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二硫化鉬與DNA、酶結(jié)合作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-20 09:56
  近年來(lái),二硫化鉬(MoS_2)納米片由于其獨(dú)特的光電性能,在催化、儲(chǔ)能、生物傳感、生物醫(yī)療等應(yīng)用領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注,但關(guān)于其在生物分子方面的生物相容性研究相對(duì)較少。本文從MoS_2納米片與DNA和葡萄糖氧化酶(GOx)兩種生物分子的相互作用入手,通過(guò)調(diào)控靜電作用,來(lái)分析MoS_2納米片與生物分子的結(jié)合特性及其對(duì)生物分子的影響。具體工作如下:探究MoS_2納米片與RhB和FAM兩種熒光染料的猝滅機(jī)理差異,發(fā)現(xiàn)MoS_2納米片與水溶性RhB的猝滅過(guò)程為靜態(tài)猝滅,與油溶性FAM的猝滅過(guò)程為動(dòng)態(tài)猝滅為主的混合猝滅過(guò)程。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明,MoS_2納米片主要通過(guò)靜電吸附與熒光染料結(jié)合發(fā)生能量轉(zhuǎn)移,來(lái)發(fā)揮其良好的猝滅性能;通過(guò)調(diào)控離子濃度、離子強(qiáng)度、溫度等因素,觀察了MoS_2納米片與DNA的結(jié)合特性。進(jìn)一步證實(shí)靜電作用對(duì)MoS_2納米片與DNA結(jié)合過(guò)程的影響。研究MoS_2納米片的類(lèi)過(guò)氧化物酶性能,測(cè)得其對(duì)于TMB和H2O2兩種底物的Km值分別為0.2174 mmol/L和4.569 mmol/L。利用酶結(jié)構(gòu)上-COOH與四乙基五胺(TEPA)發(fā)生酰胺化反應(yīng),對(duì)葡萄糖氧化酶(GOx)進(jìn)行陽(yáng)離子化改性。由于MoS_2納米片與酶的靜電作用,使得其與改性GOx的吸附量提高了32%。通過(guò)酶活實(shí)驗(yàn)探究了結(jié)合作用對(duì)酶結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果表明MoS_2納米片對(duì)天然酶活性有較強(qiáng)的破壞,改性能夠改善MoS_2納米片對(duì)酶活性的損傷,且MoS_2納米片與改性GOx之間存在協(xié)同效應(yīng)。上述研究為進(jìn)一步理解MoS_2納米片的生物作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ),對(duì)其應(yīng)用開(kāi)發(fā)具有重要的指導(dǎo)價(jià)值。
【學(xué)位授予單位】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:O614.612
文章目錄
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 緒論
    1.1 過(guò)渡金屬二硫化物的簡(jiǎn)介
    1.2 MoS2的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
        1.2.1 MoS2的基本理化性質(zhì)
        1.2.2 二維MoS2納米片的性質(zhì)
    1.3 MoS2納米片的制備方法
        1.3.1“由上至下”的制備方法
        1.3.2“由下至上”的制備方法
    1.4 MoS2的主要應(yīng)用
        1.4.1 潤(rùn)滑劑
        1.4.2 催化析氫
        1.4.3 儲(chǔ)能設(shè)備
        1.4.4 生物傳感器
        1.4.5 生物醫(yī)學(xué)
    1.5 論文研究思路及意義
第二章 MoS2與DNA結(jié)合過(guò)程的研究
    2.1 前言
    2.2 試劑與儀器
        2.2.1 試劑
        2.2.2 主要儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 MoS2納米片的合成
        2.3.2 MoS2猝滅RhB熒光染料實(shí)驗(yàn)
        2.3.3 MoS2猝滅FAM熒光染料的實(shí)驗(yàn)
        2.3.4 熒光壽命實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 MoS2與DNA的結(jié)合動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
        2.3.6 熒光法檢測(cè)核酸序列片段
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 MoS2納米片的表征
        2.4.2 MoS2納米片猝滅熒光染料機(jī)理
        2.4.3 MoS2與DNA的結(jié)合作用機(jī)理
    2.5 本章小結(jié)
第三章 MoS2調(diào)控酶活性研究
    3.1 前言
    3.2 試劑與儀器
        3.2.1 試劑
        3.2.2 主要儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 MoS2的類(lèi)過(guò)氧化物酶酶活性能測(cè)試
        3.3.2 GOx酶的改性實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 改性酶的活性測(cè)試
        3.3.4 酶與MoS2的結(jié)合活性實(shí)驗(yàn)
        3.3.5 酶結(jié)構(gòu)的表征
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 MoS2的類(lèi)過(guò)氧化物酶反應(yīng)條件優(yōu)化
        3.4.2 MoS2的類(lèi)過(guò)氧化物酶米氏常數(shù)的測(cè)定
        3.4.3 酶的改性對(duì)其結(jié)構(gòu)和活性的影響
        3.4.4 不同電性酶與MoS2結(jié)合的復(fù)合酶性能
    3.5 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 MoS2納米材料的生物效應(yīng)及應(yīng)用研究展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄

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本文編號(hào):1760695

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