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嗜熱四膜蟲錯(cuò)配修復(fù)蛋白Tmlh1的功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-06-08 03:47
  錯(cuò)配修復(fù)是一種高度保守的DNA修復(fù)途徑,在DNA復(fù)制、修復(fù)和基因重組過程中發(fā)揮著重要作用。在真核生物中,MutS識(shí)別DNA子鏈上的錯(cuò)配堿基并與之相結(jié)合,從而招募核酸內(nèi)切酶MutL形成三元復(fù)合物。真核生物中包含三種MutL異二聚體復(fù)合物MutLα,MutLβ,和MutLγ。Mlh1是MutL核心亞基,MutL復(fù)合物不僅參與DNA錯(cuò)配修復(fù)(MMR),而且在減數(shù)分裂基因重組中起到拆分異源雙鏈DNA的作用。單細(xì)胞真核生物嗜熱四膜蟲包含兩個(gè)細(xì)胞核,二倍體生殖小核(MIC)和多倍體體細(xì)胞核(MAC)。有性生殖過程中小核進(jìn)行減數(shù)分裂,配子融合后經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生新大核和新小核并傳遞給后代。在減數(shù)分裂前期,DNA雙鏈斷裂(DSB)觸發(fā)小核伸長(zhǎng),從而促進(jìn)同源配對(duì)和交叉互換(CO)。新大核的基因組發(fā)育自合子核,但經(jīng)歷了內(nèi)部序列刪除(IES)和DNA多輪復(fù)制。前期我們的研究表明嗜熱四膜蟲錯(cuò)配修復(fù)蛋白Mlh3參與調(diào)控基因組復(fù)制、染色體分離及DNA刪除,然而MutL核心亞基Tmlh1在其中發(fā)揮的作用并不清楚。本研究首次圍繞嗜熱四膜蟲錯(cuò)配修復(fù)蛋白Tmlh1進(jìn)行研究,獲得主要結(jié)果如下:1.TMLH1的鑒定和敲除突變體構(gòu)...

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1大腸桿菌中的MMR機(jī)制[8]

圖1.1大腸桿菌中的MMR機(jī)制[8]

嗜熱四膜蟲錯(cuò)配修復(fù)蛋白Tmlh1的功能分析2圖1.1大腸桿菌中的MMR機(jī)制[8]真核生物中的MMR系統(tǒng)與原核生物之間存在著一些差異。其主要由MutS和MutL組成,而MutH型核酸內(nèi)切酶尚未在真核生物中鑒定出來[9]。且原核生物中的MMR同型二聚體蛋白質(zhì)在真核生物中以異二聚體的形....


圖1.2已鑒定的MutS和MutL同系物[12]

圖1.2已鑒定的MutS和MutL同系物[12]

第一章文獻(xiàn)綜述3圖1.2已鑒定的MutS和MutL同系物[12]1.2錯(cuò)配修復(fù)蛋白Mlh1研究進(jìn)展1.2.1MutL家族復(fù)合物Mlh1(MutLHomologue1)是已知的MutL復(fù)合物的核心亞基[13]。酵母中三類MutL復(fù)合物之間存在功能分工,MutLα(ScMlh1-Sc....


圖1.3MutL家族蛋白結(jié)構(gòu)分析[17]

圖1.3MutL家族蛋白結(jié)構(gòu)分析[17]

嗜熱四膜蟲錯(cuò)配修復(fù)蛋白Tmlh1的功能分析4的Mlh1晶體結(jié)構(gòu)顯示,CTD的C末端形成四個(gè)β折疊,作為形成二聚體區(qū)域的S1位點(diǎn),以及最后10個(gè)高度保守殘基形成的無規(guī)卷曲,伸入另一亞基當(dāng)中;Mlh1-NTD的保守性更高,其N端形成α螺旋,尾部的無規(guī)卷曲也伸入另一亞基當(dāng)中,中部包含多....


圖1.4ATP濃度依賴的MutL核酸內(nèi)切酶活性調(diào)節(jié)模型[20]

圖1.4ATP濃度依賴的MutL核酸內(nèi)切酶活性調(diào)節(jié)模型[20]

第一章文獻(xiàn)綜述5MutL核酸內(nèi)切酶活性的“激活-衰減”模型(圖1.4)。即無ATP存在時(shí),MutL二聚體主要以靜止?fàn)顟B(tài)存在,沒有NTD與CTD結(jié)構(gòu)域間的相互作用。隨著ATP相對(duì)濃度的增加,靜止?fàn)顟B(tài)逐漸向活性狀態(tài)轉(zhuǎn)化,其中ATP優(yōu)先配位于NTD,從而促進(jìn)NTD與CTD的穩(wěn)定結(jié)合。A....



本文編號(hào):3991407

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