發(fā)布時間：2020-11-14 02:40

　　 瘧疾是由瘧原蟲引起的一種嚴(yán)重的寄生蟲病。其中,惡性瘧原蟲是導(dǎo)致人類瘧疾感染致死率最高的病原體。惡性瘧原蟲的生活史包括在人體內(nèi)的無性繁殖階段(紅外期和紅內(nèi)期)以及在蚊體內(nèi)的有性繁殖期(蚊期)。惡性瘧原蟲在紅細(xì)胞內(nèi)期的裂體增殖是瘧疾發(fā)作的基礎(chǔ),包括從裂殖子侵入紅細(xì)胞開始的裂殖子期、環(huán)狀體期、早期和晚期滋養(yǎng)體期直至裂殖體期。研究惡性瘧原蟲在紅細(xì)胞內(nèi)的生長發(fā)育過程具有非常重要的意義。長鏈非編碼RNA是一類長度大于200核苷酸并且不具有蛋白編碼能力的轉(zhuǎn)錄本,占全部非編碼RNA的近80%。研究表明,lncRNA可通過繁復(fù)的機(jī)制參與有機(jī)體的各種活動,如表觀遺傳學(xué)修飾、轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控以及剪切拼接控制細(xì)胞周期、細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡等。惡性瘧原蟲基因組轉(zhuǎn)錄大量的lncRNA,但這些lncRNA在惡性瘧原蟲的增殖發(fā)育過程中的作用卻知之甚少。為了探索惡性瘧原蟲紅內(nèi)期不同發(fā)育階段的lncRNA表達(dá)譜及其特異性。本研究采用山梨醇連續(xù)多次處理體外培養(yǎng)并處于環(huán)狀體的惡性瘧原蟲蟲株,獲得高度同步化、窗口小、蟲血率高并處于不同生長階段的惡性瘧原蟲蟲株,選取環(huán)期以及裂殖體期構(gòu)建了2個時期的鏈特異性文庫,并進(jìn)行Illumina/Solexa雙末端測序。通過進(jìn)一步對環(huán)期與裂殖體期的測序數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析,序列比對、序列拼接、編碼潛能分析預(yù)測了55條在紅內(nèi)期特異性表達(dá)的lncRNA。其中13條lncRNA通過RT-PCR得到驗(yàn)證,為后期進(jìn)一步研究惡性瘧原蟲紅內(nèi)期期特異性表達(dá)的lncRNAs的功能提供了基本的數(shù)據(jù)信息。
【學(xué)位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R382
【部分圖文】：

完成其生活史，包括Ｗ下兩個階段：第一階段：在蚊體內(nèi)的有性生殖階段，完成配??子生殖（ｇａｍｅｔｏｇｏｎｙ），繼而進(jìn)行抱子増殖（ｓｐｏｒｏｇｏｎｙ）［５，?６］；第二階段；在人體??內(nèi)的無性繁殖階段，先后寄生于肝細(xì)胞和紅細(xì)胞內(nèi)（圖１）。??Ｓｐ＞ｏｒｏｚｏｉｔｏ?ｇｌａｎｄ??Ｉ?Ｗ?Ｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｓ??盼？?Ｗ??Ｇａｍｅｔｏｃｙｔｅｓ．?＊??圖１追原蟲生活史模式圖巧］??拒原蟲在人體肝細(xì)胞內(nèi)發(fā)育的階段稱紅細(xì)胞外期（ｅｘ〇－ｅ巧ｔｈｒｏ巧ｔｉｃ巧ｃｌｅ，??簡稱紅外期），紅細(xì)胞內(nèi)的發(fā)育階段稱紅內(nèi)期（ｅｒｒｔｈｒｏ＾ｔｉｃ巧ｃｌｅ）。紅內(nèi)斯是從??紅細(xì)胞外期的裂殖子侵入紅細(xì)胞開始的，侵入的裂殖子先形成環(huán)狀體，攝取營養(yǎng)，??生長發(fā)育，經(jīng)滋養(yǎng)體、未成熟裂殖體，最后形成含有一定數(shù)量裂殖子的成熟裂殖體。??紅細(xì)胞破裂后，裂殖子釋出，其中一部分被巨隨細(xì)胞吞隨，其余再侵入其他正常紅??細(xì)胞，重復(fù)其紅細(xì)胞內(nèi)期的裂體增殖過程（圖２）?［７，引。??５??

經(jīng)滋養(yǎng)體、未成熟裂殖體，最后形成含有一定數(shù)量裂殖子的成熟裂殖體。??紅細(xì)胞破裂后，裂殖子釋出，其中一部分被巨隨細(xì)胞吞隨，其余再侵入其他正常紅??細(xì)胞，重復(fù)其紅細(xì)胞內(nèi)期的裂體增殖過程（圖２）?［７，引。??５??

（ｌｏｎｇＲＮＡｓ，ｌＲＮＡｓ）在全部ＲＮＡ中所占的比例在９４．７％，其中７９．６％是位于細(xì)胞??核中，１５．１％定位于細(xì)胞質(zhì)中，這部分ＩＲＮＡｓ有大約４．?５％左右會剪切成轉(zhuǎn)錄本長度??小于２００ｎｔ的ＲＮＡ?（ｓｈｏｒｔ?ＲＮＡｓ，ｓＲＮＡｓ）?［２６］（見圖３），此類推，可知在哺孰??動物所有的非編碼轉(zhuǎn)錄本中ＬｎｃＲＮＡ所占的比例最高。??Ｂ?ＭｉｒｒｏｇａＭ?Ｐｏｒｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｇｃｎｏｍ??｜４１Ｖ１．２ＳＳｉ７１．１Ｓ４ｎｔｓ）??Ｉ??ＮｏｍｔｄｕｍＵｎｔ?Ｕｎｉｏｎ?ｏｆ?Ｔｎｎｔｃｒｉｂｅｄ?ＮｕｃｌｅｏｔｉｄＭ?Ｏｂｓ？ｆｖ？ｄ?ｉｎ?Ｌｃａ９?ａｎｄ?Ｓｈｏｒｔ?ＲＨＡｓ?ｉｎ?Ｔｗｏ?Ｃｅｉｌ?Ｌｉｎｅｓ??（１５Ｂ．７ＳＯ．妨化?１２７?％?ｏｆ?伽ｒｒ〇９ａｔｅ＜ｔ?６？ｎｏｍｅ＞??Ｅ?化山化?ｅｆｙ?Ｌｏｎｇ?Ｎｕｃｌｗ?ＲＮＡ?Ｌｗｇ?ｈｃｌｕｓｉｖａｌｙ??泌ｏｒｔＲＮＡｓ?Ｉ?＊１＊?Ｖ＊ｉ?Ｃｙｔｏｓｏ化ＲＮＡ??■?７９．６％??５前?化??ＬｏｎｇＥｘｄｕｗｖｅｉｙ?Ｉ?？?ＪＴ§?ｆｉｕｃｌｅｔｒＷ??Ｉ?Ｍ．３％?ｉＣｙｔｏｗＵｃＲＮＡ??？？?ｙ?ｒ?Ｔ??１?ｉ?ｉ??Ｖ，?Ｉ?＞?ｆ??＾?ｉｖｋ?ｍ?１０％??Ｘ?？?？?丄??、＊■．Ｉ．１：－＇：?＇?Ｉ?？??＇?卑游奸觀??？?１?？＊．－?ｉ?－?．?Ｉ??Ｉ??ＴｏＷ?Ｓｈｏｒｔ?ＲＮＡｉ??９９％??圖３轉(zhuǎn)錄本長度大于２（Ｘ）ｎｔ的ＩＲＮＡ在基因姐中比例（引自參考文獻(xiàn)［２引）??ＩｎｃＲＮＡ可由基因組上的任意位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生［２引
【相似文獻(xiàn)】

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9 李會良;利用基因組數(shù)據(jù)庫篩選惡性瘧原蟲抗原候選基因[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

10 韓志富;惡性瘧原蟲動力素蛋白Pfdyn功能研究及感染惡性瘧原蟲紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)組檢測數(shù)據(jù)分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

本文編號：2882970