發(fā)布時(shí)間：2018-02-01 03:38

  本文關(guān)鍵詞： microRNA-192和-215 胃癌 BIVM　出處：《深圳大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景與目的微小RNA(microRNA,miRNA)是一類19-22個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼小RNA,miRNA的5’端的2-7個(gè)核苷酸的“種子序列”可以與靶mRNA的3’端非翻譯區(qū)互補(bǔ)結(jié)合,在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的表達(dá)。1993年,miRNA-lin-4被發(fā)現(xiàn),此后又陸續(xù)從線蟲、果蠅、家鼠、擬南芥及人類等多種真核生物中發(fā)現(xiàn)了這類小分子RNA,據(jù)推測(cè)在人類染色體上就有1000余種miRNA,目前已有超過700種得到確認(rèn)。miRNA的編碼基因是目前最大的一類調(diào)節(jié)基因。它在細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、發(fā)育和凋亡等諸多重要過程中均發(fā)揮了關(guān)鍵作用,并與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。大量研究表明,miRNAs在腫瘤中扮演著相當(dāng)于癌基因或抑癌基因的角色,調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的多種重要的生物學(xué)行為。胃癌(gastric cancer)是世界上最常見的惡性腫瘤之一;在我國其發(fā)病率居各類腫瘤的首位,每年有超過17萬人死于胃癌。目前,住院病例中90%為進(jìn)展期胃癌,盡管針對(duì)胃癌的診斷和治療已經(jīng)有了長(zhǎng)足的進(jìn)步,但進(jìn)展期胃癌的預(yù)后依然很差,五年生存率長(zhǎng)期徘徊在30%左右。近年來已發(fā)現(xiàn)胃癌的發(fā)生是多基因改變的結(jié)果,且已有證據(jù)表明miR-21,miR-191,miR-223,let-7a microRNA,miR-106b-25亞群等與胃癌的發(fā)生密切相關(guān):let-7 microRNA,miR-155等與胃癌的侵襲與轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。隨著越來越多的miRNA在胃癌中被發(fā)現(xiàn),miRNA在胃癌的基因診斷和治療中將發(fā)揮更為重要的作用。目前,還沒有關(guān)于BIVM(for basic,immunoglobulin-like variable motif-containing)與胃癌關(guān)系的研究。基于本課題組有關(guān)胃癌miRNA表達(dá)譜的研究,我們初步確定BIVM為研究重點(diǎn)。以BIVM基因?yàn)闄z索詞,利用四個(gè)常用數(shù)據(jù)庫microRNA.org、Target Scan、Pictar和miRanda進(jìn)行相互作用miRNAs的預(yù)測(cè),挑選出預(yù)測(cè)值較高(至少三個(gè)軟件均預(yù)測(cè)到)的MiR-192和miR-215作為候選miRNAs;基因芯片、Real-time RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示MiR-192和miR-215可能是BIVM相互作用的miRs:熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)結(jié)果顯示miR-192和miR-215 inhibitors上調(diào)BIVM的后轉(zhuǎn)錄水平;然而MiR-192和miR-215 mimics起相反作用。向胃細(xì)胞系HFE145、SGC7901、BGC823中轉(zhuǎn)染BIVM-siRNA以降低BIVM的蛋白表達(dá)水平來研究BIVM對(duì)胃細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。
[Abstract]:Background and objective MicroRNAs miRNAs are a class of 19-22 nucleotides endogenous non-coding small RNA. The "seed sequence" of 2-7 nucleotides at the 5'end of miRNA can be complementary to the 3'-terminal untranslated region of the target mRNA, regulating the expression of the target gene at the post-transcriptional level. 1993. MiRNA-lin-4 was discovered, and RNA was found in a variety of eukaryotes such as nematodes, Drosophila, mice, Arabidopsis thaliana and humans. It is speculated that there are more than 1000 kinds of miRNAs on human chromosomes. At present, more than 700 kinds of miRNAs have been identified as the largest class of regulatory genes. Proliferation, development and apoptosis play a key role in many important processes, and are closely related to the occurrence and development of many kinds of tumors. MiRNAs plays the role of oncogene or tumor suppressor gene in tumors. Gastric cancer is one of the most common malignant tumors in the world. At present, 90% of the hospitalized cases are advanced gastric cancer, although the diagnosis and treatment of gastric cancer has made great progress. However, the prognosis of advanced gastric cancer is still very poor, the long-term survival rate of five years hovering around 30%. In recent years, it has been found that the occurrence of gastric cancer is the result of multiple gene changes, and there is evidence that miR-21. MiR-191 and miR-2223 let-7a microRNA. MiR-106b-25 subsets were closely related to the occurrence of gastric cancer: let-7 microRNA. MiR-155 et al are closely related to the invasion and metastasis of gastric cancer. With more and more miRNA found in gastric cancer. MiRNA will play a more important role in the gene diagnosis and treatment of gastric cancer. At present, there is no BIVM(for basic. Immunoglobulin-like variable motif-containing). Study on the relationship between gastric cancer and gastric cancer. Based on the study of miRNA expression profile of gastric cancer. We preliminarily identified BIVM as the focus of our research. With the BIVM base as the key word, we used four commonly used databases, microRNA.org.Target Scan. Pictar and miRanda were used to predict the interaction of miRNAs. MiR-192 and miR-215 with high predictive value (at least three softwares predicted) were selected as candidates; Gene chip. The results of Real-time RT-PCR and Western blot suggest that MiR-192 and miR-215 may be MIRs that interact with BIVM:. The results of luciferase reporting system showed that miR-192 and miR-215 inhibitors up-regulated the post-transcription level of BIVM. However, MiR-192 and miR-215 mimics had the opposite effect on the gastric cancer cell line HFE145GC7901. The effect of BIVM on the biological function of gastric cells was studied by transfection of BIVM-siRNA in BGC823 to reduce the expression of BIVM protein.
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.2

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本文編號(hào)：1480830