學;2018年

10 牛書芳;原發(fā)性膜性腎病足細胞損傷與Klotho蛋白相關性研究[D];山西醫(yī)科大學;2018年

本文編號：2864896