發(fā)布時間：2020-12-15 10:07

　　目的制備生長抑素(SS)單克隆抗體(mAb),并對其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。方法用偶聯(lián)方法制備SS免疫原復(fù)合物,用免疫原復(fù)合物免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)制備SS mAb。用間接ELISA檢測mAb的亞型及效價,用定量ELISA檢測mAb 2E7的含量,用間接ELISA檢測mAb的特異性和mAb在體外、體內(nèi)對SS的中和作用。結(jié)果獲得兩株能穩(wěn)定分泌SS mAb的雜交瘤細(xì)胞株2A5、 2E7,兩株抗體的亞型均為IgG1,2A5效價為1∶100 000,2E7效價為1∶1 000 000, 2E7含量為5.4 mg/mL。SS mAb只特異性地和SS純品及SS免疫原復(fù)合物發(fā)生免疫反應(yīng),不和單純載體蛋白(牛血清白蛋白)發(fā)生免疫反應(yīng),也不和其他肽類物質(zhì)如生長激素、胰島素、胃泌素發(fā)生交叉反應(yīng)。SS mAb在體外能抑制SS和兔抗SS抗體的免疫反應(yīng),注射到體內(nèi)能中和機(jī)體內(nèi)的SS,從而促進(jìn)生長激素的分泌。使循環(huán)血中生長激素的含量顯著增加。結(jié)論成功制備了SS mAb,該mAb濃度大、效價高、特異性強(qiáng),對SS功能具有較強(qiáng)的免疫中和作用。 

【文章來源】：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2019年04期 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 SS免疫原復(fù)合物的制備
        1.2.2 BALB/c小鼠的免疫
        1.2.3 細(xì)胞融合及陽性克隆的篩選
        1.2.4 SS mAb的大量制備
        1.2.5 SS mAb效價檢測
        1.2.6 SS mAb含量的檢測
        1.2.7 SS mAb IgG亞型檢測
        1.2.8 SS mAb的特異性檢測
        1.2.9 體內(nèi)檢測SS mAb2E7對SS免疫中和性
        1.2.10 體外檢測抗SS mAb對SS免疫中和性
2 結(jié)果
    2.1 獲得抗SS mAb雜交瘤細(xì)胞株
    2.2 SS mAb 2E7含量測定
    2.3 mAb特異性較好
    2.4 SS mAb體外中和實(shí)驗(yàn)
    2.5 小鼠靜脈注射抗SS mAb增加小鼠血清生長激素水平
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2918097