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RTCA與MTT法用于檢測腸道微生物細(xì)胞毒性的比較研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-03 02:32
  目的運(yùn)用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析(RTCA)法和MTT法檢測干酪乳桿菌(L.casei)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)的細(xì)胞毒性,并比較兩者優(yōu)缺點(diǎn)。方法將L.casei及EHEC的菌液、菌體裂解液(MOI=200)以及上清液(25%)感染HT-29和LoVo細(xì)胞,經(jīng)RTCA法和MTT法觀察細(xì)菌對細(xì)胞的校正細(xì)胞指數(shù)(NCI)及細(xì)胞活力的影響。結(jié)果 RTCA法與MTT法結(jié)果一致,L.casei的活菌、菌體裂解液對HT-29細(xì)胞和LoVo細(xì)胞無明顯毒性。EHEC的活菌對HT-29細(xì)胞和LoVo細(xì)胞有明顯毒性,其菌體裂解液對HT-29細(xì)胞有明顯毒性、對LoVo細(xì)胞無明顯毒性。在上清液實(shí)驗(yàn)中,RTCA法檢測出L.casei和EHEC對HT-29細(xì)胞無明顯毒性,而LoVo細(xì)胞受培養(yǎng)基影響未能正確反映出上清液細(xì)胞毒性結(jié)果。結(jié)論與MTT法相比,RTCA法更適于細(xì)菌細(xì)胞毒性檢測,但應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前選擇合適的細(xì)胞系及種植濃度,建議在選用RTCA法檢測細(xì)胞毒性時(shí)選擇兩種或兩種以上細(xì)胞系,多方驗(yàn)證以避免漏檢。 

【文章來源】:軍事醫(yī)學(xué). 2019年06期 第442-447頁 北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.3 細(xì)胞
    1.4 細(xì)菌
    1.5 實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備
    1.6 MTT法檢測細(xì)胞毒性
    1.7 細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)
    1.8 RTCA法檢測細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
    1.9 統(tǒng)計(jì)分析
2結(jié)果
    2.1 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.2 RTCA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)
        2.2.2菌體細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.3菌體裂解液細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.4上清液細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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