發(fā)布時間：2024-07-09 02:37

　　原發(fā)性肝細(xì)胞癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,起病隱匿,多數(shù)患者確診時已達(dá)中晚期,已不適合行根治性手術(shù)治療,預(yù)后很差。肝動脈化療栓塞術(shù)(Transcatheter arterial chemoembolization,TACE)和肝動脈灌注化療(Hepatic arterial infusion chemotherapy,HAIC)在中晚期肝癌的治療中占有重要地位,但其療效在不同個體間的差異很大,而且化療藥物在肝癌中具體的作用機(jī)制仍不清晰。本課題中,我們首先發(fā)現(xiàn),化療藥物氟尿嘧啶和吡柔比星可以激活SMMC-7721 和 PLC/PRF/5 這兩株肝癌細(xì)胞系中 miR-34a,miR-34b 及 miR-34c 的表達(dá)。隨后,我們在肝癌細(xì)胞系中過表達(dá)miR-34s后進(jìn)行了細(xì)胞增殖、遷移及侵襲表型實(shí)驗(yàn)的研究,結(jié)果顯示,miR-34s可以有效抑制肝癌細(xì)胞的增殖及侵襲轉(zhuǎn)移。上述體外研究結(jié)果也在裸鼠皮下成瘤、尾靜脈轉(zhuǎn)移等動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中得到了證實(shí)。應(yīng)用生物信息學(xué)、蛋白質(zhì)免疫印跡及雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn),我們發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證了miR-34s的一個關(guān)鍵靶基因,即CTNND1。我們發(fā)現(xiàn),敲低CTNND1的表達(dá)可...

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１氟尿嘧啶和吡柔比星可以激活肝癌細(xì)胞系中ｍｉＲ－３４ｓ的表達(dá)

胞系中的半抑制濃度（ｈａｌｆ?ｍａｘｉｍａｌ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，?ＩＣ５０），結(jié)果??顯示氟尿嘧啶在ＳＭＭＣ－７７２１和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５的ＩＣ５０分別為５７．?５１和４２．?９５ｕＭ，而吡柔比??星則分別為５４．?５２和９５．?５５ｎＭ?（圖１Ａ....

圖２實(shí)時熒光定量ＰＣＲ檢測ｍｉＲ－３４ｓ?ｍｉｍｉｃｓ在ＰＬＣ／ＰＲＦ／５和ＳＭＭＣ－７７２１中的過表達(dá)效??

為了實(shí)現(xiàn)ｍｉＲ＿３４ｓ在肝癌細(xì)胞系中的過表達(dá)，我們應(yīng)用人工合成的ｍｉＲ－３４ｓ模??擬物（ｍｉｍｉｃｓ），以及陰性對照（Ｓｃｒａｍｂｌｅ），轉(zhuǎn)染ＳＭＭＣ－７７２１?和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５細(xì)??胞。如圖２所示，Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ結(jié)果表明，ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ....

圖３過表達(dá)ｍｉＲ－３４ｓ對肝癌細(xì)胞增殖、周期及凋亡的影響

我們在ＳＭＭＣ－７７２１和ＰＬＣ／ＰＲＦ／５細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－３４ｓ模擬物和陰性對照２４小時??后，將細(xì)胞重新鋪到９６孔板，并在鋪板后０小時、２４小時、４８小時、７２小時和９６小??時利用ＣＣＫ８試劑盒測定細(xì)胞活力，如圖３Ａ所示，過表達(dá)ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ－?....

圖４過表達(dá)ｍｉＲ－３４ｓ對肝癌細(xì)胞裸鼠皮下成瘤的影響

??圖４Ａ所示，我們發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ和ｍｉＲ－３４ｃ可以明顯抑制肝癌細(xì)胞??在裸鼠皮下的成瘤能力，其瘤塊的體積和重量均明顯小于陰性對照組。同時，??ＫＩ６７及Ｃａｓｐａｓｅ?３染色結(jié)果也表明，過表達(dá)ｍｉＲ＿３４ｓ可以在動物實(shí)驗(yàn)水平促進(jìn)調(diào)??亡，抑制增殖（....

本文編號：4004260