發(fā)布時間：2020-12-07 00:48

　　本研究探討體外誘導人誘導性多能干細胞（induced pluripotent stem cell,iPSC）分化為造血干/祖細胞的能力。在體外用小鼠骨髓基質細胞OP9與人類iPSC共培養(yǎng)的方法,將iPSC誘導分化為造血干/祖細胞;用流式細胞術檢測造血干/祖細胞表面標志物的表達水平;用實時定量PCR檢測分化過程中iPSC及造血干/祖細胞的相關基因mRNA表達水平的變化;用免疫磁珠法分離CD34+造血干/祖細胞并進行半固體集落形成實驗檢測細胞的集落形成能力。結果表明,iPSC與OP9細胞共培養(yǎng)誘導造血分化的第4天即可觀察到iPSC形態(tài)變化;流式細胞術檢測顯示,分化得到的細胞表達已知的造血干/祖細胞相關表面標志物CD34和CD43分子。在體外分化過程中多能性的標志基因Oct4的表達逐漸下降,造血相關轉錄因子Gata-2的表達逐漸升高,而Runx-1的表達量則呈波浪式變化,CD34表達量逐漸升高。集落培養(yǎng)14 d能夠得到紅系集落（CFU-E）,粒系集落（CFU-G）,巨核系集落（CFU-M）,粒-巨核系集落（CFU-GM）和混合系集落（CFU-GEMM）。結論:iPSC細胞能夠在體外通過與OP... 

【文章來源】：中國實驗血液學雜志. 2014年01期 第136-141頁 北大核心

【文章頁數】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    細胞株來源
    主要試劑和儀器
    細胞培養(yǎng)
    i PSC細胞與OP9 細胞共培養(yǎng)
    CD34+細胞的免疫磁珠法分選
    集落形成實驗
    RNA提取和c DNA逆轉錄及Q-PCR
結果
    細胞的培養(yǎng)與形態(tài)觀察
    誘導造血分化
    流式細胞術檢測
    Q-PCR檢測
    CD34+細胞集落形成實驗
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Expansive effects of aorta-gonad-mesonephros-derived stromal cells on hematopoietic stem cells from embryonic stem cells[J]. FU Jin-rong, LIU Wen-li, ZHOU Yu-feng, ZHOU Jian-feng, SUN Han-ying, LUO Li, ZHANG Heng and XU Hui-zhen Department of Hematology, Tongji Hospital, Tongji Medical School, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China.  Chinese Medical Journal. 2005(23)



本文編號：2902305