發(fā)布時間：2020-12-03 09:26

　　本論文以豬肩胛骨為原料,通過酶解制備降血壓肽,以血管緊張素轉化酶（Angiot-ensin Ⅰ-Converting Enzyme, ACE）抑制率為主要指標,篩選出最適酶作為酶解用酶；通過單因素和響應面試驗優(yōu)化該種酶的酶解條件；在此基礎上,對酶解底物進行超聲波預處理,通過單因素和響應面試驗優(yōu)化超聲條件；利用超濾、凝膠層析等分離純化技術從酶解液中分離純化降血壓肽；探討豬肩胛骨降血壓肽耐消化特性及各種理化因素對其穩(wěn)定性的影響。研究結果如下。篩選出的最適蛋白酶為風味蛋白酶,最佳酶解條件為：pH 7.0、底物濃度5%、酶解溫度53℃、酶解時間4.5 h、酶底比6900 U/g。此條件下制備出豬肩胛骨降血壓肽的ACE抑制率為65.31%,半數(shù)抑制濃度（Half-inhibitory concentration, IC50）為1.34 mg/mL。對底物的超聲條件進行優(yōu)化,獲得的最佳超聲條件為：超聲時間25 min,超聲功率717 W,超聲溫度40℃,酶解時間3 h。此條件下制備出ACE抑制率為75.58%的豬肩胛骨降血壓肽。IC5o值為0.90 mg/mL。采用超濾離心管將酶解液分離為分子量大... 

【文章來源】：四川農業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 畜禽骨研究概況
        1.1.1 畜禽骨
        1.1.2 畜禽骨的營養(yǎng)價值
        1.1.3 畜禽骨膠原蛋白降血壓肽研究進展
    1.2 高血壓與血管緊張素轉化酶
    1.3 食源性降血壓肽
        1.3.1 酶解法制備降血壓肽
        1.3.2 超聲波輔助制備降血壓肽
    1.4 降血壓肽的分離純化
    1.5 降血壓肽活性的評價方法
        1.5.1 體外評價方法
        1.5.2 體內抑制率測定
    1.6 體外模擬胃腸道消化過程
    1.7 降血壓肽功能性食品研究進展
        1.7.1 降血壓肽對產品感官特性的影響
        1.7.2 食品加工對降血壓肽的影響
    1.8 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
    2.2 主要試驗儀器
    2.3 方法
        2.3.1 豬肩胛骨降血壓肽酶解條件優(yōu)化
        2.3.2 超聲波輔助酶解制備降血壓肽工藝優(yōu)化
        2.3.3 降血壓肽的分離純化
        2.3.4 不同理化因素對降血壓肽活性的影響測定
        2.3.5 降血壓肽體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性試驗
        2.3.6 指標測定
        2.3.7 統(tǒng)計分析
3 結果與分析
    3.1 蛋白質含量的測定結果
    3.2 酶活的測定結果
    3.3 蛋白酶篩選結果
    3.4 風味蛋白酶酶解條件優(yōu)化結果
        3.4.1 酶解溫度對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.2 酶解pH對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.3 酶解時間對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.4 酶底比對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.5 底物濃度對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.6 豬肩胛骨降血壓肽制備工藝響應面法優(yōu)化結果
    3.5 超聲波輔助酶解制備降血壓肽工藝優(yōu)化結果
        3.5.1 超聲功率對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.2 超聲時間對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.3 超聲溫度對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.4 超聲后酶解時間對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.5 超聲波輔助酶解制備降血壓肽的響應面優(yōu)化結果
    3.6 豬肩胛骨降血壓肽的分離純化結果
        3.6.1 超濾對豬肩胛骨降血壓肽的純化結果
        3.6.2 凝膠層析對豬肩胛骨降血壓肽的純化結果
    3.7 不同理化因素對降血壓肽活性影響的測定結果
        3.7.1 不同溫度對降血壓肽活性影響的測定結果
        3.7.2 不同pH對降血壓肽活性影響的測定結果
        3.7.3 食品添加劑對降血壓肽穩(wěn)定性影響的測定結果
    3.8 降血壓肽體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性測定結果
        3.8.1 酶解液的胃腸道穩(wěn)定性試驗測定結果
        3.8.2 超濾液的胃腸道穩(wěn)定性試驗測定結果
4 討論與結論
    4.1 討論
        4.1.1 關于選擇豬肩胛骨制備降血壓肽
        4.1.2 關于豬肩胛骨前處理
        4.1.3 關于豬肩胛骨的酶解
        4.1.4 關于底物的超聲波預處理
        4.1.5 關于分離純化
        4.1.6 關于豬肩胛骨降血壓肽的穩(wěn)定性
    4.2 結論
5 問題與展望
參考文獻
致謝
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【參考文獻】：
期刊論文
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[3]超濾法濃縮富集牡蠣蛋白抗氧化活性肽[J]. 郝更新,曹文紅,郝記明,章超樺.  食品工業(yè)科技. 2013(11)
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碩士論文
[1]綠豆粉絲廢水生物法制備降血壓肽的研究[D]. 龔琴.湖北工業(yè)大學 2011
[2]牛骨酶解制備血管緊張素轉換酶抑制肽的研究[D]. 蔡麗華.華中農業(yè)大學 2010
[3]豬髖骨膠原多肽的制備及其生物活性研究[D]. 李珂.湖南農業(yè)大學 2009



本文編號：2896263