發(fā)布時(shí)間：2024-06-30 08:19

　　胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)屬于巴氏桿菌科,放線桿菌屬,能引起豬傳染性胸膜肺炎,對世界養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重危害。應(yīng)激因素是引起APP感染的重要因素之一。近年來有報(bào)道表明微生物能夠感應(yīng)并將宿主在應(yīng)激狀態(tài)下釋放的激素作為一種環(huán)境信號,調(diào)節(jié)自身的致病性和生長等行為,進(jìn)而影響宿主感染疾病的過程。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)兒茶酚胺類激素能廣泛調(diào)控APP基因的表達(dá),包括重要的毒力、代謝和調(diào)控基因,說明APP能主動響應(yīng)宿主的應(yīng)激激素。在受到激素影響的差異表達(dá)基因中,存在一批APP鐵代謝相關(guān)基因。本課題以APP為研究對象,研究了在缺鐵環(huán)境下兒茶酚胺類激素對APP生長的調(diào)節(jié)作用。進(jìn)一步通過APP幾種基因突變體的生長情況檢測以及APP全基因組表達(dá)譜芯片,探索了兒茶酚胺類激素影響APP生長的作用機(jī)制。1.人工缺鐵條件下兒茶酚胺類激素對APP生長的影響在人工培養(yǎng)基(CDM)中添加鐵離子螯合劑2,2-聯(lián)吡啶時(shí),APP生長受到明顯抑制,當(dāng)添加血清時(shí),APP生長也受到抑制,并且添加Mg2+, Ca2+, Fe3+時(shí),只有Fe3+能解除血清的生長抑制。同時(shí)發(fā)現(xiàn)未結(jié)...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviation)
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 豬胸膜肺炎放線桿菌概述
        1.1.1 胸膜肺炎放線桿菌及其危害
        1.1.2 胸膜肺炎放線桿菌毒力因子研究進(jìn)展
        1.1.3 胸膜肺炎放線桿菌的鐵代謝研究進(jìn)展
    1.2 應(yīng)激激素對細(xì)菌的生長調(diào)節(jié)
        1.2.1 微生物內(nèi)分泌學(xué)概述
        1.2.2 應(yīng)激激素調(diào)節(jié)細(xì)菌生長的研究進(jìn)展
2 目的和意義
3 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 培養(yǎng)基配制
        3.1.3 激素配制
        3.1.4 其它試劑配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 胸膜肺炎放線桿菌在人工培養(yǎng)基(CDM)中的培養(yǎng)方法
        3.2.2 胸膜肺炎放線桿菌生長的檢測
        3.2.3 胸膜肺炎放線桿菌生物被膜形成的檢測
        3.2.4 胸膜肺炎放線桿菌表達(dá)譜芯片的設(shè)計(jì)
        3.2.5 細(xì)菌總RNA的提取
        3.2.6 芯片雜交與掃描
        3.2.7 芯片數(shù)據(jù)分析
        3.2.8 熒光定量RT-PCR
4 結(jié)果與分析
    4.1 人工缺鐵培養(yǎng)條件下應(yīng)激激素對胸膜肺炎放線桿菌的影響
        4.1.1 胸膜肺炎放線桿菌缺鐵培養(yǎng)條件的確定
        4.1.2 激素對胸膜肺炎放線桿菌在添加血清的CDM中生長的影響
        4.1.3 激素對胸膜肺炎放線桿菌在添加轉(zhuǎn)鐵蛋白的CDM中生長的影響
        4.1.4 哺乳動物激素受體抑制劑對激素調(diào)節(jié)胸膜肺炎放線桿菌生長的影響
        4.1.5 激素對胸膜肺炎放線桿菌突變體生長的影響
        4.1.6 激素調(diào)節(jié)胸膜肺炎放線桿菌生長的濃度范圍
        4.1.7 激素對胸膜肺炎放線桿菌生物被膜形成的影響
    4.2 應(yīng)激激素對胸膜肺炎放線桿菌基因表達(dá)的調(diào)控
        4.2.1 RNA樣品的收集與制備
        4.2.2 表達(dá)譜芯片的雜交與數(shù)據(jù)處理
        4.2.3 對芯片結(jié)果的熒光定量RT-PCR驗(yàn)證
        4.2.4 受激素調(diào)控的基因概況
        4.2.5 受血清、Epi、NE、DA共同調(diào)控的鐵代謝相關(guān)基因
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
發(fā)表論文



本文編號：3998578