發(fā)布時(shí)間：2025-01-05 21:35

　　 目的探討海藻酸鈉(Alg)/乙二醇?xì)ぞ厶?GC)雙網(wǎng)絡(luò)凝膠材料體外刺激對小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)免疫功能的影響。方法制備Alg、GC單網(wǎng)絡(luò)水凝膠材料及雙網(wǎng)絡(luò)(DN)水凝膠材料(Alg/GC),根據(jù)不同水凝膠材料將細(xì)胞分為Alg組、GC組、DN組及對照組。采用免疫磁珠分離法分選BALB/c小鼠脾臟CD4+CD25+Treg,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析Treg叉頭翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子(Foxp3)及細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原(CTLA-4)在不同時(shí)效(刺激24h或48h)、不同培養(yǎng)環(huán)境[有無多黏菌素B(PMB)]下的表達(dá)水平,以確定后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間以及是否選用含PMB的培養(yǎng)基;觀察Treg與效應(yīng)T細(xì)胞共培養(yǎng)后T細(xì)胞增殖活性改變;采用酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)技術(shù)檢測Treg分泌白細(xì)胞介素(IL)-10、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β及效應(yīng)T細(xì)胞分泌IL-2、IL-4與干擾素(IFN)-γ的水平。結(jié)果選定實(shí)驗(yàn)條件為刺激24h,并使用含PMB的培養(yǎng)基。Alg/GC雙網(wǎng)絡(luò)水凝膠及GC單網(wǎng)絡(luò)水凝膠作用24h后,與對照組[CTLA-4 (47.73±5.35)%,TGF-β(558.75±48.58)pg/ml...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑
    1.2 支架材料的制備
    1.3 內(nèi)毒素檢測
    1.4 小鼠脾臟細(xì)胞分離與單個(gè)核細(xì)胞制備
    1.5 Treg分離與鑒定
    1.6 細(xì)胞培養(yǎng)及分組
    1.7 CD4+CD25+Treg細(xì)胞存活率及各功能指標(biāo)檢測
    1.8流式細(xì)胞術(shù)檢測CD4+CD25+Treg中Fox p3及CTLA-4的表達(dá)
    1.9 ELISA法檢測細(xì)胞因子分泌水平
    1.1 0 C F S E法檢測效應(yīng)T細(xì)胞增殖活性
    1.1 1 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 CD4+CD25+Treg細(xì)胞存活率及各功能指標(biāo)檢測結(jié)果
    2.2 各水凝膠材料對CD4+CD25+Treg分泌IL-10和TGF-β的影響
    2.3 各水凝膠材料刺激下C D 4+C D 2 5+Tr e g對Te f f s增殖及T h 1/T h 2分化的影響
3 討論



本文編號：4023300