發(fā)布時間：2024-07-10 19:32

　　目的:體外培養(yǎng)小鼠MIN6細胞,并給予Ang(1-7)干預,利用免疫熒光技術在共聚焦顯微鏡下觀察細胞表面因子MafA、Ngn3的表達情況,及FoxO1在細胞內表達位置的變化,從而探討Ang(1-7)能否改善高糖誘導下的MIN6細胞去分化。方法:1.將小鼠MIN6細胞用按照一定比例配制的DMEN培養(yǎng)基接種于25ml培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5%CO2濃度的細胞孵箱中進行培養(yǎng)。每24小時更換培養(yǎng)液1次,待細胞生長至貼滿瓶壁80%時進行傳代培養(yǎng),根據細胞生長狀況,選取第3-4代細胞進行實驗操作。2.將細胞隨機分為四組,A組為正常對照無干預措施;B組加入提前配制的25mmol/L高糖溶液;C組加入25mmol/L高糖溶液+10^-5mol/L的Ang(1-7)溶液,(先加入Ang(1-7),30分鐘后加入高糖溶液);D組加入25mmol/L高糖溶液+10^-5mol/L的Ang(1-7)+10^-5mol/L的A-779溶液(先加入A-779,30分鐘后加入Ang(1-7),再過30分鐘加高糖溶液);相同條件下共同培養(yǎng)24小時。3.利用免...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
ABSTRACT
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實驗細胞
    1.2 實驗主要試劑
    1.3 實驗主要儀器
    1.4 實驗主要試劑配制方法
2 研究方法
    2.1 MIN-6 小鼠胰島細胞培養(yǎng)
    2.2 細胞爬片
        2.2.1 玻片制備
        2.2.2 細胞爬片
    2.3 實驗分組
    2.4 細胞免疫化學染色
    2.5 激光共聚焦顯微鏡成像
    2.6 統(tǒng)計學分析
3 結果
    3.1 顯微鏡下觀察各組MIN-6 細胞生長狀況
    3.2 MIN-6 細胞表面標志物MafA、Ngn3 的表達情況
    3.3 不同干預條件下 MIN6 細胞去分化標志物 Ngn3 表達情況
    3.4 不同干預條件下 Fox O1 在細胞內的表達位置情況
4 討論
5 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：4004621