目的:研究行氣活血法代表中藥預(yù)知子,研究其種子提取物抑制肝癌細(xì)胞增殖的機(jī)制,研究其與常用細(xì)胞毒藥物、靶向藥物和抗癌中藥單體的聯(lián)合用藥并探索預(yù)知子種子提取物誘導(dǎo)胞質(zhì)空泡現(xiàn)象的機(jī)制。方法:（1）通過(guò)查閱考證相關(guān)本草文獻(xiàn)與相關(guān)臨床及實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道,分析中藥預(yù)知子的相關(guān)知識(shí)。（2）采用MTT法、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞術(shù)、基因芯片、PCR等方法觀察預(yù)知子種子提取物對(duì)SMMC7721肝癌細(xì)胞增殖、周期、凋亡、壞死和衰老的影響。（3）采用MTT法、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察評(píng)估預(yù)知子與常用化療藥物、靶向藥物及抗癌中藥單體聯(lián)合用藥的效果。（4）采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、PCR等方法評(píng)估預(yù)知子種子提取物誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)空泡的現(xiàn)象及機(jī)制;檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)基因和副凋亡相關(guān)基因的表達(dá),初步探索其機(jī)制。結(jié)果:（1）澄清了預(yù)知子臨床應(yīng)用的學(xué)術(shù)源流,梳理了其性味及功效主治的歷史認(rèn)識(shí)和現(xiàn)代認(rèn)識(shí)。（2）預(yù)知子種子提取物干預(yù)72h后,7721肝癌細(xì)胞的增殖受到顯著抑制,IC₅₀為917.4μg/ml。用藥預(yù)知子種子提取物375μg/ml、750μg/ml 72h后:G0/G1期細(xì)胞比例下降、S期細(xì)胞比例下降、G2/M期...

【文章頁(yè)數(shù)】：169 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖3.21預(yù)知子種子乙醇提取物150μg/ml、375μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用SMMC7721細(xì)胞72h

可見隨著AFSEE濃度提升,其對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC7721細(xì)胞惡性增殖的抑制作用增強(qiáng);隨著格列衛(wèi)濃度提升,其對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC7721細(xì)胞惡性增殖的抑制作用增強(qiáng);二者在接近IC50劑量聯(lián)用時(shí),其抑制作用高于各自單獨(dú)用藥,提示二者可能具有聯(lián)用前景。圖3.22預(yù)知子種子乙醇提取物750....

圖3.22預(yù)知子種子乙醇提取物750μg/ml、900μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用SMMC7721細(xì)胞72h

圖3.21預(yù)知子種子乙醇提取物150μg/ml、375μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用SMMC7721細(xì)胞72h(2)L02

圖3.23預(yù)知子種子乙醇提取物150μg/ml、375μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用L02細(xì)胞72h

可見隨著AFSEE濃度提升,其對(duì)正常肝細(xì)胞系L02細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng);隨著格列衛(wèi)濃度提升,其對(duì)正常肝細(xì)胞系L02的抑制作用增強(qiáng);二者在接近IC50劑量聯(lián)用時(shí),其抑制作用高于各自單獨(dú)用藥,提示二者聯(lián)用時(shí)毒性較單獨(dú)使用大,提示聯(lián)用需慎重。圖3.24預(yù)知子種子乙醇提取物750μg/ml....

圖3.24預(yù)知子種子乙醇提取物750μg/ml、900μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用L02細(xì)胞72h

圖3.23預(yù)知子種子乙醇提取物150μg/ml、375μg/ml與格列衛(wèi)1μg/ml、2μg/ml聯(lián)合用藥作用L02細(xì)胞72h(3)聯(lián)用評(píng)估

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