發(fā)布時(shí)間：2019-07-22 12:13

【摘要】：本研究旨在探討SP對(duì)內(nèi)蒙古白絨山羊毛囊干細(xì)胞增殖和分化過(guò)程中整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K1和K10九個(gè)基因表達(dá)量的研究,為內(nèi)蒙古白絨山羊毛囊干細(xì)胞定向增殖及其誘導(dǎo)分化提供相關(guān)的理論基礎(chǔ)。1.探尋研究SP對(duì)毛囊干細(xì)胞的最適增殖濃度,設(shè)立0mol/L、1×10-5 mol/L 1×10-6 mol/L,1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L六個(gè)濃度對(duì)毛囊干細(xì)胞進(jìn)行處理,每隔24h每個(gè)濃度各取8個(gè)孔的細(xì)胞進(jìn)行OD值進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定各處理組細(xì)胞的增殖情況；結(jié)果顯示,1×10-7 mol/L濃度的SP處理組細(xì)胞為本研究最適增殖濃度。2+探尋研究SP對(duì)毛囊干細(xì)胞的最適分化濃度,根據(jù)第一個(gè)實(shí)驗(yàn)中的各濃度的SP刺激毛囊干細(xì)胞,分別提取Od、Id、3d、5d、7d、14d和21d的細(xì)胞cDNA為模板采用實(shí)時(shí)定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、 KAP8、K1和K10九個(gè)基因表達(dá)量。結(jié)果顯示,1×10-7mol/L濃度的SP為本實(shí)驗(yàn)研究的最適增殖濃度,1×10-6mol/L濃度的SP為毛囊干細(xì)胞定向分化為毛囊細(xì)胞的最適分化濃度,1×10-9mol/L濃度的SP為毛囊干細(xì)胞定向分化為表皮細(xì)胞的最適分化濃度,且存在整合素131、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、 K1和K10在一定的時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)高表達(dá)的現(xiàn)象。
【圖文】：

內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩±學(xué)位論立３結(jié)果與分析逡逑３．邋１細(xì)胞總ＲＮＡ的提取逡逑采用邋ＲＮＡｉｓｏ邋Ｐｌｕｓ邋提取毛囊干細(xì)胞（ＰＳ）總邋ＲＮＡ，邋Ａｇｉｌｅｎｔ邋２１００測(cè)顯示２８Ｓ和１８Ｓ帶清晰，Ｒｉｎ值為１０。說(shuō)明ＲＮＡ完整性很進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。逡逑

３．３．４邋ｐ邋１整合素、Ｓ０Ｘ９基因、目－ａｃｔ邋ｉ邋ｎ和ＧＡＤＰＨ的標(biāo)準(zhǔn)曲線及其溶解曲線逡逑選擇合適的ｃＤＮＡ模板，按照一定的濃度稀釋后進(jìn)行定量ＰＣ民，繪制標(biāo)準(zhǔn)逡逑曲線，結(jié)果如圖１０所示，其溶解曲線如圖１１所示。逡逑結(jié)果顯示，（３１整合素基因的回歸系數(shù)１＾＝０．９９６４，擴(kuò)增效率為１０５．２６％；邋ＳＯＸ９逡逑基因的回歸系數(shù)１＾＝０．９９２４，擴(kuò)增曲線效率為９５．４９％；邋ｐ－ａｃｔｉｎ基因回歸系數(shù)逡逑１＾＝０．９９４６，擴(kuò)增效率為９５．６％，邋ＧＡＤＰＨ基因回歸系ex１＾＝０．９９８，擴(kuò)增效率為逡逑１１９．０８％，四個(gè)基因的回歸系數(shù)均大于，均為優(yōu)化擴(kuò)增，說(shuō)明此定量ＰＣ民條件可逡逑Ｗ用于檢測(cè)目的基因的相對(duì)表達(dá)量。逡逑Ｓｉａｎｄａｒｄ邋Ｃｕｒｖｅ邐Ｓｉｔｉ＾ａｒｉ邋Ｃｉｎｒｅ逡逑３Ｅｆ—－＿＿＿＿邐Ｉ邐３２＾＾逡逑２化邐＾￣＾￣－、邐５遜逡逑？３ｆｆ邐？？？、邐呈到逡逑§ＺＥ邐哉逡逑２４ｊ邐邋－叫邋Ｉ邐邐邐＾逡逑３邐－Ｉ邐＼邐０邐－３邐－２邐－１邐Ｂ逡逑Ｌｏｇ邋Ｃｏｎｃｅｎｌｉａｌｉｏｎ邐Ｌｏｇ邋Ｃｅｎｃｅｎｔｒ邋曲ｎ逡逑
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S827

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張世紅,趙晏;P物質(zhì)的免疫調(diào)節(jié)作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2002年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 黃暉;P物質(zhì)調(diào)控表皮干細(xì)胞β-catenin表達(dá)的機(jī)制及其在ESC分化中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

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本文編號(hào)：2517612