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鐵的血管效應(yīng)及其作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2020-11-21 14:54
   背景:鐵是維持機(jī)體許多重要的代謝活動(dòng)所必不可少的元素。然而近來的研究發(fā)現(xiàn),鐵超載在機(jī)體一些疾病(如動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血/復(fù)灌性損傷、遺傳性血色素病)的發(fā)展過程中起了重要的作用。動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和鐵引起的氧化應(yīng)激,平滑肌細(xì)胞增殖以及脂質(zhì)過氧化有關(guān)。循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)鐵的增加可能是導(dǎo)致冠脈粥樣硬化病人血管舒張功能損傷的主要原因。然而,目前對(duì)于鐵的增加引起內(nèi)皮依賴性血管舒張功能改變的直接效應(yīng)以及可能的機(jī)制并不清楚。此外,鐵對(duì)血管收縮功能的影響目前仍不明確。 目的:本文主要觀察鐵對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的直接效應(yīng),以及鐵對(duì)胸主動(dòng)脈環(huán)收縮和舒張功能的影響,并探討其可能的機(jī)制。 方法:采用血管環(huán)灌流裝置測(cè)定離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的KCI和苯腎上腺素(PE)的收縮效應(yīng),以及乙酰膽堿(ACh)血管舒張效應(yīng)。具體方法如下。取雄性Sprague-Dawley大鼠的胸主動(dòng)脈條上段,置于4℃的K-H液中,將血管剪成2~3mm長(zhǎng)的主動(dòng)脈環(huán),部分血管環(huán)先用機(jī)械法去除血管內(nèi)皮,迅速懸掛至離體灌流裝置中。主動(dòng)脈環(huán)穩(wěn)定于37℃的K-H液中,溶液以95%O_2+5%CO_2飽和。逐步調(diào)節(jié)主動(dòng)脈環(huán)張力至2g,用60mmol/L濃度的KCI刺激,待收縮幅度穩(wěn)定后洗脫,共重復(fù)三次,以激發(fā)最大收縮。藥物引起的收縮幅度均以第三次KCI引起的最大收縮幅度為相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值,用百分比值來表示。用10~(-6)mol/L PE預(yù)收縮后,加入不同濃度的ACh、硝普鈉(SNP)或L-精氨酸(L-Arg), 浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 以各種濃度所致的舒張幅度達(dá)到PE所致的收縮幅度的百分比作血管舒張反應(yīng)的量-效曲 線。各組資料以 me盯仕SE表t,采用 one-wnyANOVA以及 Newman-Keuls pOSt hoe test 做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。p<0.05認(rèn)為有顯著差異。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 第一部分,鐵對(duì)血管收縮功能的影響(均選用去內(nèi)皮的血管環(huán))。 (l)100pmol幾拘磅酸鐵(Ferric ammonium citrate,F(xiàn)AC)對(duì)血管具有直按收縮效 應(yīng),可引起大鼠主動(dòng)脈環(huán)發(fā)生相位性收縮。首先出現(xiàn)快速收縮期,最大收縮幅度可達(dá) 24刀15土2.3川,之后血管舒張并回到靜息水平,整個(gè)過程約二十分鐘。 (2)當(dāng)細(xì)胞外液鈣離于的濃度增加一倍,鐵所致的血管環(huán)收縮幅度明顯增加 (P<0刀1),持續(xù)時(shí)間亦明顯延長(zhǎng)(>60min)。主動(dòng)脈環(huán)用硝苯毗咤(Nifedpine,Nif) 孵育 15min以阻斷卜型鈣通道后,再給予鐵刺檄,與未加 Nif的同濃度細(xì)胞外鈣離于組 相比,鐵所致的收縮幅度均明顯降低(均P<0刀1),且高鈣液中鐵引起的相位性收縮幅 度明顯高于正常鈣組。 ()在細(xì)胞外液為無鈣時(shí),用 10‘mol/卜佛波酯(Phorbol 12,13-ibutyrate,PDBu) 收縮主動(dòng)脈環(huán),P*BU所致的收縮幅度最大可達(dá)37.刀幻*5%,穩(wěn)定后給予F*C (100pmol/L),此時(shí)主動(dòng)脈環(huán)收縮幅度增加 49.1813.75%。 (4)鐵使KCI所致的血管環(huán)收縮幅度顯著降低。即未川鐵孵育糾KCI引起血.管環(huán) 收縮為93.57士3.95%;而鐵孵育30min后,KC!引起血管環(huán)收縮幅度降低為82二5士212 %,兩者有顯著差異(p<0刀1)。而鐵孵育30min后,使PE引起的收縮量-效曲線右移 (p<0.05)。二甲基亞礬(*MSO)、過氧化氫酶和谷恍甘肽(osN)可明顯降低鐵對(duì)*E 血管收縮反應(yīng)的抑制作用(卜<0刀5)。 第二部分,鐵對(duì)血管舒張功能的影響(無特殊說明,均為內(nèi)皮完整的血管環(huán))。 門)主動(dòng)脈環(huán)用鐵孵育后,可顯著降低ACh產(chǎn)生的內(nèi)皮細(xì)胞依賴性主動(dòng)脈環(huán)的舒 張作用。主動(dòng)脈環(huán)用鐵孵育之前,補(bǔ)充NO的前體物質(zhì)卜-Arg,可增加血管對(duì)低濃度ACh 2 浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文 (l”’mol/L)的舒張反應(yīng)的程度。但>10”’mollL時(shí) ACh所致的血管舒張幅度與單純鐵孵 育組相比無明顯差異,提示補(bǔ)充LAfg并未明顯改善鐵負(fù)荷引起血管舒張功能的下降。 (2)正常含有內(nèi)皮的主動(dòng)脈環(huán)在PE預(yù)收縮后,給予不同濃度的L-Afg可引起血管 舒張;鐵孵育后,L-AFg引起的舒張幅度顯著減。≒<0刀5)。無內(nèi)皮的主動(dòng)脈環(huán)給予 NO的供體一SNP,使PE預(yù)收縮的血管舒張;FAC孵育后,對(duì)SNP產(chǎn)生的血管舒張作 用無明顯影響。 (3)DMSO對(duì)鐵抑制ACh血管舒張的作用無明顯影響:主動(dòng)脈環(huán)用CAT孵育30 min 后,再加入FAC共同孵育,發(fā)現(xiàn)與單純鐵處理組相比,在ACh濃度j] 10-’、10‘、3x10“‘M 時(shí),血管的舒張幅度有顯著增加(P小刀1):GSH可明顯對(duì)抗鐵對(duì)*o血管舒張作用的 抑制。 (4)正常大鼠主動(dòng)脈中NOS活性為
【學(xué)位單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2002
【中圖分類】:Q591
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
正文
    前言
    1. 材料和方法
    2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 鐵對(duì)血管收縮功能的影響
        2.2 鐵對(duì)血管舒張功能的影響
    3. 討論
        3.1 鐵的縮血管效應(yīng)及其所致的收縮功能失調(diào)
        3.2 鐵抑制血管舒張功能及其機(jī)制
        3.3 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
綜述
致謝

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