發(fā)布時(shí)間：2020-12-11 11:07

　　胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-I）是一種多功能的細(xì)胞增殖調(diào)控因子。重組人胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（rhIGF-I）是一種很有發(fā)展?jié)摿εc廣闊臨床應(yīng)用前景的藥物，現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展為重組hIGF-I的大規(guī)模生產(chǎn)提供了可能途徑。 基因工程菌的發(fā)酵技術(shù)是基因工程藥物大規(guī)模生產(chǎn)的必備技術(shù)。本研究構(gòu)建了重組hIGF-I工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF，對(duì)該重組工程菌的生長(zhǎng)及產(chǎn)物的表達(dá)規(guī)律進(jìn)行了探索，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行高密度發(fā)酵的初步研究，菌體最終發(fā)酵密度達(dá)OD₆₀₀值20，表達(dá)的重組蛋白占菌體總蛋白的25.4％，初步形成了一套重組hIGF-I工程菌發(fā)酵的工藝。 重組hIGF-I在重組工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF中以包涵體的形式表達(dá)。針對(duì)這一重組蛋白包涵體的洗滌、變性、復(fù)性以及最終的分離純化過(guò)程進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，洗滌的包涵體純度可達(dá)67.8％；8mol/L尿素及10mmol/L DTT可以使包涵體充分溶解。在復(fù)性過(guò)程中，采用分步透析逐漸降低尿素濃度的方法，可以有效地提高復(fù)性的效率；與此同時(shí)，在復(fù)性液中加入氧化型... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略語(yǔ)
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 重組hIGF-1工程菌的發(fā)酵研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 重組人胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ的純化研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 重組人胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ研究進(jìn)展
致謝
在校期間發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2910424