發(fā)布時(shí)間：2018-02-02 05:52

  本文關(guān)鍵詞： 誘騙受體- RNA干擾 胰腺癌 凋亡 化療敏感性　出處：《中國(guó)癌癥雜志》2017年11期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：背景與目的:大部分胰腺癌具有高表達(dá)誘騙受體-3(decoy receptor 3,Dc R3)的特征,而后者與Fas L凋亡途徑相關(guān),可能導(dǎo)致胰腺癌對(duì)化療耐藥。該研究旨在探討RNA干擾沉默Dc R3基因?qū)θ艘认侔┘?xì)胞化療藥物敏感性的影響及其可能機(jī)制。方法:構(gòu)建帶有Dc R3-si RNA序列的穩(wěn)定表達(dá)質(zhì)粒,通過(guò)LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染至人胰腺癌細(xì)胞As PC-1細(xì)胞株,篩選出轉(zhuǎn)染后穩(wěn)定低表達(dá)Dc R3的胰腺癌細(xì)胞,同時(shí)設(shè)未轉(zhuǎn)染對(duì)照組(control組)和轉(zhuǎn)染陰性質(zhì)粒對(duì)照組(mock組)。應(yīng)用ELISA和蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)檢測(cè)各組As PC-1細(xì)胞中Dc R3的蛋白表達(dá);MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組As PC-1細(xì)胞對(duì)吉西他濱的敏感性;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組As PC-1細(xì)胞凋亡情況;Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)檢測(cè)各組As PC-1細(xì)胞中Fas L、Caspase-8、Caspase-3蛋白和m RNA的表達(dá)。結(jié)果:轉(zhuǎn)染Dc R3-si RNA后As PC-1細(xì)胞中Dc R3蛋白較其他對(duì)照組明顯降低;轉(zhuǎn)染Dc R3-si RNA后As PC-1細(xì)胞對(duì)吉西他濱的敏感性顯著增加;沉默Dc R3基因可以上調(diào)Fas L、Caspase-8和Caspase-3的表達(dá)并促進(jìn)吉西他濱誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。結(jié)論:RNA干擾沉默Dc R3基因可激活Fas L/Caspase凋亡途徑,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,增加人胰腺癌As PC-1細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。
[Abstract]:Background & AIM: most pancreatic carcinomas are characterized by high expression of decoy receptor 3DcR3, which is associated with Fas L apoptosis pathway. The aim of this study was to investigate the effect of RNA interference silencing DC R3 gene on chemosensitivity of human pancreatic cancer cells and its possible mechanism. The stable expression plasmid of R3-si RNA sequence. Human pancreatic cancer cells as PC-1 cells were transfected with LipofectamineTM2000, and stable and low expression of DC R3 was obtained after transfection. At the same time, the control group without transfection and the control group with negative plasmid transfection were divided into two groups. ELISA and protein were used. [The protein expression of DC R3 in as PC-1 cells was detected by Western blot. The sensitivity of as PC-1 cells to gemcitabine was detected by MTT assay. Apoptosis of as PC-1 cells was detected by flow cytometry. Western blot and Real-time fluorescence quantitative Polymerase chain reaction. Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction. RTFQ-PCR was used to detect Fas Lncaspase-8 in as PC-1 cells. Results: after transfection of DC R3-si RNA, the expression of DC R3 protein in as PC-1 cells was significantly lower than that in other control groups. The sensitivity of as PC-1 cells to gemcitabine was significantly increased after transfection of DC R3-si RNA. Silencing DC R3 gene could up-regulate Fas L. The expression of Caspase-8 and Caspase-3 and the apoptosis induced by gemcitabine. Conclusion the silencing of DC R3 gene by Caspase-8 interference can activate Fas. L- caspase apoptosis pathway. Promote apoptosis of human pancreatic cancer cells and increase the sensitivity of as PC-1 cells to chemotherapeutic drugs.
【作者單位】： 湘南學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤防治中心;美國(guó)密蘇里大學(xué)醫(yī)學(xué)院Ellis
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金(14JJ3136) 郴州市科技局科研基金(CZ2013096)
【分類(lèi)號(hào)】：R735.9
【正文快照】： 胰腺癌是一種臨床表現(xiàn)隱匿、發(fā)展迅速、德國(guó)QIAGEN公司,ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美預(yù)后極差的消化道惡性腫瘤,由于胰腺癌早期國(guó)Bio-Techne公司,Dc R3、β-actin、Caspase-8癥狀隱匿,診斷困難,因而存活率極低[1]。化和Caspase-3抗體購(gòu)自美國(guó)Cell Signaling療是其重要的治療方法,然

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本文編號(hào)：1483777