發(fā)布時間：2020-11-14 02:40

　　 瘧疾是由瘧原蟲引起的一種嚴重的寄生蟲病。其中,惡性瘧原蟲是導致人類瘧疾感染致死率最高的病原體。惡性瘧原蟲的生活史包括在人體內的無性繁殖階段(紅外期和紅內期)以及在蚊體內的有性繁殖期(蚊期)。惡性瘧原蟲在紅細胞內期的裂體增殖是瘧疾發(fā)作的基礎,包括從裂殖子侵入紅細胞開始的裂殖子期、環(huán)狀體期、早期和晚期滋養(yǎng)體期直至裂殖體期。研究惡性瘧原蟲在紅細胞內的生長發(fā)育過程具有非常重要的意義。長鏈非編碼RNA是一類長度大于200核苷酸并且不具有蛋白編碼能力的轉錄本,占全部非編碼RNA的近80%。研究表明,lncRNA可通過繁復的機制參與有機體的各種活動,如表觀遺傳學修飾、轉錄和翻譯調控以及剪切拼接控制細胞周期、細胞分化和細胞凋亡等。惡性瘧原蟲基因組轉錄大量的lncRNA,但這些lncRNA在惡性瘧原蟲的增殖發(fā)育過程中的作用卻知之甚少。為了探索惡性瘧原蟲紅內期不同發(fā)育階段的lncRNA表達譜及其特異性。本研究采用山梨醇連續(xù)多次處理體外培養(yǎng)并處于環(huán)狀體的惡性瘧原蟲蟲株,獲得高度同步化、窗口小、蟲血率高并處于不同生長階段的惡性瘧原蟲蟲株,選取環(huán)期以及裂殖體期構建了2個時期的鏈特異性文庫,并進行Illumina/Solexa雙末端測序。通過進一步對環(huán)期與裂殖體期的測序數(shù)據(jù)進行生物信息學分析,序列比對、序列拼接、編碼潛能分析預測了55條在紅內期特異性表達的lncRNA。其中13條lncRNA通過RT-PCR得到驗證,為后期進一步研究惡性瘧原蟲紅內期期特異性表達的lncRNAs的功能提供了基本的數(shù)據(jù)信息。
【學位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2015
【中圖分類】：R382
【部分圖文】：

完成其生活史，包括Ｗ下兩個階段：第一階段：在蚊體內的有性生殖階段，完成配??子生殖（ｇａｍｅｔｏｇｏｎｙ），繼而進行抱子増殖（ｓｐｏｒｏｇｏｎｙ）［５，?６］；第二階段；在人體??內的無性繁殖階段，先后寄生于肝細胞和紅細胞內（圖１）。??Ｓｐ＞ｏｒｏｚｏｉｔｏ?ｇｌａｎｄ??Ｉ?Ｗ?Ｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｓ??盼？?Ｗ??Ｇａｍｅｔｏｃｙｔｅｓ．?＊??圖１追原蟲生活史模式圖巧］??拒原蟲在人體肝細胞內發(fā)育的階段稱紅細胞外期（ｅｘ〇－ｅ巧ｔｈｒｏ巧ｔｉｃ巧ｃｌｅ，??簡稱紅外期），紅細胞內的發(fā)育階段稱紅內期（ｅｒｒｔｈｒｏ＾ｔｉｃ巧ｃｌｅ）。紅內斯是從??紅細胞外期的裂殖子侵入紅細胞開始的，侵入的裂殖子先形成環(huán)狀體，攝取營養(yǎng)，??生長發(fā)育，經滋養(yǎng)體、未成熟裂殖體，最后形成含有一定數(shù)量裂殖子的成熟裂殖體。??紅細胞破裂后，裂殖子釋出，其中一部分被巨隨細胞吞隨，其余再侵入其他正常紅??細胞，重復其紅細胞內期的裂體增殖過程（圖２）?［７，引。??５??

經滋養(yǎng)體、未成熟裂殖體，最后形成含有一定數(shù)量裂殖子的成熟裂殖體。??紅細胞破裂后，裂殖子釋出，其中一部分被巨隨細胞吞隨，其余再侵入其他正常紅??細胞，重復其紅細胞內期的裂體增殖過程（圖２）?［７，引。??５??

（ｌｏｎｇＲＮＡｓ，ｌＲＮＡｓ）在全部ＲＮＡ中所占的比例在９４．７％，其中７９．６％是位于細胞??核中，１５．１％定位于細胞質中，這部分ＩＲＮＡｓ有大約４．?５％左右會剪切成轉錄本長度??小于２００ｎｔ的ＲＮＡ?（ｓｈｏｒｔ?ＲＮＡｓ，ｓＲＮＡｓ）?［２６］（見圖３），此類推，可知在哺孰??動物所有的非編碼轉錄本中ＬｎｃＲＮＡ所占的比例最高。??Ｂ?ＭｉｒｒｏｇａＭ?Ｐｏｒｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｇｃｎｏｍ??｜４１Ｖ１．２ＳＳｉ７１．１Ｓ４ｎｔｓ）??Ｉ??ＮｏｍｔｄｕｍＵｎｔ?Ｕｎｉｏｎ?ｏｆ?Ｔｎｎｔｃｒｉｂｅｄ?ＮｕｃｌｅｏｔｉｄＭ?Ｏｂｓ？ｆｖ？ｄ?ｉｎ?Ｌｃａ９?ａｎｄ?Ｓｈｏｒｔ?ＲＨＡｓ?ｉｎ?Ｔｗｏ?Ｃｅｉｌ?Ｌｉｎｅｓ??（１５Ｂ．７ＳＯ．妨化?１２７?％?ｏｆ?伽ｒｒ〇９ａｔｅ＜ｔ?６？ｎｏｍｅ＞??Ｅ?化山化?ｅｆｙ?Ｌｏｎｇ?Ｎｕｃｌｗ?ＲＮＡ?Ｌｗｇ?ｈｃｌｕｓｉｖａｌｙ??泌ｏｒｔＲＮＡｓ?Ｉ?＊１＊?Ｖ＊ｉ?Ｃｙｔｏｓｏ化ＲＮＡ??■?７９．６％??５前?化??ＬｏｎｇＥｘｄｕｗｖｅｉｙ?Ｉ?？?ＪＴ§?ｆｉｕｃｌｅｔｒＷ??Ｉ?Ｍ．３％?ｉＣｙｔｏｗＵｃＲＮＡ??？？?ｙ?ｒ?Ｔ??１?ｉ?ｉ??Ｖ，?Ｉ?＞?ｆ??＾?ｉｖｋ?ｍ?１０％??Ｘ?？?？?丄??、＊■．Ｉ．１：－＇：?＇?Ｉ?？??＇?卑游奸觀??？?１?？＊．－?ｉ?－?．?Ｉ??Ｉ??ＴｏＷ?Ｓｈｏｒｔ?ＲＮＡｉ??９９％??圖３轉錄本長度大于２（Ｘ）ｎｔ的ＩＲＮＡ在基因姐中比例（引自參考文獻［２引）??ＩｎｃＲＮＡ可由基因組上的任意位點轉錄產生［２引
【相似文獻】

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4 陶靈 ,游弋;惡性瘧原蟲的一種過氧化物氧化還原酶的分子克隆和鑒定[J];國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊);2001年02期

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10 韓志富;惡性瘧原蟲動力素蛋白Pfdyn功能研究及感染惡性瘧原蟲紅細胞膜蛋白質組檢測數(shù)據(jù)分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2004年

本文編號：2882970