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HNRPDL在慢性粒細胞白血病中的功能和機制研究

發(fā)布時間:2025-07-09 03:30
  目的:研究HNRPDL(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein D-like)在慢性粒細胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)細胞中的功能和機制。方法:(1)利用小鼠模型研究HNRPDL惡性轉(zhuǎn)化Ba F3細胞誘發(fā)白血病的能力;(2)利用Ba F3/BCR-ABL細胞為模型研究HNRPDL對BCR-ABL誘發(fā)小鼠白血病能力的調(diào)控作用;(3)研究干預HNRPDL對CML細胞伊馬替尼(Imatinib mesylate,IM)敏感性的影響;(4)通過比較HNRPDL沉默和對照K562細胞的基因表達譜,篩選HNRPDL潛在的下游靶基因;(5)在CML細胞中驗證基因表達譜所提示的差異表達基因,而后在K562細胞中研究PBX1沉默表達對細胞增殖、集落生成和IM敏感性的影響;(6)研究過表達PBX1對HNRPDL沉默所誘發(fā)表型的“挽救”效應;(7)使用熒光素酶報告基因和RNA免疫共沉淀(RIP)研究HNRPDL調(diào)控PBX1的分子機制。結(jié)果:(1)HNRPDL能惡性轉(zhuǎn)化Ba F3細胞誘發(fā)致死性小鼠白血病(對照組:0/8;HNRPDL組...

【文章頁數(shù)】:67 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1 HNRPDL惡性轉(zhuǎn)化Ba F3細胞

圖1 HNRPDL惡性轉(zhuǎn)化Ba F3細胞

本實驗室前期發(fā)現(xiàn)HNRPDL在CML患者CD34+細胞中高表達,[17]為研究其的生物學意義,通過小鼠尾靜脈注射1×106過表達HNRPDL的BaF3細胞和對照細胞到接受致死劑量輻射的BALB/c小鼠體內(nèi)(每組8只小鼠)。HNRPDL過表達組小鼠后期體重逐漸減輕并死亡(7/8),....


圖2 HNRPDL在CML患者CD34+急變期細胞中表達情況

圖2 HNRPDL在CML患者CD34+急變期細胞中表達情況

本論文中利用FACS純化10例CML急變期(blastcrisis,BP)患者CD34+細胞(圖2a/2b),Q-RT-PCR檢測顯示HNRPDL在BP期患者中表達較慢性期(chronicphase,CP)患者顯著增高(圖2c),提示HNRPDL有可能與誘發(fā)CML的BCR-A....


圖3 過表達HNRPDL協(xié)同BCR-ABL加速小鼠白血病發(fā)病進程

圖3 過表達HNRPDL協(xié)同BCR-ABL加速小鼠白血病發(fā)病進程

通過小鼠尾靜脈注射3×104的過表達HNRPDL的BaF3/BCR-ABL細胞和對照細胞到接受致死劑量輻射的BALB/c小鼠體內(nèi),每組各8只。體重曲線顯示HNRPDL過表達組小鼠體重下降快于對照組小鼠(圖3a)。Kaplan-Meier分析顯示HNRPDL過表達組小鼠存活時間顯....


圖4 HNRPDL沉默抑制Ba F3/BCR-ABL細胞的體外生長

圖4 HNRPDL沉默抑制Ba F3/BCR-ABL細胞的體外生長

為研究HNRPDL沉默對BaF3/BCR-ABL細胞生長的影響,用慢病毒載體遞送靶向HNRPDL的shRNA進入這些細胞。Westernblot顯示shRNA#2能抑制BaF3/BCR-ABL細胞中HNRPDL的表達(圖4a),HNRPDL沉默顯著抑制BaF3/BCR-A....



本文編號:4057079

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