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  本文選題：大鼠肝星狀細胞 + 培養(yǎng)��； 參考：《臨床醫(yī)藥文獻電子雜志》2014年10期

【摘要】：目的肝星狀細胞(hepatic stellate cell,HSC)是一類胞漿內(nèi)富含Vitamin A脂滴的特殊類型的細胞,激活后的HSC胞漿中Vitamin A脂滴減少活消失,是研究肝纖維化疾病的良好素材。本研究欲改良HSC細胞的培養(yǎng)方法,并鑒別四種HSC細胞鑒定方法的有效性。方法采用含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基對已培養(yǎng)傳代的大鼠肝星狀細胞進行培養(yǎng)。分別采用油紅0染色、Vitamin A脂滴的紫外激發(fā)、a-SMA免疫組化、a-SMA免疫熒光四種方法對培養(yǎng)的HSC進行鑒定。結(jié)果用含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的大鼠肝星狀細胞,細胞形態(tài)飽滿,胞漿不因傳代而減少,細胞形態(tài)維持穩(wěn)定,油紅O染色后可清晰顯示未激活HSC內(nèi)的脂滴;紫外激發(fā)下Vitamin A脂滴發(fā)出極易淬滅的藍綠色熒光;以泡球蚴囊液為外源性刺激,使HSC激活,a-SMA免疫組化染色激活的HSC胞漿均可見棕黃色顆粒狀沉淀;a-SMA免疫熒光顯示激活的HSC細胞胞漿均可見FITC的激發(fā)的綠色熒光。結(jié)論含0.2 m M油酸的完全培養(yǎng)基可有效維持細胞形態(tài)。油紅0染液、Vitamin A脂滴的紫外激發(fā)可有效鑒定未激活的HSC,a-SMA免疫組化、a-SMA免疫熒光方法是鑒別激活的HSC的有效方法。
[Abstract]:Objective Hepatic stellate cell (HSC) is a special type of cells rich in Vitamin A lipid droplets in the cytoplasm. The reduced activity of Vitamin A lipid droplets in activated HSCs is a good material for the study of hepatic fibrosis. The aim of this study was to improve the culture method of HSC cells and to identify the effectiveness of four HSC cell identification methods. Methods cultured rat hepatic stellate cells were cultured on a complete culture medium containing 0.2 mm oleic acid. The cultured HSC were identified by oil red 0 staining and ultraviolet stimulated SMA immunofluorescence staining. Results Rat hepatic stellate cells cultured in 0.2 mm oleic acid culture medium were full in shape, no decrease in cytoplasm due to passage, cell morphology remained stable, lipid droplets in HSC could be clearly displayed after oil red O staining. Vitamin A lipid droplets emitted easily quenched blue-green fluorescence under ultraviolet excitation. The cytoplasm of HSC activated by HSC was stained by immunohistochemical staining. All the HSC cells activated by HSC showed the green fluorescence induced by FITC in the cytoplasm of HSC activated by brown granular precipitate and a-SMA immunofluorescence. Conclusion the complete culture medium containing 0.2 mm oleic acid can effectively maintain cell morphology. Ultraviolet excitation of Vitamin A lipids in oil red 0 dye solution can effectively identify the unactivated HSCA- SMA immunofluorescence method is an effective method to identify activated HSC.
【作者單位】： 青海大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽胰外科;
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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2 蔡木發(fā);吳顯勁;李靜;;300例HBV前S1抗原與HBV標志物及HBV-DNA檢測結(jié)果分析[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2011年10期

3 ;Expression of Overlapping PreS1 Fragment Recombinant Proteins for the Determination of Immunogenic Domains in HBsAg PreS1 Region[J];Acta Biochimica et Biophysica Sinica;2004年06期

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2 陳家堅;張濤;;乙型肝炎病毒前S1抗原對判斷病毒復(fù)制和乙型肝炎預(yù)后的價值[J];實用肝臟病雜志;2010年02期

3 占國清;譚華炳;李芳;李儒貴;李金科;;血清乙型肝炎病毒前S1抗原對判定HBV DNA復(fù)制的臨床價值[J];實用肝臟病雜志;2011年02期

4 陳宇飛;云華;王馨厚;;乙肝病毒前S1抗原檢測在入境人員檢測診斷中的應(yīng)用價值[J];中國國境衛(wèi)生檢疫雜志;2012年03期

5 周玉寶;劉芳;武易;;慢性乙型肝炎患者血清學(xué)指標綜合評價[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

6 姜世輝;李紅春;劉芳;李清明;;乙型肝炎病毒前S1抗原與乙型肝炎“兩對半”不同模式間的關(guān)系[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年16期

7 黃國清;郭強忠;舒少為;唐恒鋒;吳愛成;;乙型肝炎X蛋白的檢測及其對乙型病毒性肝炎影響的探討[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年18期

8 丁文娟;洪莉;;氧化應(yīng)激與膠原代謝疾病關(guān)系的研究進展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年06期

9 張永生;徐珊;朱飛葉;付玲珠;盛云杰;;肝纖維化“微ve積”中醫(yī)病證探究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年09期

10 張琴;黃濤;卓強;鄭人源;;肝纖維化中MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對肝星狀細胞活性的影響[J];成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年04期

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1 王靜濱;柔肝煎抗肝纖維化作用及其對大鼠肝組織TGF-β_1和Smads的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

2 吳飛;Hint1抑制肝纖維化作用機制的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

3 喻冬柯;化合物B192和EGCG的藥效和藥理作用機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

4 李鳴;益氣解毒法對大鼠肝干細胞增殖及肝臟再生影響的機制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2013年

5 陳雷;慢病毒介導(dǎo)的星形膠質(zhì)細胞升高基因-1表達下調(diào)對肝星狀細胞生物學(xué)行為的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

6 郭曉紅;IGFBPrP1致肝纖維化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的篩選與驗證[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

7 鄧亮;CREB-1在TGF-β3抗肝纖維化中的作用[D];華中科技大學(xué);2013年

8 吳飛;Hint1抑制肝纖維化作用機制的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

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3 鄧樂;乙肝患者聯(lián)合檢測血清前S1、前S2和E抗原的臨床意義[D];南昌大學(xué);2012年

4 潘澎;芪術(shù)顆粒對肝纖維化形成過程中PI3K/AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

5 李媛;化瘀通絡(luò)中藥對肝纖維化大鼠的防治作用及其對TGF-β1/Samd信號通路的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

6 何巧玲;六月青多糖抗肝纖維化作用及其分子機制的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

7 汪永玲;軟堅護肝片的安全性評價和初步作用機制研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

8 李芊蔚;TGF-β_1對HSC活化及阻斷機制的實驗研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

9 黃施施;巨噬細胞接觸對肝星狀細胞活化的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

10 李倩;白藜蘆醇介導(dǎo)NF-κB轉(zhuǎn)錄及PI3K磷酸化抑制肝星狀細胞活化的分子機制研究[D];延邊大學(xué);2013年

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1 李旭紅;賴江瓊;繆松毅;王崇國;;HBV前S1抗原在乙型肝炎臨床診斷中的意義[J];傳染病信息;2007年03期

2 朱傳武;HBV前C/C基因變異與宿主T細胞免疫的關(guān)系[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊);2001年06期

3 高建鋼,張保平,楊扶德;乙型肝炎病毒前S1抗原(PreS1Ag)陽性血清分析研究[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年02期

4 劉孫琴;嚴蜀華;;HBV前S1蛋白的臨床應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)檢驗與臨床;2007年02期

5 趙建平;;前s1抗原與兩對半在乙型肝炎檢測中的意義分析[J];實用心腦肺血管病雜志;2010年11期

6 胡宏章;崔瑩;龔梅;;乙肝病毒e系統(tǒng)、Pre-S1抗原與HBV-DNA相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué);2010年03期

7 閻震;張軍;韓曉靜;;熒光定量檢測HBV-DNA與ELISA檢測乙肝標志物模式的比較分析[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2007年24期

8 ;慢性乙型肝炎防治指南[J];中華傳染病雜志;2005年06期

9 孫華;張劍;曹美芳;;HBV-DNA熒光定量檢測的臨床意義[J];中國民康醫(yī)學(xué);2006年24期

10 湯立新;;血清HBV-DNA熒光定量PCR檢測與乙肝病毒標志物模式的相關(guān)性[J];職業(yè)衛(wèi)生與病傷;2007年02期

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1 鄭元義,王文兵,戴立里;肝星狀細胞提取方法[J];胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志;2002年03期

2 陳益平,陳永平;肝星狀細胞的研究進展[J];浙江臨床醫(yī)學(xué);2004年07期

3 張新勝,杜娟,王雁北;肝星狀細胞研究進展[J];四川解剖學(xué)雜志;2004年04期

4 申建剛;張曉嵐;;肝星狀細胞凋亡機制研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2006年10期

5 黃豈平;司晉嬌;;力學(xué)因素對肝星狀細胞轉(zhuǎn)移分化的影響[J];中國細胞生物學(xué)學(xué)報;2012年12期

6 楊艷宏;肝星狀細胞的形態(tài)學(xué)及分離[J];杭州醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;1997年03期

7 李海媛;王雪;時永全;韓英;;建立同時分離培養(yǎng)小鼠肝細胞及肝星狀細胞的技術(shù)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2014年16期

8 褚云香;鄭勇;黃延紅;王明遠;裴學(xué)蓮;陳瑩;;簡易經(jīng)濟的肝星狀細胞的分離培養(yǎng)方法[J];石河子大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2006年02期

9 謝艷爽,郭順根;血小板衍生生長因子在肝星狀細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J];中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志;2004年03期

10 王海南;肝星狀細胞與神經(jīng)支配[J];肝臟;2000年03期

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1 沈薇;鐘曉琴;;肝細胞因子促進肝星狀細胞凋亡的機制[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（下冊）[C];2007年

2 張宗h，

本文編號：2031526