雌二醇對人羊膜間充質(zhì)干細胞增殖、凋亡的影響
發(fā)布時間:2025-01-15 15:55
目的:研究不同濃度雌二醇(estradiol,E2)對人羊膜間充質(zhì)干細胞(human amniotic mesenchymal stromal cells,HAMSCs)體外培養(yǎng)中增殖、凋亡的影響。方法:采用改良酶消化法提取HAMSCs,流式細胞學方法和免疫熒光法鑒定提取細胞。HAMSCs培養(yǎng)方法分為對照組和E2組(分別加入濃度為10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L E2)。CCK-8檢測各組HAMSCs增殖情況;q RT-PCR檢測干細胞特異基因Oct-4和凋亡相關基因Bcl-2、Bax的表達;Western blot檢測凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax的表達。結果:CCK-8檢測顯示各濃度E2組和對照組的HAMSCs增殖活性在1~6 d都隨時間的變化而變化(F時間=2 418.132,P時間=0.000);各濃度E2組在1~4 d的增殖率與對照組無明顯差異;4 d后,各濃度E2組的增殖率明顯高于對照組(F組別=246.601,P組別=0.000),各濃度組間無明顯差異。q RT-PCR檢測顯示10-6 mol/L E2組(1.00±0.10)的Oct-4 m RNA表達...
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本文編號:4027526
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圖1羊膜間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)及表面標記物鑒定PE對照CD45-PE100101102103104100101102103104細151050細3020100
重慶醫(yī)科大學學報2019年第44卷第3期(JournalofChongqingMedicalUniversity2019.Vol.44No.3)2.3qRT-PCR檢測Oct-4、Bcl-2、BaxmRNA表達含2%血清濃度的DMEM/F12培養(yǎng)基分別加入濃度為10-5、10-6....
圖2免疫熒光方法檢測羊膜間充質(zhì)干細胞Vimentin、CK18表達情況
重慶醫(yī)科大學學報2019年第44卷第3期(JournalofChongqingMedicalUniversity2019.Vol.44No.3)2.3qRT-PCR檢測Oct-4、Bcl-2、BaxmRNA表達含2%血清濃度的DMEM/F12培養(yǎng)基分別加入濃度為10-5、10-6....
圖4羊膜間充質(zhì)干細胞不同濃度E作用下β-actin48kD對照組10-5mol/L10-6mol/L10-7mol/L10-8mol/L
對HAMSCs起促凋亡作用。E2濃度為10-6mol/L時對抗凋亡基因(Bcl-2)無顯著影響,而其他濃度(10-5、10-7、10-8mol/L)都下調(diào)抗凋亡基因(Bcl-2),從蛋白水平也可看出E2濃度在10-6mol/L時對凋亡蛋白的影響最小,這可能是E2在此濃度時對維持H....
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