發(fā)布時(shí)間：2020-12-11 00:05

　　目的:比較轉(zhuǎn)錄激活因子5（Activating transcription factor 5,ATF5）沉默前后鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期進(jìn)程的變化,探討ATF5沉默對(duì)鼻咽癌細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期影響的可能機(jī)制,為提高鼻咽癌治療效果提供新思路。方法:1)以鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞為研究對(duì)象,運(yùn)用sh RNA-ATF5慢病毒載體感染CNE-2Z細(xì)胞（sh RNA-ATF5組）,以慢病毒空載體感染CNE-2Z細(xì)胞（LV-sh RNANC）作為陰性對(duì)照組（NC組）,未感染慢病毒CNE-2Z細(xì)胞作空白對(duì)照組（Control組）。2)利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR）及蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞慢病毒干擾效率。3)采用流式細(xì)胞儀（Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS）Annexin VAPC單染法及Tunel免疫熒光檢測(cè)ATF5沉默前后CNE-2Z細(xì)胞凋亡率的變化,運(yùn)用碘化丙啶（Propidumiodid... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CNE-2Z細(xì)胞感染慢病毒的熒光表達(dá)情況

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月17圖2慢病毒感染CNE-2Z細(xì)胞后ATF5mRNA表達(dá)水平變化Fig.2ExpressionofATF5mRNAinCNE-2Zcellswithlentivirus注：A.擴(kuò)增曲線；B.溶解曲線；C.各組ATF5mRNA的表達(dá)水平比較；Control：空白對(duì)照組；NC：空載病毒的陰性對(duì)照組；shRNA-ATF5：ATF5沉默組；shRNA-ATF5groupvsControlandNC**P<0.014.1.3shRNA-ATF5在CNE-2Z細(xì)胞ATF5蛋白水平的干擾效率Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示，shRNA-ATF5組較Control組和NC組，ATF5蛋白表達(dá)水平明顯降低，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001,P=0.002，圖3），兩對(duì)照組間無明顯差異（P>0.05，圖3）。

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文仲秋月18圖3慢病毒感染CNE-2Z細(xì)胞后ATF5蛋白水平的干擾效率Fig.3ExpressionofATF5proteininCNE-2Zcellswithlentivirus注：Control：空白對(duì)照組；NC：空載病毒的陰性對(duì)照組；shATF5：ATF5沉默組；shATF5groupvsControlandNC**P<0.014.2ATF5沉默對(duì)CNE-2Z細(xì)胞凋亡的影響4.2.1流式細(xì)胞儀檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞凋亡率AnnexinV-APC單染法檢測(cè)CNE-2Z細(xì)胞凋亡水平顯示，shRNA-ATF5組較Control組、NC組CNE-2Z細(xì)胞的凋亡率均明顯增高（P=0.000，表11、圖4），差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩對(duì)照組間無明顯差異（P，表11、圖4）。表11ATF5沉默對(duì)CNE-2Z細(xì)胞凋亡率的影響Tab.11EffectonapoptosisofCNE-2ZcellsafterATF5silencing組別凋亡率（）Control3.610.10***NC3.800.18***shATF56.260.15注：shATF5groupvsControlandNC***P<0.001

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Bufalin suppresses the migration and invasion of prostate cancer cells through HOTAIR,the sponge of miR-520b[J]. Jian-jun Zhang,Xiao-hui Zhou,Yan Zhou,Yong-gang Wang,Bin-zhi Qian,Ai-na He,Zan Shen,Hai-yan Hu,Yang Yao.  Acta Pharmacologica Sinica. 2019(09)
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碩士論文
[1]沉默ATF5對(duì)卵巢癌細(xì)胞skov-3裸鼠成瘤的研究[D]. 谷雪.青島大學(xué) 2014
[2]沉默ATF5對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡及化療敏感性的影響[D]. 齊亞妮.青島大學(xué) 2012



本文編號(hào)：2909529