發(fā)布時(shí)間：2025-01-18 16:37

　　<正> 目的:克隆腦中OTR cDNA編碼區(qū)全長(zhǎng),探討腦內(nèi)OTR的結(jié)構(gòu)、功能和及OT-OTR的作用機(jī)制。方法:①采用RT-PCR方法從大鼠外周和中樞神經(jīng)組織中同時(shí)克隆OTR的cDNA編碼區(qū)全長(zhǎng),獲得OTRcDNA;②利用pET-28-α載體構(gòu)建OTR全長(zhǎng)與His tag融合蛋白原核表達(dá)載體:pET-28-α-OTR;利用PGEX-4T-3載體構(gòu)建了OTR不同結(jié)構(gòu)域與GST(GlutathioneS-Transferase,谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶)的融合蛋白表達(dá)載體,并在大腸桿菌表達(dá)株BL21內(nèi)進(jìn)行了這些重組質(zhì)粒的誘導(dǎo)表達(dá)研究;③利用細(xì)胞培養(yǎng)和真核轉(zhuǎn)染技術(shù),建立穩(wěn)定表

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