發(fā)布時間：2024-07-05 02:14

　　研究背景與目的肺癌是最常見的惡性腫瘤,其中非小細胞肺癌(NSCLC)約占原發(fā)性肺癌的85%左右。早期非小細胞肺癌的預后較好,但在臨床工作中大多數就診的患者已處于疾病的晚期。目前臨床上尚無能夠有效檢測非小細胞肺癌的生物標志物。外泌體(exosomes)是細胞釋放的,直徑在40-150nm的細胞外囊泡,其內包裹的核酸和蛋白質能夠反應細胞的內在變化,并且在疾病的發(fā)生進展中起著重要作用。本研究嘗試鑒別在非小細胞肺癌尤其是早期非小細胞肺癌與健康人群差異表達的exosomal微小RNA(microRNA),篩選出可作為診斷早期非小細胞肺癌的生物標志物。方法首先分析課題組前期血清及細胞上清exosomes測序結果,篩選出在肺癌exosomes中顯著差異表達的microRNA。進一步使用Exoquick外泌體分離試劑盒提取血清中的exosomes,通過實時熒光定量PCR分析非小細胞肺癌與健康對照組血清exosomes中microRNA的表達差異,通過計算受試者工作特征曲線(ROC曲線)評價候選生物標志物的診斷效能。通過實時熒光定量PCR觀察潛在microRNA在肺癌組織以及肺癌細胞中的表達水平。采用細...

【文章頁數】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Exosomal microRNA-744-5p是NSCLC的生物標志物
    1 引言
    2 實驗材料與試劑
        2.1 主要試劑
        2.2 主要耗材
        2.3 主要儀器
    3 實驗方法
        3.1 入組標準
        3.2 血清樣品收集以及預處理
        3.3 血清exosomes分離
        3.4 Exosomes RNA提取
        3.5 qPCR定量檢測microRNA
        3.6 統(tǒng)計分析
    4. 實驗結果
        4.1 臨床標本基本信息
        4.2 差異表達exosomal microRNA的初步驗證
        4.3 Exosomal microRNA-744-5p的診斷效能評價
        4.4 Exosomal microRNA-744-5p是診斷早期非小細胞肺癌的生物標志物
    5 討論
第二部分 microRNA-744-5p在肺癌細胞增殖、遷移和侵襲中的作用
    1 引言
    2 實驗材料和試劑
        2.1 實驗所用細胞株
        2.2 主要試劑
        2.3 主要耗材
        2.4 主要儀器
    3 實驗方法
        3.1 肺癌組織標本收集
        3.2 非小細胞肺癌細胞的復蘇、傳代和凍存
        3.3 腫瘤組織和細胞系中總RNA提取
        3.4 qRCR定量檢測microRNA
        3.5 細胞功能學實驗
        3.6 統(tǒng)計分析
    4 實驗結果
        4.1 microRNA-744-5p在非小細胞肺癌組織中高表達
        4.2 microRNA-744-5p在非小細胞肺癌細胞中高表達
        4.3 microRNA-744-5p促進非小細胞肺癌的增殖能力
        4.4 microRNA-744-5p促進非小細胞肺癌的遷移和侵襲能力
    5 討論
全文總結
    一、主要結果與創(chuàng)新之處
    二、后續(xù)工作計劃
參考文獻
英文縮略詞表
個人簡介及成果
致謝



本文編號：4000881