發(fā)布時間：2020-11-18 01:31

　　 【目的】探討鈣熒光白和熒光刀豆蛋白A標(biāo)記白念珠菌后對其生長活性和粘附能力的影響,以明確在念珠菌和宿主細(xì)胞相互作用研究中鈣熒光白和熒光刀豆蛋白A是否適用于活念珠菌的標(biāo)記。【方法】分別使用鈣熒光白和結(jié)合Alexa fluor 488的刀豆蛋白A標(biāo)記20株白念珠菌,將標(biāo)記熒光的白念珠菌酵母細(xì)胞接種至酵母提取物蛋白胨葡萄糖培養(yǎng)基,通過菌落計數(shù)法檢測熒光標(biāo)記的白念珠菌的生長活性。將熒光標(biāo)記的白念珠菌酵母細(xì)胞分別與巨噬細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞共培養(yǎng),使用熒光顯微鏡檢測白念珠菌的粘附能力�！窘Y(jié)果】鈣熒光白組和熒光刀豆蛋白A組白念珠菌的菌落數(shù)目和未標(biāo)記的對照組相比,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.942,P=0.885);鈣熒光白組和熒光刀豆蛋白A組的白念珠菌在巨噬細(xì)胞上的粘附數(shù)目均比對照組少(P=0.000,P=0.000);鈣熒光白組和熒光刀豆蛋白A組的白念珠菌在腸上皮細(xì)胞上的粘附數(shù)目也均比對照組組少(P=0.000,P=0.000)。對照組組白念珠菌與細(xì)胞共培養(yǎng)半小時后可長出菌絲,而鈣熒光白標(biāo)記的白念珠菌與細(xì)胞共培養(yǎng)半小時后未長出菌絲。【結(jié)論】鈣熒光白和熒光刀豆蛋白A標(biāo)記白念珠菌后不影響其生長活性,可顯著降低其粘附巨噬細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞的能力。鈣熒光白染色影響白念珠菌的出芽過程。鈣熒光白和熒光刀豆蛋白A不適用活念珠菌的標(biāo)記。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌株
    1.2 細(xì)胞
    1.3 CFW及Con A熒光染色
    1.4 白念珠菌生長活性檢測
    1.5 粘附能力檢測
        1.5.1 巨噬細(xì)胞粘附實驗
        1.5.2 腸上皮細(xì)胞粘附實驗
        1.5.3 熒光顯微鏡檢測
    1.6 統(tǒng)計方法
2 結(jié)果
    2.1 白念珠菌生長活性
    2.2 粘附巨噬細(xì)胞能力
    2.3 粘附腸上皮細(xì)胞能力
3 討論

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本文編號：2888173