發(fā)布時間：2020-12-11 03:06

　　目的:研究caspase-8小發(fā)夾RNA（Cap8 shRNA）對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）凋亡的調(diào)控作用。方法:構(gòu)建2個靶向人caspase-8基因的穿梭質(zhì)粒pAd-Cap8 shRNA,并鑒定可有效抑制人HEK293細(xì)胞中caspase-8表達(dá)的pAd-Cap8 shRNA質(zhì)粒。構(gòu)建表達(dá)Cap8 shRNA的重組腺病毒質(zhì)粒,并在HEK293細(xì)胞中包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。檢測rAd-Cap8 shRNA感染的hMSCs中caspase-8 mRNA和蛋白表達(dá)。利用annexin V/PI雙染色法和caspase-8活性檢測分析去血清/缺氧誘導(dǎo)的hMSCs凋亡變化,利用熒光定量PCR檢測hMSCs中VEGF、肝細(xì)胞生長因子1（HGF）、胰島素樣生長因子（IGF-1）、Bcl-2和Bcl-xL mRNA表達(dá)。結(jié)果:通過定量PCR篩選到可有效抑制caspase-8表達(dá)的pAd-Cap8 shRNA質(zhì)粒。成功構(gòu)建Cap8 shRNA的重組腺病毒質(zhì)粒,并包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。熒光定量PCR和Western blotting結(jié)果證實rA... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2014年07期 第1172-1178頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁


本文編號：2909791