目的:研究毛狀樣蛋白1(Cotl1)在炎癥條件下調(diào)節(jié)淋巴細胞遷移的分子機制。方法:CRISPR/Cas9敲除小鼠胰島血管內(nèi)皮細胞MS1的Cotl1基因;黏附實驗比較淋巴細胞與野生細胞株和敲除細胞株在LPS刺激下的黏附能力;RT-PCR及流式細胞術比較野生細胞株和敲除細胞株在LPS刺激下表面黏附分子ICAM1、VCAM1、P-selectin的表達情況;Transwell模型比較淋巴細胞在LPS刺激下穿過野生細胞株和敲除細胞株的遷移能力。結(jié)果:敲除細胞株Cotl1~(-/-)構(gòu)建成功;在LPS刺激下,淋巴細胞與野生細胞株MS1的黏附顯著高于敲除細胞株Cotl1~(-/-);同時,野生細胞株MS1表面黏附分子ICAM1、VCAM1、P-selectin的表達顯著高于敲除細胞株Cotl1~(-/-);淋巴細胞穿過野生細胞株MS1的能力顯著高于敲除細胞株Cotl1~(-/-)。結(jié)論:炎癥條件下Cotl1促進淋巴細胞與血管內(nèi)皮細胞的黏附及遷移。
【部分圖文】：

分別采用RT-PCR和流式方法檢測了MS1細胞和敲除細胞Cotl1-/-在LPS刺激下黏附分子ICAM1、VCAM1、P-selectin的表達情況，結(jié)果如圖3。在LPS刺激下，ICAM1、VCAM1、P-selectin的表達量均顯著升高，且MS1細胞表達的ICAM1、VCAM1、P-selectin要顯著高于敲除細胞Cotl1-/-，證明在炎癥條件下血管內(nèi)皮細胞MS1表面的黏附分子ICAM1、VCAM1、P-selectin上調(diào)表達。2.4 淋巴細胞跨血管內(nèi)皮細胞的遷移結(jié)果

用Transwell方法比較了在LPS刺激下淋巴細胞及亞群穿過MS1細胞和敲除細胞Cotl1-/-的差異，結(jié)果如圖4。統(tǒng)計結(jié)果發(fā)現(xiàn)總淋巴細胞穿過MS1細胞的比例顯著高于敲除細胞Cotl1-/-，說明Cotl1基因缺失嚴重影響了淋巴細胞的跨血管內(nèi)皮細胞遷移。我們同時分析了淋巴細胞不同亞群穿過MS1細胞和敲除細胞Cotl1-/-的遷移情況，發(fā)現(xiàn)CD4和CD8 T細胞穿過MS1細胞的比例顯著高于敲除細胞Cotl1-/-，而B細胞無顯著差異，說明CD4和CD8 T細胞的跨血管內(nèi)皮細胞遷移受到Cotl1基因的影響。圖3 內(nèi)皮細胞表面黏附分子的檢測

內(nèi)皮細胞表面黏附分子的檢測
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 何春水,沈文律,賴毅,強鷗,任敏;豚鼠血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)的研究[J];瀘州醫(yī)學院學報;2001年01期

2 張莉,魏樹均,梁曉俐;血管內(nèi)皮細胞平鋪技術的應用和體會(摘要)[J];細胞與分子免疫學雜志;1997年S1期

3 李英哲;血管內(nèi)皮細胞實驗研究概況[J];廣州中醫(yī)學院學報;1994年04期

4 Bull HA ,Machin SJ ,楊崇禮;血管內(nèi)皮細胞的止血功能[J];國外醫(yī)學.輸血及血液學分冊;1988年01期

5 孫國鳳;;東京大學克隆化血管內(nèi)皮細胞增殖因子[J];生物技術通報;1989年11期

6 袁海濤;田牛;;油酸所致急性肺水腫機制的研究[J];中國應用生理學雜志;1989年03期

7 鮑朗,戴保民;鉤端螺旋體糖脂蛋白對培養(yǎng)血管內(nèi)皮細胞的粘附導致細胞內(nèi)吞與病損[J];華西醫(yī)科大學學報;1989年02期

8 福田悟;孫文博;;血管內(nèi)皮細胞的生理和藥理學意義[J];國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊;1989年04期

9 ;藥物及細胞因子對血管內(nèi)皮細胞的干預作用[J];中國組織工程研究;2012年15期

10 曹梅;齊華林;李玉雯;陳春燕;桂莉;李偉;;瘦素在誘導血管內(nèi)皮細胞纖溶酶原激活物抑制物-1表達中的作用[J];海南醫(yī)學;2011年24期

相關博士學位論文 前10條

1 肖鳳君;miR-17-92調(diào)控血管內(nèi)皮細胞鐵死亡及機制研究[D];軍事科學院;2019年

2 郝一文;血管內(nèi)皮細胞蛋白激酶C與錨蛋白、CD44分子生物學特性之間關系的研究[D];中國醫(yī)科大學;2005年

3 趙啟韜;磷酯酰膽堿特異性磷脂酶C和膜整聯(lián)蛋白β4調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞凋亡信號通路的研究[D];山東大學;2005年

4 李曉冬;TNFα或mmLDL對血管內(nèi)皮細胞PAI-1基因表達的影響及其分子機制探討[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2002年

5 高詠梅;腫瘤壞死因子α和血管緊張素Ⅱ?qū)ρ軆?nèi)皮細胞組織因子表達及轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2000年

6 周鳴杰;熱刺激條件下血管內(nèi)皮細胞的形態(tài)變化及凋亡研究[D];上海交通大學;2007年

7 寧艷霞;類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白（StAR）在血管內(nèi)皮細胞和小鼠肝臟內(nèi)的表達及意義[D];復旦大學;2006年

8 劉虎仙;脂肪間充質(zhì)干細胞促進血管內(nèi)皮細胞功能活性的機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

9 李婧瑜;血管內(nèi)皮細胞和中性粒細胞遷移的細胞骨架調(diào)控機制[D];南開大學;2013年

10 孟艷芬;黑龍江立克次體與血管內(nèi)皮細胞及樹突狀細胞相互作用的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 文漢;兔骨髓間充質(zhì)干細胞誘導分化為血管內(nèi)皮細胞的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學;2018年

2 丁燕;血管內(nèi)皮細胞Deptor缺失mTOR信號通路活化促進血管增多[D];南方醫(yī)科大學;2017年

3 蔡長帥;鼠尾血管內(nèi)皮細胞分離、培養(yǎng)及鑒定[D];東北師范大學;2015年

4 馬俊偉;骨髓間充質(zhì)干細胞向血管內(nèi)皮細胞誘導分化的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2009年

5 丁洋;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞來源的血管內(nèi)皮細胞貼附ePTFE的實驗研究[D];安徽醫(yī)科大學;2008年

6 徐晉小;低濃度的長春花堿對血管內(nèi)皮細胞的增殖、趨化和管樣結(jié)構(gòu)生成的作用[D];浙江大學;2002年

7 陳瑤;IGF-1對受損血管內(nèi)皮細胞的影響及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2011年

8 張小燕;體外高糖狀態(tài)LPS對血管內(nèi)皮細胞分泌t-PA和PAI-1的影響[D];江西醫(yī)學院;2005年

9 李珊姍;Galectin-3調(diào)控Tip血管內(nèi)皮細胞塑管效應的機制研究[D];昆明醫(yī)科大學;2012年

10 張威;體外高甘油三酯狀態(tài)下LPS對血管內(nèi)皮細胞分泌功能的影響[D];南昌大學;2006年

本文編號：2882652