單花種蜂蜜摻假檢測方法的研究
本文選題:蜂蜜摻假 + 高效液相色譜 ; 參考:《江南大學(xué)》2016年碩士論文
【摘要】:蜂蜜作為天然物質(zhì),具有獨特的風(fēng)味、口感和營養(yǎng)價值,主要成分為葡萄糖和果糖,同時含有維生素,多種有機(jī)酸,無機(jī)鹽,礦物質(zhì)和微量元素,具有改善腸胃功能,提高免疫力等功效,同時還在燒傷燙傷,預(yù)防心血管疾病,促進(jìn)潰瘍、傷口愈合等方面具有較好的療效。近年來,蜂蜜的營養(yǎng)價值和保健作用逐漸被人們所熟知,國內(nèi)外對于蜂蜜的需求量也在不斷的增加,蜂蜜的產(chǎn)量難以滿足日益增長的市場需求,使得一些不法商販在利益的驅(qū)使下,通過摻入低價蜜、糖漿等甜味物質(zhì)等方式以假亂真、以次充好,增加蜂蜜產(chǎn)量。這嚴(yán)重擾亂了蜂蜜市場秩序,損害了正規(guī)蜂農(nóng)和企業(yè)的利益。針對較為普遍存在的蜂蜜摻假現(xiàn)象,目前國內(nèi)外應(yīng)用較為普遍且較有效的鑒別檢測方法,即穩(wěn)定碳同位素比例法和大米糖漿摻假的LC-MS/MS鑒定方法,所用儀器較為昂貴,難以推廣普及,且只能鑒別C3或C4植物糖漿中一類或一種摻假蜂蜜,有其局限性。因此,本文分別使用基于親水作用色譜(HILIC)分離-蒸發(fā)光散射檢測(ELSD)的高效液相色譜法(HPLC)和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)2種儀器較為普及的分析技術(shù)手段,成功的建立了對C4和C3植物糖摻假均適用的HPLC和LC-MS(單四極桿質(zhì)譜即可)兩種儀器較為普及、易于推廣應(yīng)用的摻假檢測方法。同時,根據(jù)近年來國外研究動態(tài),初步探索了核磁共振氫譜(1H-NMR)鑒定摻假蜂蜜的檢測方法。首先采集不同產(chǎn)地、不同種單花種蜂蜜樣本,利用穩(wěn)定碳同位素比例法和花粉粒檢測方法驗證樣本真實性,通過模擬摻假的方式建立摻假量為5%、10%、20%、30%(w/w)的摻假樣品集,再分別采用高效液相色譜(配有蒸發(fā)光散射檢測器,HPLC-ELSD)、高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜、核磁共振氫譜技術(shù)測定真假蜂蜜中糖類等主要物質(zhì)相對含量,通過圖譜對比,提取特征峰的相關(guān)信息,結(jié)合偏最小二乘判別分析(PLS-DA),對蜂蜜摻假進(jìn)行識別。研究結(jié)果表明:通過穩(wěn)定碳同位素比例法和花粉粒檢測驗證所采集的蜂蜜樣本為真實的單花種蜂蜜,其中只有一個樣本的蜜源檢測結(jié)果與實際蜜源不符,為其他蜜源的單花種蜂蜜。利用親水作用色譜柱分離低聚糖異構(gòu)體的優(yōu)勢,采用HPLC-ELSD分析純真蜂蜜和摻有果葡糖漿、麥芽糖漿的蜂蜜中糖類組成,構(gòu)建了蜂蜜低聚糖組分的指紋圖譜,確定了8個共有特征峰,并通過真假蜂蜜圖譜對比可以明顯的觀察到二糖色譜峰的差異,對提取的8個共有峰的相對面積百分含量進(jìn)行PLS-DA分析,結(jié)果為訓(xùn)練集的判別率為94.02%,驗證集的判別率可達(dá)100%,能成功的鑒別出果葡糖漿摻入量在10%以上、麥芽糖漿摻入量為5%以上的摻假蜂蜜樣品,且該方法儀器較普及,易于推廣,較適用于一般的基層蜂蜜企業(yè)和檢測機(jī)構(gòu)。利用親水作用色譜柱將蜂蜜中的低聚糖進(jìn)行分離,采用LC-MS在負(fù)離子模式下選擇離子監(jiān)測二糖、三糖、四糖、五糖的質(zhì)荷比(m/z)為341、503、665、827的分子離子,分別將提取的真蜂蜜與果葡糖漿、麥芽糖漿樣品的上述分子離子色譜圖進(jìn)行對比,發(fā)現(xiàn)具有明顯的差異性,進(jìn)行PLS-DA判別分析后,可以成功的將真假峰蜜進(jìn)行分類,在主成分得分圖中真假蜂蜜沒有出現(xiàn)重疊區(qū)域。通過真蜂蜜與摻有10%果葡糖漿和麥芽糖漿蜂蜜樣品的1H-NMR分析比較,根據(jù)它們的指紋峰差異,結(jié)合使用PLS-DA判別分析方法,建立了可以鑒別摻入量為10%以上果葡糖漿的蜂蜜摻假檢測方法,為今后進(jìn)一步應(yīng)用核磁共振等現(xiàn)代分析技術(shù)深入研究和建立更多的對C3和C4植物糖漿摻假均適用且滿足不同儀器設(shè)備條件實驗室檢測需求的蜂蜜摻假分析方法奠定了初步的基礎(chǔ)。
[Abstract]:High performance liquid chromatography ( HPLC ) and liquid chromatography - mass spectrometry ( LC - MS ) , which are widely used in treating burn and scald , prevent cardiovascular diseases , promote ulcer and wound healing . A method for the determination of honey adulterants by means of the method of stable carbon isotope ratio and pollen grain detection was carried out . The results showed that the results showed that the honey samples collected by the method of stable carbon isotope ratio and pollen grain were used in the identification of honey adulterated honey .
【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S896.1;O657
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,本文編號:1764635
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