目的制備甲狀腺素運載蛋白(transthyretin,TTR)的時間分辨免疫熒光(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)試劑盒并對其性能進行評價。方法將抗TTR的4H2單克隆抗體作為包被抗體包被至96孔板,用Eu³⁺標(biāo)記3E4單克隆抗體作為檢測抗體,制備雙抗體夾心TRFIA試劑盒,應(yīng)用該試劑盒對42例川崎病(Kawasaki disease,KD)患兒及13名健康兒童的血清進行檢測,以稀釋回收率、準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性等指標(biāo)對試劑盒的效能進行評價。結(jié)果該研究制備的TTR TRFIA試劑盒與Western blot法同時檢測42份KD臨床樣本和13份健康樣本,兩方法的結(jié)果符合率為100%,特異性強。試劑盒的最低檢出濃度為0. 05μg/ml,稀釋回收率為88. 00%～111. 00%,分析內(nèi)精密度為8. 01%～9. 17%,分析間精密度為8. 88%～11. 82%。穩(wěn)定性實驗表明該試劑盒可在4℃穩(wěn)定保存6個月,37℃穩(wěn)定保存7 d。結(jié)論該研究制備的TTR TRFIA試劑盒具有準(zhǔn)確性高、方便快捷等優(yōu)點,適用于大批量臨床KD血...

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圖1TTRTRFIA試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線

TTR為標(biāo)準(zhǔn)品，其劑量-反應(yīng)曲線見圖1。方程為:Y=494x+272.72，線性范圍為0.1～100μg/ml,R2=0.9976，表明本試劑盒有良好的劑量-反應(yīng)效應(yīng)。平行測定10次零參考標(biāo)準(zhǔn)品的熒光值，并計算其均值(x珋)及標(biāo)準(zhǔn)差(s)，用x珋+2s代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計算得出T....

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