發(fā)布時間：2016-12-18 06:41

  本文關(guān)鍵詞：生當(dāng)歸及其不同炮制品干預(yù)小鼠血虛模型的代謝組學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2015年

生當(dāng)歸及其不同炮制品干預(yù)小鼠血虛模型的代謝組學(xué)研究

紀(jì)鵬  

【摘要】：中(獸)醫(yī)研究講究整體性,且中藥藥效具有多成分、多途徑、多靶點等特點,因此須從整體層面研究血虛與當(dāng)歸補血作用。本論文以生當(dāng)歸及其不同炮制品水煎液為研究對象,采用乙酰苯肼(APH)與環(huán)磷酰胺(CTX)聯(lián)合復(fù)制血虛小鼠模型,通過眼觀、血常規(guī)檢測來觀察血虛,檢測各組小鼠生理生化指標(biāo),觀察胸腺組織切片,采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、液相色譜-四級桿-飛行時間-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-Q/TOF-MS)代謝組學(xué)方法尋找出血虛差異性代謝物,分別采用相關(guān)性分析與熱圖分析來驗證篩選差異性代謝物方法的可靠性,將最終獲得的差異性代謝物輸入MetPA代謝通路分析軟件研究生當(dāng)歸及其不同炮制品補血作用機制,最后對以上各部分?jǐn)?shù)據(jù)進行整合化分析與相關(guān)性分析,為血虛的診斷與治療奠定基礎(chǔ),主要研究結(jié)果如下:1.生當(dāng)歸及其不同炮制品可以不同程度地改善血虛小鼠的臨床癥狀和血常規(guī)指標(biāo)下降、體質(zhì)量下降、臟器指數(shù)下降及血液中的ATP酶、6-磷酸-葡萄糖脫氫酶(G6PD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)與谷胱甘肽還原酶(GR)活性下降、高鐵血紅蛋白含量升高、促紅細(xì)胞生成素(EPO)的代償性升高。酒當(dāng)歸補血作用較好,其次為油當(dāng)歸、土當(dāng)歸、生當(dāng)歸與炭當(dāng)歸。2.采用GC-MS對血虛小鼠血漿、肝組織、脾組織與尿液整合代謝組學(xué)研究表明,生當(dāng)歸及其不同炮制品補血機制是恢復(fù)血虛小鼠體內(nèi)的丙氨酸、天冬氨酸與谷氨酸代謝,然后使谷氨酰胺與谷氨酸鹽代謝,甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝,精氨酸、脯氨酸代謝,糖酵解與糖異生代謝,丙酮酸代謝通路,三羧酸循環(huán)恢復(fù)正常,進而使半胱氨酸與蛋氨酸代謝,纈氨酸、亮氨酸與異亮氨酸生物合成,果糖與甘露糖代謝,氨基糖苷與核糖核苷代謝,甘油酯代謝通路及與其相關(guān)的磷酸肌醇代謝恢復(fù)正常,最終達到補血效果。3.采用LC-Q/TOF-MS對血虛小鼠肝組織、脾組織與尿液整合代謝組學(xué)研究同樣證實,生當(dāng)歸及其不同炮制品補血機制是恢復(fù)血虛小鼠體內(nèi)谷胱甘肽代謝通路,磷酸戊糖途徑,甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝,氨基糖和核苷酸糖代謝,接著恢復(fù)與谷胱甘肽代謝通路相關(guān)的半胱氨酸與蛋氨酸代謝,牛磺酸與亞�；撬岽�謝,精氨酸與脯氨酸代謝,谷氨酰胺與谷氨酸鹽代謝,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝,組氨酸代謝,與磷酸戊糖途徑相關(guān)的糖酵解與糖異生代謝,與甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝相關(guān)的甘油磷脂代謝,鞘磷脂代謝,三羧酸循環(huán),磷酸肌醇代謝,與氨基糖和核苷酸糖代謝相關(guān)的果糖與甘露糖代謝。4.經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)RBC、ATP酶、G6PD、GPX、GR、高鐵血紅蛋白、EPO含量與谷胱甘肽代謝,磷酸戊糖途徑,甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝,氨基糖和核苷酸糖代謝,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝關(guān)系密切,且篩選出7個血虛生物標(biāo)志物,包括L-谷氨酸、谷胱甘肽、焦谷氨酸、L-半胱氨酸、5-磷酸-D-核酮糖、N-乙酰神經(jīng)氨酸與L-谷氨酰胺。綜上所述,基于GC-MS與LC-Q/TOF-MS代謝組學(xué)研究各有優(yōu)點,兩者結(jié)合能全面分析作用機制和篩選血虛生物標(biāo)志物。APH與CTX造模后,引起谷胱甘肽代謝,磷酸戊糖途徑,甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝,氨基糖和核苷酸糖代謝,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝,及其相關(guān)代謝通路發(fā)生紊亂,最終引起血常規(guī)指標(biāo)下降、生化指標(biāo)異常、臨床血虛癥狀、胸腺組織萎縮。經(jīng)生當(dāng)歸及其不同炮制品水煎液、復(fù)方阿膠漿干預(yù)后,以上相關(guān)代謝與指標(biāo)均恢復(fù)正常,血虛癥狀消失。生當(dāng)歸及其不同炮制品補血機制即通過恢復(fù)谷胱甘肽代謝通路,磷酸戊糖途徑,甘氨酸、絲氨酸與蘇氨酸代謝,氨基糖和核苷酸糖代謝,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代謝來干預(yù)血虛。共篩選出7個血虛生物標(biāo)志物。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5;R-332
【目錄】：

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