目的:研究不同濃度外源性H₂O₂干預(yù)對(duì)骨骼肌細(xì)胞MG53(Mitsugumin 53)膜修復(fù)作用的影響,探討H₂O₂與MG53的關(guān)系。方法:培養(yǎng)C2C12細(xì)胞,不同濃度外源性H₂O₂干預(yù)后檢測(cè)MG53蛋白表達(dá);培養(yǎng)MG53基因敲除(MG53 KO)小鼠原代骨骼肌細(xì)胞,轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)-MG53質(zhì)粒后用不同濃度外源性H₂O₂干預(yù),活細(xì)胞成像系統(tǒng)觀察細(xì)胞膜損傷后MG53的修復(fù)過(guò)程,用熒光相對(duì)改變量ΔF/F0表示MG53修復(fù)能力。結(jié)果:①外源性H₂O₂能顯著促進(jìn)MG53蛋白表達(dá)升高;②高濃度的H₂O₂能顯著增強(qiáng)MG53的膜修復(fù)作用。結(jié)論:H₂O₂能促進(jìn)MG53蛋白表達(dá)并增強(qiáng)其修復(fù)作用。

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【文章目錄】：
1 對(duì)象和方法
    1.1 小鼠基因型鑒定
    1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組
    1.3 誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞分化培養(yǎng)
    1.4 不同濃度外源性H2O2孵育細(xì)胞
    1.5 Western blot檢測(cè)細(xì)胞MG53蛋白水平
    1.6 MG53 KO小鼠骨骼肌細(xì)胞原代培養(yǎng)、鑒定及轉(zhuǎn)染
    1.7 活細(xì)胞成像系統(tǒng)觀察MG53的修復(fù)過(guò)程
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 小鼠基因型鑒定結(jié)果
    2.2 外源性H2O2對(duì)C2C12成肌細(xì)胞MG53蛋白表達(dá)的影響
    2.3 原代骨骼肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率觀察
    2.4 活細(xì)胞影像下觀察外源性H2O2對(duì)MG53膜修復(fù)作用的影響
3 討論
    3.1 H2O2對(duì)骨骼肌細(xì)胞膜修復(fù)作用的影響
    3.2 外源性H2O2對(duì)MG53膜修復(fù)作用的影響
4 結(jié)論



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