發(fā)布時(shí)間：2019-07-23 12:59

【摘要】：益生菌制劑是一種新型飼料添加劑,由于其綠色環(huán)保、無公害無殘留的特點(diǎn),逐漸成為代替抗生素的最優(yōu)選擇。飼用益生菌能夠有效的避免抗生素藥物殘留和耐藥性的產(chǎn)生所帶來的一系列危害,并且還能調(diào)節(jié)胃腸道平衡,抑制病原菌的繁殖,促進(jìn)畜禽的生長發(fā)育。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)豬糞便與微生態(tài)發(fā)酵飼料中益生細(xì)菌進(jìn)行分離鑒定,并對(duì)其生物學(xué)特性和體內(nèi)抑菌試驗(yàn)進(jìn)行研究,從而為豬源微生態(tài)制劑的研制與開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)采集的15份豬糞便樣品和5份益生菌發(fā)酵飼料進(jìn)行益生細(xì)菌的分離,通過研究細(xì)菌的形態(tài)學(xué)特性,生理生化特性以及16SrRNA分子序列共鑒定出29株益生細(xì)菌,包括1株屎腸球菌(C2)、2株乳酸腸球菌(C1、C3)、3株植物乳桿菌(R20、R30、R37)、4株干酪乳桿菌(R41-R44)、7株枯草芽孢桿菌(K1-K7)和12株蠟樣芽胞桿菌(Y1-Y12)。通過生長曲線、耐膽鹽試驗(yàn)、溫度敏感試驗(yàn)、模擬胃腸道耐受試驗(yàn)、體外抑菌試驗(yàn)、耐藥性試驗(yàn)對(duì)分離菌株進(jìn)行生物學(xué)特性的研究分析,并從分離得到的6個(gè)種類的益生細(xì)菌中各篩選出1株具有優(yōu)良特性的菌株,分別是乳酸腸球菌C1、屎腸球菌C2、植物乳桿菌R20、干酪乳桿菌R41、枯草芽孢桿菌K1、蠟樣芽孢桿菌Y3。分別用上述6株益生細(xì)菌對(duì)小白鼠進(jìn)行灌胃,每天觀察其健康狀況并記錄其體重,通過14天的觀察,小鼠均健康存活無一死亡,說明了 6株益生細(xì)菌對(duì)小白鼠是安全無毒害的。用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)分析小鼠增重情況,結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,灌胃了C2、R20、R41、Y3這4株益生細(xì)菌能夠極顯著提高小鼠的體重(P0.01),K1對(duì)小鼠增重的提高有顯著作用(P0.05)。說明這5株益生細(xì)菌都對(duì)小鼠的增重起到不同程度的促進(jìn)作用,具有良好的促生長性能。為分析這6株益生細(xì)菌在小鼠體內(nèi)的抑菌作用和保護(hù)能力,試驗(yàn)利用沙門氏菌對(duì)連續(xù)灌胃7天益生菌后的小鼠進(jìn)行感染,結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,C1、R20、K1能夠降低沙門氏菌感染小鼠的死亡率,說明這3株益生細(xì)菌具有一定程度的體內(nèi)抑菌作用。綜上所述,R20和K1具有優(yōu)良耐受能力,并且能顯著促進(jìn)小鼠體重增長,具有一定的體內(nèi)抑菌作用,可選擇作為優(yōu)良益生菌制劑的菌株。
【圖文】：

圖１－２光學(xué)顯微鏡下部分分離菌株的形態(tài)特征逡逑Ａ：邋Ｃｌ，邋Ｂ：邋Ｃ２，邋Ｃ：邋Ｒ２０，邋Ｄ：邋Ｒ４１，邋Ｅ：邋Ｙ３，邋Ｆ：邋Ｋｌ，Ｘ１０００光學(xué)顯微昁下逡逑Ｆｉｇ．邋１－２邋Ｍｏｉｐｈｏｌｏｇｉｅｓ邋ｏｆ邋ｓｏｍｅ邋ｉｓｏｌａｔｅｓ邋ｕｎｄｅｒ邋ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ逡逑Ａ：邋Ｃｌ，邋Ｂ：邋Ｃ２，邋Ｃ：邋Ｒ２０，邋Ｄ：邋Ｒ４１，邋Ｅ：邋Ｙ３，邋Ｆ：邋Ｋｌ，邋Ｘ１邋000ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ逡逑１８逡逑

廣西大學(xué)獸醫(yī)碩士學(xué)位論文邐豬源益生細(xì)菌的分商|=定與生物學(xué)特性的研究逡逑ＰＣＲ產(chǎn)物，送至杰李生物公司進(jìn)行測序。逡逑２９株分離菌的１６ＳｒＲＮＡ基因序列在ＧｅｎＢａｎｋ進(jìn)行ＢＬＡＳＴ對(duì)比，運(yùn)用ＭｅｇＡｌｉｇｎ和逡逑ＭＥＧＡ６．０軟件進(jìn)行同源性與遺傳進(jìn)化分析，并制作了部分菌株的同源性分析表（圖１－４）逡逑和遺傳進(jìn)化樹（圖１－４）。結(jié)果表明：Ｃ２與參考菌株五／ａｅｃ／＿邋（ＬＣ１９３７２４．１）、五／ａｅｄ＿逡逑（ＫＹ９６３４５７．１邋）在同一分枝上，同源性達(dá)到１００％，，因此可判定Ｃ２為屎腸球菌。同樣法可判定Ｃ１和Ｃ３為乳酸腸球菌，Ｒ２０、Ｒ３０、Ｒ３７為植物乳桿菌，Ｒ４１－Ｒ４２為干酪乳桿菌，逡逑Ｙ１－Ｙ１２為蠟樣芽孢桿菌，Ｋ１－Ｋ７為枯草芽孢桿菌。逡逑Ｍ邋１邐２邐３邐４邐５邐６邐７８９邐１０邐１１邋Ｎ逡逑
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S816.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2518169